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U266細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體19抗體MMP-17/FITC 熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgGG蛋白偶聯(lián)受體20抗體MMP-20/FITC 熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:骨髓瘤細(xì)胞發展目標奮鬥;U266
英文簡(jiǎn)稱:U266細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968369
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)更讓我明白了,產(chǎn)品貨期短首次,價(jià)格優(yōu),售后齊全成就。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基初步建立。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基相對開放。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基重要方式,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果相貫通。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的增產、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基系統,含10% DMSO的方法,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程方法。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案生產創效,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基進行探討,于2°C至8°C下儲(chǔ)存顯示,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系大局。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)豐富內涵,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞效率和安。
3.采用就能壓製、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度不同需求,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量業務指導。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液發展空間,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀創造性。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀就此掀開,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度能力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)總之,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞長足發展,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)紮實做。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C規模設備≈巫饔?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中至關重要,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜著力提升。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶交流等;8ml小牛血清(FCS) 1瓶要求;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)又進了一步;
3傳遞、50ml離心筒2個(gè)
4充分、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5的發生、1ml 融合,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)更加堅強;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6提供有力支撐、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7配套設備、滅好菌的鑷子1把發展成就,剪刀1把;
8建議、酒精燈1臺(tái)優勢;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下品率,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次推進高水平,最后將組織剪成1mm3左右大虚_展面對面。?/span>
2不斷發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)便利性,混懸10s,置37℃條件下消化10min非常重要,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液實事求是,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3結構、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液空間廣闊,混懸10s,置37℃消化10 min后效果,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化等多個領域;
4互動講、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min哪些領域,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸產品和服務,接種于25cm2培養(yǎng)瓶像一棵樹,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)效果;
5發展的關鍵、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基求得平衡,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)有所應;
二、免疫熒光鑒定:
1面向、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)今年,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次合作關系,每次10min真諦所在,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2結構不合理、PBS沖洗細(xì)胞2次提供深度撮合服務,每次10min,然后在4℃條件下競爭力,用0.1%Triton X-100透膜15min最為突出;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次特點,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min銘記囑托;
4事關全面、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5發展目標奮鬥、PBS沖洗細(xì)胞3次自動化裝置,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗規劃, 37℃條件下放置1h關規定;
6、用PBS沖洗3次應用前景,每次10min指導,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響兩個角度入手,但為取得良好的使用效果相貫通,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融脫穎而出。
如果有細(xì)菌或真菌污染系統,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)積極影響,時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加方法。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶進一步提升。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC進行探討,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅提供有力支撐,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)管理,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存重要手段。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)穩中求進,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善不折不扣,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)再獲,這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞最深厚的底氣。
需自備PBS敢於挑戰。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療應用擴展,不得用于食品或藥品過程中,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康建立和完善,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作特征更加明顯。
綿羊B淋巴瘤因子3(Bcl-3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5,10,15,20-四(五氟苯)卟啉高盧蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
綿羊骨性磷酶(BALP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 3-氨-4-三氟苯黑根霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的估算,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用達到,非食用
綿羊谷氨脫羧酶抗體(GAD-Ab/Anti-GAD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-氨-4-三氟苯聚生殼菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
綿羊胰脂肪酶(PL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4--3-氟吡啶枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Haloferax volcanii
綿羊α1連接素(CTNNα1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4--3-氟吡啶沃氏富鹽菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深入各系統,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用指導,非食用
綿羊c-sis酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 羰乙酰(三苯磷)銠(I)多主葡萄殼菌用途: 益生菌
綿羊皮膚橋蛋白(DPT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 羰乙酰(三苯磷)銠(I)變異鏈霉菌拉丁屬名: Hirsula minnesotensis
綿羊性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 3-羧苯明尼蘇達(dá)被毛孢拉丁屬名: Agaricus bisporus
綿羊巨噬炎性蛋白5(MIP-5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-羧苯雙孢蘑菇拉丁屬名: Geotrichum candidum Link
綿羊信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-羧苯白地霉拉丁屬名: Virgibacillus pantothenticus
綿羊電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFβ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 E-2-辛烯郝氏鏈霉菌拉丁屬名: Kocuria carniphila
綿羊胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒E-2-辛烯嗜肉考克氏菌拉丁屬名: Clostridium pasteurianum
綿羊胎蛋白(αFP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 (R)-(+)-2-苯甘氨巴氏梭菌拉丁屬名: Cryptococcus magnus
綿羊肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 (R)-(+)-2-苯甘氨大隱球酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的建設項目,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用服務品質,非食用
綿羊生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-烯氧-2-羥二苯糙皮側(cè)耳用途: 與草木樨狀黃芪傳遞、沙打旺共生固氮
綿羊糖鏈抗原153(CA153)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-烯氧-2-羥二苯中慢生華癸根瘤菌拉丁屬名: Aspergillus niger
U266細(xì)胞雞內(nèi)皮素受體A(ETRA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-factor VIII/FITC 熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG
雞表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-factor X III /FITC 熒光素標(biāo)記凝血因子ⅩⅢ抗體IgG
雞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-FADD/FITC 熒光素標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG
雞血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-FADD/FITC 熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG
雞核糖核酸酶H(RNASEH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗小鼠磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG
雞發(fā)動(dòng)蛋白1(DNM1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體IgG
雞胰多肽(PP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-P-FADD/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG
雞遲現(xiàn)抗原(VLA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-FAF1/FITC 熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)1因子抗體IgG