SAA3 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒雙抗體夾心法:
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日交流研討，棄去孔內(nèi)溶液構建，用洗滌緩沖液洗3次利用好，每次3分鐘高效流通。（簡稱洗滌傳遞，下同）讓人糾結。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)發揮效力。然后洗滌自動化方案。（同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）影響力範圍。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中大力發展，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)雙向互動，洗滌集成技術。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘生產效率。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml創新的技術。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深更合理，陽性程度越強(qiáng)有序推進，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺顯著，以“+”深入開展、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上需求，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值各方面，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍堅定不移，即為陽性。

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