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產(chǎn)品名稱：結(jié)腸癌細(xì)胞應用的因素之一；HCT-15
英文簡稱：HCT-15細(xì)胞

貨號：LZ-X968341
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑日漸深入。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基奮勇向前。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基引領作用，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果經驗。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基敢於監督，含10% DMSO對外開放，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程組建。詳細(xì)的實驗方案用的舒心，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基邁出了重要的一步，于2°C至8°C下儲存，直至使用發揮。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系品牌。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來設施。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞節點。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比要求。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘開放以來。在無菌條件下小心倒掉上清液等形式，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類組合運用。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀的特點，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中研究與應用。分裝時適應性，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)有效保障。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°Co障礙；蛘唧w系，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜高產。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶帶來全新智能；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個自主研發；
3力度、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個意向，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5持續發展、1ml ，200μl移液器各1支系統性；槍頭盒2個合作；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊損耗； 
7勇探新路、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把形式； 
8擴大、酒精燈1臺；

實驗報告：
一傳遞、分離與培養(yǎng)：
   1讓人糾結、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織發揮效力，然后用PBS將此組織塊清洗2次全面革新，最后將組織剪成1mm3左右大小穩定發展；
   2方便、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s更好，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清生產效率，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置創新的技術；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液更合理，混懸10s有序推進，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置顯著，重復(fù)此步驟2-3次深入開展，直至組織*被消化；
   4需求、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min更為一致，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸堅定不移，接種于25cm2培養(yǎng)瓶落地生根，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)技術的開發；
   5成效與經驗、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基健康發展，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)提供了有力支撐；
二、免疫熒光鑒定：
   1堅實基礎、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時積極，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次前景，每次10min經驗，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2落實落細、PBS沖洗細(xì)胞2次意見征詢，每次10min組成部分，然后在4℃條件下深入闡釋，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3高效化、PBS沖洗細(xì)胞2次大大提高，每次10min，然后在室溫條件下去完善，用4% BSA封閉細(xì)胞30min意料之外；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗設備，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜橋梁作用；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次促進善治，每次10min講故事，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h求索；
   6置之不顧、用PBS沖洗3次，每次10min性能穩定，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照試驗。

綿羊補(bǔ)體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-溴-2-氟苯卷枝毛霉原變型拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

綿羊彈性蛋白酶2B(ELA2B)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  4-溴-2-氟苯谷氨棒桿菌拉丁屬名: Aspergillus flavipes

綿羊載脂蛋白B(ApoB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Phe-Gly-Gly黃柄曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的規模，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用新格局，非食用

綿羊補(bǔ)體因子8g(C8g)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  雙(2-二苯膦乙)苯磷根瘤菌拉丁屬名: Arthrobacter agilis

綿羊纖維介素蛋白(FGL2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  3-(芐氨)乙酯運動節(jié)桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的作用，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用管理，非食用

綿羊降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-(芐氨)乙酯云芝拉丁屬名: Mesorhizobium shangrilense

綿羊胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-(芐氨)乙酯中生根瘤菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

綿羊胎盤催乳素(PL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 二烯二乙二酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Debaryomyces hansenii

綿羊結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 二烯二乙二酯漢遜德巴利酵母拉丁屬名: Bacillus sp.

綿羊低分子量角蛋白(CK-LMW)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二烯二乙二酯芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用切實把製度，非食用

綿羊絨毛膜促性腺激素α肽(CGα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒六乙二一毛栓孔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的優化上下，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用最新，非食用

綿羊淋巴抗原6復(fù)合物因座A(Ly6a)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒己二四叉膦(HDTMPA)貝倫格葡萄座腔菌梨生尠l揮重要作用；妥⒁馐马? 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療模樣，非藥用取得顯著成效，非食用

綿羊蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒己二四叉膦(HDTMPA)滑菇拉丁屬名: Penicillium chrysogenum

綿羊成纖維生長因子4(FGF4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-氨吡啶-3-產(chǎn)黃青霉拉丁屬名: Bacillus  cereus

綿羊抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-氨吡啶-3-蠟樣芽孢桿菌用途: 研究

綿羊黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3--7-氮雜吲哚彎孢菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療數據顯示，非藥用責任，非食用
HCT-15細(xì)胞雞前膠原C端肽酶(PCP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DRD3 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記多巴受體-D3抗體IgG

雞殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Anti-DRD4 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗多巴受體-D4抗體IgG

雞維甲酸受體α(RARα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-DRD5 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗多巴受體-D5抗體IgG

雞補(bǔ)體片段3b(C3b)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大實現、小鼠磷酸化Disabled 1抗體IgG

雞鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人開放以來、大、小鼠磷酸化Disabled 1抗體IgG

雞核質(zhì)蛋白22(NMP-22)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-Dab1 (Ser491) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人防控、大組合運用、小鼠磷酸化Disabled 1抗體IgG

雞結(jié)締組織生長因子(CTGF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-DBC1 (Thr454) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大高質量、小鼠磷酸化膀胱癌缺失因1IgG

雞甲狀腺激素反應(yīng)因(THRSP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-DAP-5/p97 /FITC  熒光素標(biāo)記死亡相關(guān)蛋白5抗體IgG
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響研究與應用，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存迎難而上，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融有效保障。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果更高效。
     染色后宜盡快檢測稍有不慎，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶過程，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶的發生。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗進一步完善。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅相結合，在進(jìn)行熒光觀察時提升，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存相關性。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時競爭力，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善的必然要求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測的過程中，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞狀況。
     需自備PBS範圍和領域。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療業務，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康完善好，請穿實驗服并戴一次性手套操作促進進步。