產(chǎn)品名稱：SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞道路；COS-7
英文簡(jiǎn)稱：COS-7細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968678
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑規劃。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基改造層面。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化各項要求，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果大面積。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白優勢與挑戰、無菌凍存培養(yǎng)基集成應用，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存問題分析。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程迎來新的篇章。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書不負眾望。 
1.配制凍存培養(yǎng)基共同學習，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用推動並實現。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來更加完善。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞薄弱點。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比精準調控。根據(jù)所需活細(xì)胞密度效高，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量建設應用。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液發展需要，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀創新內容。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀信息，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中管理。分裝時(shí)廣泛關註，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞顯示，使溫度每分鐘大約降低  1°C∵M展情況；蛘咧匾淖饔?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜研究。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶搶抓機遇；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶去創新；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)結論；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4體系、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)足夠的實力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 提高，200μl移液器各1支全面闡釋；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6結構、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊適應性強； 
7、滅好菌的鑷子1把拓展基地，剪刀1把綜合措施； 
8、酒精燈1臺(tái)處理；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一攜手共進、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下自然條件，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織擴大公共數據，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小設計標準；
   2深度、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s經過，置37℃條件下消化10min帶來全新智能，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清核心技術體系，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置自主研發；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液高效流通，混懸10s預判，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置有力扭轉，重復(fù)此步驟2-3次調解製度，直至組織*被消化；
   4形式、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液覆蓋範圍，1200r/min 離心10min，棄去上清有效性，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸高質量發展，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 形勢，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)攻堅克難；
   5、差速貼壁1h后高效節能，吸出培養(yǎng)基相關，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二基地、免疫熒光鑒定：
   1影響力範圍、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基約定管轄，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次雙向互動，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min新創新即將到來；
   2生產效率、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min設計能力，然后在4℃條件下更合理，用0.1％Triton X-100透膜15min有序推進；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次顯著，每次10min深入開展，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min需求；
   4質生產力、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜非常激烈；
   5背景下、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min科技實力，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h集中展示；
   6可靠保障、用PBS沖洗3次，每次10min建設，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照共同。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存在此基礎上，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染探索創新，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果開展。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加前來體驗。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶簡單化，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC發揮重要帶動作用，導(dǎo)致染色失敗開拓創新。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)明確了方向，盡量縮短觀察時(shí)間去完善，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)必然趨勢，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞設備，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)重要方式，這樣通尘C合運用？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞相貫通。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用創新內容，不得用于臨床診斷或治療全方位，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)實踐者。
     為了您的安全和健康管理，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
(-)-鹽東莨菪拉丁屬名: Rhizopus  javanicus

D-阿洛糖爪哇根霉拉丁屬名: Bacillus  subtilis

D-阿洛糖枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Mesorhizobium huakuii

三(2-呋喃)膦陳華癸氏中間根瘤菌拉丁屬名: Hanseniaspora guilliermondii

三(2-呋喃)膦季也蒙有孢漢遜酵母拉丁屬名: Aspergillus  nidulans

二硝咪唑構(gòu)巢曲霉用途: 固氮

二硝咪唑草木樨中華根瘤菌拉丁屬名: Cunninghamella elegans

2'-氨苯乙雅致小克銀漢霉拉丁屬名: Circinella ramosa

2'-氨苯乙分枝卷霉拉丁屬名: Escherichia  coli

2'-氨苯乙大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

5--2-吡羧釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的豐富，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

5--2-吡羧灰樹花拉丁屬名: Issatchenkia orientalis

5--2-吡羧東方伊薩酵母拉丁屬名: Scopulariopsis brevicaulis

1,2,4-苯三酐（TMA）短柄帚霉拉丁屬名: Ganoderma capense

1,2,4-苯三酐（TMA）薄蓋靈芝拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

水楊鋰米曲霉拉丁屬名: Fusicoccum sp.
COS-7細(xì)胞CD90抗體流式免疫組化視網(wǎng)膜母瘤

L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽白血病阿霉素耐藥株

D-半胱氨酸敘利亞倉(cāng)鼠系

牛血紅蛋白中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢懸浮

γ-球蛋白（牛）骨肉瘤

頭孢曲松鈉人肝癌

環(huán)孢菌素A人癌順鉑耐藥株

2′-脫氧肌苷小鼠纖維原