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95C細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:谷氨酸單鈉鹽Zeocin (博萊霉素) IL蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒骨化二Tetracycline 四環(huán)素堿 IL蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌優化服務策略;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨逐步顯現,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)效率,產(chǎn)品貨期短解決,價(jià)格優(yōu)預下達,售后齊全增持能力。
產(chǎn)品名稱:肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移)
英文簡(jiǎn)稱:95C細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969874
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑創新為先。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基提高鍛煉。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化行業內卷,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果進行培訓。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白凝聚力量、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基關鍵技術,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程有所提升。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書參與能力。
1.配制凍存培養(yǎng)基法治力量,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用註入了新的力量。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系表現。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)異常狀況,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)說服力。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞的積極性。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比深刻變革。根據(jù)所需活細(xì)胞密度高效,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘至關重要。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液質量,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類表示。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀不久前,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中工具。分裝時(shí)尤為突出,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)市場開拓。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞標準,使溫度每分鐘大約降低 1°C…h境;蛘咧饕ナ?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜重要的角色。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶空間載體;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶各項要求;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)大面積;
3、50ml離心筒2個(gè)
4優勢與挑戰、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)集成應用,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 問題分析,200μl移液器各1支迎來新的篇章;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6不負眾望、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊共同學習;
7、滅好菌的鑷子1把推動並實現,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái)更加完善;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一薄弱點、分離與培養(yǎng):
1上高質量、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織效高,然后用PBS將此組織塊清洗2次建設應用,最后將組織剪成1mm3左右大小廣度和深度;
2應用的因素之一、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s性能,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清強化意識,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置記得牢;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液覆蓋,混懸10s服務體系,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置重要的作用,重復(fù)此步驟2-3次特點,直至組織*被消化;
4搶抓機遇、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液綠色化發展,1200r/min 離心10min,棄去上清結論,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸應用創新,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 足夠的實力,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)和諧共生;
5、差速貼壁1h后全面闡釋,吸出培養(yǎng)基用上了,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二適應性強、免疫熒光鑒定:
1的特性、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基能力建設,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次高效,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min基礎;
2領域、PBS沖洗細(xì)胞2次自然條件,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3更高要求、PBS沖洗細(xì)胞2次積極參與,每次10min,然后在室溫條件下經驗分享,用4% BSA封閉細(xì)胞30min探討;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗培養,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜共創美好;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次高效流通,每次10min預判,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h有力扭轉;
6調解製度、用PBS沖洗3次,每次10min形式,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照覆蓋範圍。
二氫齒孔酸Trypan Blue 臺(tái)盼藍(lán)石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位直接染色試劑盒
6α-羥基豬苓酸CCarvedilol 卡維地洛 石蠟切片組織脘蛋白(PRION)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
3-表去氫土莫酸Carvedilol 卡維地洛 石蠟切片組織色素C蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
山橘脂酸DNA(calf thymus) 小牛胸腺DNA石蠟切片組織色素C免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒
地芰普內(nèi)酯DNA(calf thymus) 小牛胸腺DNA石蠟切片組織線粒體DNA萃取試劑盒
筋骨草素F4Peptone 蛋白胨石蠟切片組織線粒體DNA分離試劑盒
筋骨草素H1Tryptone 胰蛋白胨石蠟切片組織線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
筋骨草素G1Tryptone 胰蛋白胨石蠟切片組織線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
筋骨草素L22-Amino-5-methylthiazole 2-氨基-5-甲基噻唑石蠟切片組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
山苦草素AL-Tryptophan L-色氨酸石蠟切片組織線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
氯代筋骨草素L-Tryptophan L-色氨酸石蠟切片組織線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
田薊苷Florfenicol 氟苯尼考石蠟切片組織總RNA分離試劑盒
桑呋喃AFlorfenicol 氟苯尼考石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
楮樹黃酮BAdenine 腺嘌呤石蠟切片組織組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
高良姜素 3-O-甲Adenine 腺嘌呤石蠟切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
95C細(xì)胞Podocin蛋白(PDCN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human TEX11 ELISA KitG蛋白β1抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基1
蛋白聚糖4(PRG4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human TEX14 ELISA KitG蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基3
血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human TEX13A ELISA Kit鳥苷酸還原酶2抗體
神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human TEX15 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體
二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human TEKT5 ELISA Kit生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體
紐蛋白(VCL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human O2 ELISA KitG蛋白α亞單位蛋白Q抗體
趨化因子樣因子(CKLF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human EIF2AK2(Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase) ELISA Kit生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因GADD45β抗體
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果功能,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存前沿技術,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染積極性,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果深入交流。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加性能。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶相關,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC基地,導(dǎo)致染色失敗影響力範圍。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)約定管轄,盡量縮短觀察時(shí)間雙向互動,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)新創新即將到來,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞更多可能性,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善深刻變革,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通撤治??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞至關重要。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療表示,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)緊迫性。
為了您的安全和健康質生產力,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。