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mouseHC11細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G氨丁酸B型受體2抗體PTEN/MMAC1 /FITC 熒光素標(biāo)記一種腫瘤抑制因抗體(C端)IgG葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)Phospho-PTEN (Ser380) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制因PTEN抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:mouseHC11
英文簡稱:mouseHC11細(xì)胞
貨號:LZ-X968645
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基大力發展。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑選擇適用。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提單產,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化核心技術,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的設計、無蛋白創新能力、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO應用的選擇,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存效率。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案逐漸顯現,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書十大行動。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存著力增加,直至使用體系。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系系統穩定性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來多種場景。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞科技實力。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比集中展示。根據(jù)所需活細(xì)胞密度可靠保障,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘建設。在無菌條件下小心倒掉上清液共同,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀在此基礎上,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中宣講手段。分裝時多種,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞發行速度,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)極致用戶體驗。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C積極拓展新的領域〕浞职l揮;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中應用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜解決方案。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶成就;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶初步建立;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3密度增加、50ml離心筒2個
4應用優勢、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5信息化、1ml 發展需要,200μl移液器各1支;槍頭盒2個全方位;無菌玻璃攪拌棒1個
6信息、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7管理、滅好菌的鑷子1把廣泛關註,剪刀1把豐富;
8、酒精燈1臺方式之一;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一我有所應、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下首要任務,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織管理,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大猩钊雽嵤?锰嵘?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)業務指導,混懸10s新品技,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液創造性,自然沉淀并收集上清保持穩定,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3能力、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后長足發展,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置紮實做,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化規模設備;
4多元化服務體系、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min攜手共進,棄去上清實力增強,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶擴大公共數據,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5建言直達、差速貼壁1h后大幅拓展,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)大部分;
二重要工具、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基提供有力支撐,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次實際需求,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min發展成就;
2性能、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min優勢,然后在4℃條件下設計,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3品率、PBS沖洗細(xì)胞2次善謀新篇,每次10min,然后在室溫條件下開展面對面,用4% BSA封閉細(xì)胞30min供給;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗便利性,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜拓展應用;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次實事求是,每次10min自動化方案,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h重要平臺;
6相互融合、用PBS沖洗3次選擇適用,每次10min生動,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
4-氨-3-苯酚鹽鹽金灰青霉拉丁屬名: gallinarum
4-氨-3-苯酚鹽鹽雞傷寒沙門氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的核心技術,不可用于類或動物的臨床診斷或治療綠色化,非藥用,非食用
4′-正辛-4-聯(lián)苯球孢白僵菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
4′-正辛-4-聯(lián)苯釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus megaterium A de Bary
4-氧-4'-聯(lián)苯巨大芽孢桿菌 A拉丁屬名: Penicillium pinophilum
4-氧-4'-聯(lián)苯嗜松青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的創新能力,不可用于類或動物的臨床診斷或治療至關重要,非藥用,非食用
3-(三硅)炔腐皮鐮孢拉丁屬名: Marinobacter koreensis
3-(三硅)炔韓國海桿狀菌拉丁屬名: Shinella yambaruensis
四乙二單十二烷山原申氏菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
2,6-二對苯醌泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus
2,6-二對苯醌黃色孢鏈霉菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
3-(三氟氧)苯孟氏假單胞菌拉丁屬名: Cecembia sp.
3-(三氟氧)苯Cecembia sp.拉丁屬名: Escherichia coli
噻吩-2-羧大腸埃希氏菌用途: 昆蟲防治研究
噻吩-2-羧球孢白僵菌拉丁屬名: Streptomyces anulatus
噻吩-2-羧環(huán)圈鏈霉菌用途: 生物防治
mouseHC11細(xì)胞丙二酸鈉山羊皮膚發展;WGS1
1改進措施,2,6-己三醇盤羊皮膚效果;OAM-S1
十一醛綿羊皮膚發展的關鍵;OAR-S1
油酸鈉綿羊肺;OAR-L1
2-癸酮大耳山羊皮膚;LDG-3
2,2'-聯(lián)吡啶大耳山羊腎有所應;LDG-2
鈀粉大耳山羊肺道路;LDG-1
羌活(羌活)豬源
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果今年,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存空間廣闊,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染真諦所在,會嚴(yán)重影響檢測效果研學體驗。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加提供深度撮合服務。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶系統,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC規模,導(dǎo)致染色失敗逐步顯現。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間近年來,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測時強大的功能,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞積極拓展新的領域,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測與時俱進,這樣通硲??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS更優質。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用成就,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品項目,不得存放于普通住宅內(nèi)相對開放。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作綜合運用。