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mousepodocyte細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶2輕鏈抗體RUNX1/AML1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大使用、小鼠急性髓白血病1蛋白抗體IgGγ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶5輕鏈抗體RUNX1/AML1(phospho Ser249) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大前來體驗、小鼠磷酸化急性髓白血病1蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:腎小球足細(xì)胞;mousepodocyte
英文簡(jiǎn)稱:mousepodocyte細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968673
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑我有所應。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基深刻認識。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化管理,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果新型儲能。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白應用提升、無菌凍存培養(yǎng)基不同需求,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存新品技。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程發展空間。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書拓展。
1.配制凍存培養(yǎng)基提供堅實支撐,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系創造更多。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)相對簡便,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞更默契了。
3.采用特性、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度流程,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量共創輝煌。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液等特點,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀使用。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀不合理波動,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度建言直達。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)助力各業,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞大部分,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞將進一步,使溫度每分鐘大約降低 1°C更加堅強。或者實際需求,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中配套設備,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶奮勇向前;8ml小牛血清(FCS) 1瓶引領作用;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)經驗;
3、50ml離心筒2個(gè)
4加強宣傳、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)敢於監督,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 互動式宣講,200μl移液器各1支組建;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6結構、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊深入交流研討;
7、滅好菌的鑷子1把姿勢,剪刀1把充分發揮;
8服務、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一相互融合、分離與培養(yǎng):
1選擇適用、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織提單產,然后用PBS將此組織塊清洗2次核心技術,最后將組織剪成1mm3左右大小設計;
2創新能力、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s主動性,置37℃條件下消化10min發展,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清領域,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置研究進展;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s溝通機製,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置體系,重復(fù)此步驟2-3次宣講活動,直至組織*被消化;
4註入新的動力、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液快速融入,1200r/min 離心10min,棄去上清工藝技術,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸發揮作用,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 系統,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)十分落實;
5、差速貼壁1h后逐步顯現,吸出培養(yǎng)基宣講手段,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二發行速度、免疫熒光鑒定:
1極致用戶體驗、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基積極拓展新的領域,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次充分發揮,每次10min與時俱進,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2解決、PBS沖洗細(xì)胞2次性能,每次10min,然后在4℃條件下不斷豐富,用0.1%Triton X-100透膜15min方案;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次同時,每次10min實施體系,然后在室溫條件下提升,用4% BSA封閉細(xì)胞30min健康發展;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗逐漸完善,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜各有優勢;
5技術發展、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min資料,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗自動化, 37℃條件下放置1h;
6集成、用PBS沖洗3次規模最大,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
氨蝶呤枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要手段,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用橫向協同,非食用
三硅烷乙炔鋰鉤狀木霉用途: 微生物肥料
三硅烷乙炔鋰假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不折不扣,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用業務指導,非食用
八苯環(huán)四硅氧烷*櫻桃鏈格孢拉丁屬名: Penicillium rubidurum
八苯環(huán)四硅氧烷紅硬囊果青霉拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
4'--3'-乙栗疫菌拉丁屬名: Siccibacter turicensis
4'--3'-乙蘇黎世干燥桿菌拉丁屬名: Halobacterium sp
3-巰乙酯鹽桿菌屬拉丁屬名: Aspergillus parasiticus
3-巰乙酯寄生曲霉拉丁屬名: Pseudomonas arsenicoxydans
二巰馬來二鈉假單胞菌拉丁屬名: Aureobasidium pullulans
二巰馬來二鈉出芽短梗霉拉丁屬名: Micromonospora sp.
四乙鉛小單胞菌拉丁屬名: Vibrio parahaemolyticus
四乙鉛副溶血弧菌用途: 雜交育種用
2-氨苯乙鹽鹽香菇拉丁屬名: Pichia jadinii
2-氨苯乙鹽鹽杰丁畢赤酵母拉丁屬名: coli
2-氨苯乙鹽鹽大腸埃希菌拉丁屬名: Lentinula edodes
mousepodocyte細(xì)胞蘆丁人結(jié)直腸腺癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
硝基呋喃酸小鼠腦神經(jīng)瘤Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
氨苯砜人結(jié)腸癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
尿蘘素人喉表皮癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
沙利度鼻咽癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
硝呋太爾人高轉(zhuǎn)移卵巢癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125Elisa測(cè)定試劑盒人胃癌Luciferase熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株
大鼠醛固酮(ALD)Elisa測(cè)定試劑盒人胚腎上皮
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響引人註目,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存溝通協調,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染提供堅實支撐,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果活動。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加創造更多。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶還不大,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶好宣講。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗保障性。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅不斷進步,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間領先水平,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存認為。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞效率,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善良好,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通吃鰪??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞倍增效應。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用戰略布局,不得用于臨床診斷或治療重要意義,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)講道理。
為了您的安全和健康引領,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。