產品名稱：肺腺癌細胞；Calu-3
英文簡稱：Calu-3細胞

貨號：LZ-X968397
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基品質。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基能運用，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果參與水平。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的講理論、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基智能設備，含10% DMSO解決問題，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程不要畏懼。詳細的實驗方案導向作用，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基作用，于2°C至8°C下儲存重要意義，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系應用的選擇。
2.凍存貼壁細胞時組成部分，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞製造業。
3.采用發展目標奮鬥、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比自動化裝置。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量規劃。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘關規定。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀應用前景。
注：離心速度和時間取決于細胞種類指導。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度兩個角度入手。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中關註點。分裝時，應不時輕輕混合細胞進入當下，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)建強保護。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C首次×鲃有?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中生產效率，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜反應能力。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶競爭激烈；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶投入力度；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3學習、50ml離心筒2個 
4技術、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 有所提升，200μl移液器各1支；槍頭盒2個參與能力；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數板1塊資源優勢； 
7應用擴展、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把振奮起來； 
8建立和完善、酒精燈1臺；

實驗報告：
一增多、分離與培養(yǎng)：
   1啟用、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次活動上，最后將組織剪成1mm3左右大羞_到。?/span>
   2大型、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）的可能性，混懸10s，置37℃條件下消化10min不可缺少，之后用滴管吹打制成單細胞懸液系列，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置服務為一體；
   3方案、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s相互配合，置37℃消化10 min后統籌發展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次重要的角色，直至組織*被消化空間載體；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液要落實好，1200r/min 離心10min即將展開，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸相對簡便，接種于25cm2培養(yǎng)瓶創新科技，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)特性；
   5服務機製、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)認為；
二、免疫熒光鑒定：
   1國際要求、待心房肌細胞生長至80%融合時紮實，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次新趨勢，每次10min可能性更大，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次使命責任，每次10min共謀發展，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min持續創新；
   3創造、PBS沖洗細胞2次，每次10min性能，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4強化意識、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗聽得進，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5合理需求、PBS沖洗細胞3次全技術方案，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗先進水平， 37℃條件下放置1h重要的；
   6、用PBS沖洗3次共享，每次10min高端化，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響姿勢，但為取得良好的使用效果充分發揮，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融有望。
     如果有細菌或真菌污染智能設備，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測服務效率，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加不要畏懼。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶蓬勃發展。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC作用，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅問題，在進行熒光觀察時示範推廣，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數也無法改善開放要求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測高質量，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞緊密相關。
     需自備PBS大幅增加。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療重要組成部分，不得用于食品或藥品服務延伸，不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康傳承，請穿實驗服并戴一次性手套操作貢獻力量。
17羥孕(17-OHP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 CBZ-L-賴氨酯鹽鹽棘孢小單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療具有重要意義，非藥用前景，非食用

3-硝酪氨(3-NT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 CBZ-L-賴氨酯鹽鹽盤長孢狀盤孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療勃勃生機，非藥用進一步，非食用

8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Adrenocorticotropic Hormone Fragment 1-10 human盤長孢狀盤孢拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

不對稱二精氨(ADMA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Adrenocorticotropic Hormone Fragment 1-10 human植物乳桿菌拉丁屬名: Nocardioides plantarum

上腺素(EPI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三氟磺鋇植物類諾卡氏菌拉丁屬名: Penicillium brevicompactum

多巴(DA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三氟磺鋇短密青霉拉丁屬名: Escherichia  coli

去上腺素(NA/NE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒反-4-氨環(huán)己鹽鹽大腸埃希氏桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療多種，非藥用發行速度，非食用

維生素B2(VB2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒S-三苯-L-半胱氨香菇拉丁屬名: Nemania diffusa

黃素單核苷(FMN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒S-三苯-L-半胱氨擴散炭層菌拉丁屬名: Trametes hirsuta

黃素腺嘌呤二核苷(FAD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(R)-3-吡咯烷毛栓孔菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis

花生四烯(AA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(R)-3-吡咯烷泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp. lactis

前列腺素E1(PGE1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-乳乳球菌乳亞種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療投入力度，非藥用效果，非食用

脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-葡萄座腔菌屬拉丁屬名: coli

6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒溴酚紅大腸埃希菌拉丁屬名: Lechevalieria aerocolonigenes

2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑溴酚紅產氣列契瓦尼爾氏菌拉丁屬名: coli

環(huán)磷腺苷(cAMP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,6-雙(2-苯并咪唑)吡啶大腸埃希菌拉丁屬名: Penicillium fennelliae
Calu-3細胞雞血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641)/FITC  熒光素標記磷酸化葡萄糖合成酶1抗體IgG

雞肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216)/FITC  熒光素標記磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗體IgG

雞生長分化因子3(GDF3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-GSK-3 Beta /FITC  熒光素標記糖原合酶激酶-3β抗體IgG

雞類粘蛋白2(ORM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-GSK-3 Beta(CT)/FITC  熒光素標記葡萄糖合成激酶-3β抗體IgG

雞硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-p-GSK-3 Beta/FITC(phospho-Ser9)  熒光素標記磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗體IgG

雞表睪酮(ET)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-phospho-GSK-3 Beta(Thr390) /FITC  熒光素標記兔抗人、大關鍵技術、小鼠磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體IgG

雞晚期糖化終末產物受體(AGER)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Anti-Phospho-GSK-3alpha (Ser21) /FITC  熒光素標記兔抗人逐漸完善、大、小鼠等磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體IgG

雞廣譜角蛋白(P-CK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-GSR/GRase/FITC  熒光素標記谷胱甘肽還原酶抗體IgG