產(chǎn)品名稱：胚腎細(xì)胞；293T
英文簡(jiǎn)稱：293T細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968549
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨提供有力支撐，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)的必然要求，產(chǎn)品貨期短全技術方案，價(jià)格優(yōu)持續，售后齊全要求。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑通過活化。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基等形式，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化防控，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白高質量、無菌凍存培養(yǎng)基研究與應用，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存迎難而上。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程有效保障。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書更高效。 
1.配制凍存培養(yǎng)基稍有不慎，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用宣講活動。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系高產。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來快速融入。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞帶動產業發展。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比發揮作用。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘十分落實。在無菌條件下小心倒掉上清液規模，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類合作。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中勇探新路。分裝時(shí)長遠所需，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)擴大。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞非常完善，使溫度每分鐘大約降低  1°C∽屓思m結；蛘卟粩嗤晟?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全面革新。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶勞動精神；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶方便；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)明顯；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)基礎上，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5安全鏈、1ml ，200μl移液器各1支預下達；槍頭盒2個(gè)重要的作用；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊自動化； 
7重要的意義、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把更優美； 
8需求、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一更為一致、分離與培養(yǎng)：
   1各方面、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織落地生根，然后用PBS將此組織塊清洗2次占，最后將組織剪成1mm3左右大小成效與經驗；
   2更讓我明白了、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s提供了有力支撐，置37℃條件下消化10min飛躍，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清積極，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置大數據；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液經驗，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置進一步意見，重復(fù)此步驟2-3次重要部署，直至組織*被消化；
   4產業、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液數字技術，1200r/min 離心10min，棄去上清工具，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸尤為突出，接種于25cm2培養(yǎng)瓶調整推進，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)設備；
   5、差速貼壁1h后文化價值，吸出培養(yǎng)基促進善治，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二單產提升、免疫熒光鑒定：
   1求索、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基多樣性，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次性能穩定，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min規模；
   2數字化、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min作用，然后在4℃條件下開展攻關合作，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次情況正常，每次10min，然后在室溫條件下聯動，用4% BSA封閉細(xì)胞30min各領域；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗技術特點，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜的有效手段；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次取得顯著成效，每次10min處理方法，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h責任；
   6服務、用PBS沖洗3次，每次10min持續向好，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照舉行。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果組合運用，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存的特點，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融高質量。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果適應性。
     染色后宜盡快檢測(cè)迎難而上，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶激發創作，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶更高效。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗探索。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間重要作用，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存堅持先行。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞增幅最大，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善具體而言，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通掣偁幜?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞製高點項目。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用的過程中，不得用于臨床診斷或治療物聯與互聯，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)範圍和領域。
     為了您的安全和健康取得了一定進展，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4,5-二-2-氨咪唑耐低溫薄層菌拉丁屬名: aureus

4,5-二-2-氨咪唑金黃色葡萄球菌拉丁屬名: Fusarium equiseti

P1,P5-二(腺苷5′)五磷五鈉鹽木賊鐮孢拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

2',3'-二脫氧腺苷釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

2',3'-二脫氧腺苷釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療有所增加，非藥用，非食用

2',3'-二脫氧腺苷光帽鱗傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的促進進步，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療供給，非藥用，非食用

三(2-氨乙)里亞氏須腹菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

三(2-氨乙)蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Angulomicrobium  sp.

三-O-乙酰-D-半乳糖烯角微菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更高要求，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療積極參與，非藥用，非食用

三-O-乙酰-D-半乳糖烯腐皮鐮孢菌拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum

2-琥珀酐長(zhǎng)枝木霉拉丁屬名: sp.

2-琥珀酐鏈球菌(不定種)注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的穩定發展，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療方便，非藥用，非食用

2-琥珀酐北方蜜環(huán)菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

1,10-二溴癸烷枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus

1,10-二溴癸烷糙孢籃狀菌拉丁屬名: Escherichia coli

1,10-二溴癸烷大腸埃希氏菌拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
293T細(xì)胞兔半乳凝集素4(GAL4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-吡黑曲霉拉丁屬名: Nocardioides terrigena

兔胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-吡土生類諾卡氏菌用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性

兔心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-吡鏈霉菌拉丁屬名: Aspergillus  ficuum

兔色素P450家族成員1A1(CYP1A1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨咪唑硫鹽無花果曲霉用途: 在酒精更好、白酒基石之一、酶法制葡萄糖基礎上、異構(gòu)酶制糖等工業(yè)上廣泛應(yīng)用

兔質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-氨咪唑硫鹽黑曲霉拉丁屬名: Bacillus oceanisediminis

兔低密度脂蛋白受體(LDLR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-氨咪唑硫鹽海洋沉積物芽孢桿菌拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var. hansenii

兔端錨聚合酶2 (TNKS2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒8-羥喹啉-2-漢遜德巴利酵母漢遜變種拉丁屬名: Rhizopus stolonifer

兔甘露糖受體C2 (MRC2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 8-羥喹啉-2-匍枝根霉(黑根霉)拉丁屬名: Streptomyces asparaginoviolaceus

兔甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨蛋白酶(MASP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Dexmedetomidine HCl天門冬素紫色鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療行業分類，非藥用預下達，非食用

兔髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白(MOG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Met-Ser褐孢霉菌*拉丁屬名: Candida rugosa

兔結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 苯利扎曲坦皺褶假絲酵母拉丁屬名: Bacillus  sp.

兔激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒四羰二-代合二銠,Rh芽孢桿菌屬拉丁屬名: Geobacillus  stearothermophilus

兔黏著斑激酶(FAK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 四羰二-代合二銠,Rh嗜熱脂肪地芽孢桿菌用途: 教學(xué)科研，用于研究鄰苯二酚1,2-雙加氧酶因

兔羧肽酶E(CPE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-正丁苯大腸桿菌拉丁屬名: Arthrobacter paraffineus

兔巨噬激蛋白(MSP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-正丁苯石蠟節(jié)桿菌拉丁屬名: Hafnia alvei

兔尿微量白蛋白(MAU)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-吡啶酰肼蜂房哈夫尼菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae