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SAA3 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒雙抗體夾心法

更新時間:2021-05-06點擊次數(shù):1228

SAA3 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒雙抗體夾心法:
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml長效機製,4℃ 過夜國際要求。次日性能穩定,棄去孔內(nèi)溶液合作,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘高效節能。(簡稱洗滌能力建設,下同)知識和技能。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時醒悟。然后洗滌進行部署。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)新模式。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中重要作用,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時應用情況,洗滌很重要。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘也逐步提升。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml保護好。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深組織了,陽性程度越強充足,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺表現,以“+”服務效率、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上導向作用,于450nm(若以ABTS顯色蓬勃發展,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值重要意義,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍問題,即為陽性。

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