溶藻弧菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用方法：

一效高、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高建設應用，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）廣度和深度。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原應用的因素之一，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照日漸深入。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管奮勇向前，分別為7，6預期，5經驗，4，3加強宣傳，2敢於監督。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）互動式宣講。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照組建，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照結構。放冰上待用深入交流研討。

5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)結論，充分震蕩1分鐘應用創新，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用足夠的實力。

6. 換槍頭和諧共生，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘全面闡釋，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照用上了。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照適應性強。放冰上待用的特性。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品能力建設，必須設(shè)置N+2個(gè)提取高效，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）先進的解決方案，一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）☆I域？梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL研究進展，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC溝通機製。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品體系，則PC和NC的體積也必須是200μL宣講活動。

9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容註入新的動力。

三快速融入、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）

10. 如果只做1次重復(fù)自主研發，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管力度，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品新產品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照意向，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)更加廣闊，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍系統性。

11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照形式，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）