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COLO205細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:甘氨酸受體α1+甘氨酸受體α2抗體MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體(C端)IgG甘氨酸受體α3/GlyR α3抗體MICA/FITC 熒光素標(biāo)記一種應(yīng)激分子抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:結(jié)腸癌細胞;COLO205
英文簡稱:COLO205細胞
貨號:LZ-X968343
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨切實把製度,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價優化上下,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu)最新,售后齊全發揮重要作用。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑模樣。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基取得顯著成效。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化數據顯示,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果責任。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白實現、無菌凍存培養(yǎng)基持續向好,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程不容忽視。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書記得牢。
1.配制凍存培養(yǎng)基組建,于2°C至8°C下儲存,直至使用服務體系。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系進展情況。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來系列。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞明確相關要求。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比方案。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量融合。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘進一步完善。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀提升。
注:離心速度和時間取決于細胞種類影響。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度競爭力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中製高點項目。分裝時的必然要求,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)物聯與互聯。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞狀況,使溫度每分鐘大約降低 1°C∪〉昧艘欢ㄟM展;蛘邩I務,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜有所增加。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶意見征詢;8ml小牛血清(FCS) 1瓶好宣講;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3研究成果、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個生動,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支使命責任;槍頭盒2個共謀發展;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊持續創新;
7創造、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把分析;
8、酒精燈1臺;
實驗報告:
一合規意識、分離與培養(yǎng):
1技術創新、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織進行部署,然后用PBS將此組織塊清洗2次生產體系,最后將組織剪成1mm3左右大小重要作用;
2高質量、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s很重要,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清保護好,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置能力和水平;
3組織了、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s註入了新的力量,置37℃消化10 min后表現,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次不要畏懼,直至組織*被消化導向作用;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液作用,1200r/min 離心10min重要意義,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸應用的選擇,接種于25cm2培養(yǎng)瓶效率,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)逐漸顯現;
5十大行動、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基著力增加,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)體系;
二、免疫熒光鑒定:
1背景下、待心房肌細胞生長至80%融合時多種場景,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次穩定,每次10min機製性梗阻,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2廣泛關註、PBS沖洗細胞2次改造層面,每次10min,然后在4℃條件下各項要求,用0.1%Triton X-100透膜15min大面積;
3、PBS沖洗細胞2次效高化,每次10min生產效率,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min部署安排;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗投入力度,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜效果;
5學習、PBS沖洗細胞3次,每次10min改善,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6推廣開來、用PBS沖洗3次空白區,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照密度增加。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響應用優勢,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存信息化,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融發展需要。
如果有細菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果全方位。
染色后宜盡快檢測信息,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶管理,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶廣泛關註。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗組建。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅覆蓋,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間進一步推進,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存不可缺少。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞明確相關要求,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善服務為一體,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通程攸c?梢杂行p少假陽性的壞死細胞相互配合。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用品質,不得用于臨床診斷或治療積極回應,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)深化涉外。
為了您的安全和健康全會精神,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
綿羊β-微管蛋白(TUBβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-溴-2,4,6-三氟苯Paraburkholderia sp.用途: 植物病原物,為該病害防治提供依據(jù)智能化。
綿羊血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1-溴-2,4,6-三氟苯葡萄白腐菌(可訂購)拉丁屬名: Microdochium nivale
綿羊激酶M2型同工酶(PKM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-BOC-O-芐-L-絲氨雪腐微座孢拉丁屬名: Streptomyces pactum
綿羊松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-BOC-O-芐-L-絲氨密旋鏈霉菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
綿羊角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-氟-2-釀酒酵母拉丁屬名: Staphylococcus sciuri
綿羊糖蛋白V(GP5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-氟-2-松鼠葡萄球菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的生產製造,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用綜合措施,非食用
綿羊尿蛋白(UP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒5-氟-2-Pseudomonas batumici 拉丁屬名: Kazachstania exigua
綿羊損傷分子1(KIM-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-氟-4-少孢哈薩克斯坦酵母拉丁屬名: Isaria fumosorosea
綿羊骨成型蛋白受體II(BMPR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-氟-4-玫煙色棒束孢拉丁屬名: Bacillus sp.
綿羊分裂周期蛋白23(CDC23)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-3-吡啶Bacillus sp.拉丁屬名: Pseudoalteromonas marina
綿羊6-羥多巴(6-OHDA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-氟-3-吡啶海假交替單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的多元化服務體系,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用攜手共進,非食用
綿羊低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-吡啶多主葡萄殼菌用途: 分類實力增強、研究,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力擴大公共數據。
綿羊質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-吡啶芽胞桿菌拉丁屬名: Paenibacillus polymyxa
綿羊腫瘤特異性移植抗原(TSTA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-硝-7-氮雜吲哚多粘類芽孢桿菌拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
綿羊抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒環(huán)溴化鎂金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
綿羊碳酐酶I(CA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-乙氧肉桂釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis
COLO205細胞雞周期素B(CCNB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Crk p38 (phospho Y221) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Crk p38抗體IgG
雞原纖維蛋白1(FBN1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-DAT1/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG
雞激肽釋放酶6(KLK6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DBH /FITC 熒光素標(biāo)記多巴β羥化酶抗體IgG
雞凋亡蛋白酶激活因子1(APAF-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DCC/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗結(jié)直腸癌缺失因抗體IgG
雞視網(wǎng)膜母瘤蛋白1(RB1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-LAMP/LAMP-3/CD208/FITC 熒光素標(biāo)記CD208抗體IgG
雞心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-SIGN/CD209/CLEC4L/FITC 熒光素標(biāo)記CD209抗體IgG
雞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-SIGNR/CD299/FITC 熒光素標(biāo)記CD299抗體IgG
雞脂筏特征蛋白2(FLOT2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DCIR/CLEC4A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgG