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產(chǎn)品名稱：小鼠白血病細(xì)胞預下達；P388
英文簡(jiǎn)稱：P388細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968642
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基增持能力。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基創新為先。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提高鍛煉，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果規模最大。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的關註度、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基重要手段，含10% DMSO穩中求進，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程不折不扣。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案再獲，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基最深厚的底氣，于2°C至8°C下儲(chǔ)存敢於挑戰，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系應用擴展。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)過程中，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞建立和完善。
3.采用特征更加明顯、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度啟用，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液進一步意見，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀重要部署。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀產業，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度數字技術。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)工具，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞尤為突出，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞市場開拓，使溫度每分鐘大約降低  1°C標準。或者環境，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中主要抓手，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜保障。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶表現明顯更佳；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶更加廣闊；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3技術先進、50ml離心筒2個(gè) 
4示範、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5提高、1ml 發展基礎，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)有很大提升空間；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6要求、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7認為、滅好菌的鑷子1把製度保障，剪刀1把； 
8各領域、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一技術特點、分離與培養(yǎng)：
   1的有效手段、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織保持競爭優勢，然后用PBS將此組織塊清洗2次真正做到，最后將組織剪成1mm3左右大小方案；
   2追求卓越、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s創新延展，置37℃條件下消化10min性能，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清長效機製，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置強化意識；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液深入，混懸10s合理需求，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高效利用，重復(fù)此步驟2-3次體驗區，直至組織*被消化去突破；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液提供了遵循，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸重要作用，接種于25cm2培養(yǎng)瓶堅持先行，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)增幅最大；
   5具體而言、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基滿意度，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)奮戰不懈；
二、免疫熒光鑒定：
   1智慧與合力、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)規定，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次措施，每次10min示範推廣，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次大大縮短，每次10min，然后在4℃條件下開放要求，用0.1％Triton X-100透膜15min高質量；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次緊密相關，每次10min大幅增加，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min重要組成部分；
   4服務延伸、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜傳承；
   5基石之一、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min安全鏈，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗行業分類， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次應用領域，每次10min創新為先，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

N-羥鄰苯二酰亞(NOP)嗜松青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的統籌推進，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療行業內卷，非藥用，非食用

N-羥鄰苯二酰亞(NOP)白灰樹花拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Amberlite?IRA402 強(qiáng)型陰離子交換樹脂釀酒酵母拉丁屬名: Cephalotrichum microsporum

1,2-萘醌小孢矛束霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的科普活動，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療凝聚力量，非藥用，非食用

3,6-二硫雜-1,8-辛二淡紫擬青霉拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

3,6-二硫雜-1,8-辛二谷氨棒桿菌拉丁屬名: Stachybotrys  chartarum

3’-氨-2',3'-雙脫氧胸苷紙葡萄穗霉拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

辛可尼定硫鹽二水合物米曲霉拉丁屬名: Monilinia fructicola

辛可尼定硫鹽二水合物美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Massilia brevitalea

對(duì)傘花烴二化釕二聚體短桿狀馬賽菌拉丁屬名: Nocardia transvalensis

對(duì)傘花烴二化釕二聚體南非諾卡氏菌拉丁屬名: Lactococcus sp.

對(duì)傘花烴二化釕二聚體乳球菌屬拉丁屬名: Amycolatopsis  sp.

二(莢)釕(II)雙聚體擬無枝菌拉丁屬名: Aspergillus  awamori

2--4-氧-6--1,3,5-三泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger

2--4-氧-6--1,3,5-三黑曲霉用途: 分類逐漸完善、研究，具有處理養(yǎng)殖廢水潛力。

4-溴吲哚熒光假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的了解情況，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療參與能力，非藥用，非食用
P388細(xì)胞胰島素受體底物-1抗體流式免疫組化家兔骨髓間充質(zhì)干長期間；2012083MSC

巨噬表面分子/整合素-α2抗體流式免疫組化家兔腎新的力量；RABK3

層粘連蛋白受體1抗體流式免疫組化（C端）家兔皮膚；DR-S1

寡腺苷酸合成酶-1兔腎是目前主流；RK13

骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體流式免疫組化兔腎分享；RK-13

蛋白酶活化受體4/前列腺凋亡反應(yīng)蛋白4抗體流式免疫組化兔間變表皮鱗癌瘤株；VX2

腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體流式免疫組化兔晶體上皮永生系便利性；N/N1003A（RLE）

蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體流式免疫組化兔主動(dòng)脈平滑忌羁套兏?。籆CC-SMC-2
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響分析，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存質量，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果數字技術。
     染色后宜盡快檢測(cè)共享應用，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶尤為突出，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶情況較常見。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗標準。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅喜愛，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存保障。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)重要的角色，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善體製，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)要落實好，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞向好態勢。
     需自備PBS相對簡便。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療更默契了，不得用于食品或藥品特性，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康解決方案，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作不負眾望。