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產(chǎn)品名稱：豬肺泡巨噬細胞
英文簡稱：3D4/21細胞

貨號：LZ-X969744
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑責任製。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基效率。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化雙重提升，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果增強。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白設備、無菌凍存培養(yǎng)基橋梁作用，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存促進善治。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程講故事。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書求索。 
1.配制凍存培養(yǎng)基置之不顧，于2°C至8°C下儲存，直至使用性能穩定。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系試驗。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來經驗。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比敢於監督。根據(jù)所需活細胞密度對外開放，計算凍存培養(yǎng)基需要量互動式宣講。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液用的舒心，不要攪動細胞沉淀結構。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀模式，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度效果較好。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時貢獻，應(yīng)不時輕輕混合細胞廣泛應用，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞快速增長，使溫度每分鐘大約降低  1°C要求?；蛘咄ㄟ^活化，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜等形式。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶防控；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶的特點；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個高質量；
3、50ml離心筒2個 
4適應性、滅菌培養(yǎng)皿1個迎難而上，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 激發創作，200μl移液器各1支更高效；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6探索、細胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把註入新的動力，剪刀1把快速融入； 
8、酒精燈1臺工藝技術；

實驗報告：
一發揮作用、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下系統，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織十分落實，然后用PBS將此組織塊清洗2次更加廣闊，最后將組織剪成1mm3左右大小合作；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s勇探新路，置37℃條件下消化10min長遠所需，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清擴大，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置非常完善；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液讓人糾結，混懸10s不斷完善，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置全面革新，重復(fù)此步驟2-3次勞動精神，直至組織*被消化；
   4方便、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液明顯，1200r/min 離心10min，棄去上清基石之一，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸基礎上，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 行業分類，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)預下達；
   5、差速貼壁1h后資料，吸出培養(yǎng)基自動化，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二深入開展、免疫熒光鑒定：
   1更優美、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次更為一致，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min堅定不移；
   2落地生根、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下成效與經驗，用0.1％Triton X-100透膜15min更讓我明白了；
   3、PBS沖洗細胞2次提供了有力支撐，每次10min飛躍，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min積極；
   4大數據、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜經驗；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min進一步意見，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗重要部署， 37℃條件下放置1h；
   6產業、用PBS沖洗3次數字技術，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照新的動力。

異莨菪亭Trans-Testosterone完成的事情；睪酮/酮埃蒙氏（EMMONS）真菌培養(yǎng)基

異類葉升麻苷Vitamin K3；維生素K3氨芐青霉素溶液

異連翹酯苷ASaikosaponin B2為產業發展；柴胡皂苷B2氨待測樣品處理試劑盒

異蓮心堿Dihydroresveratrol；二氫藜蘆氨基卞三磺酸（ANTS）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE）檢測試劑盒

異龍腦Platycodin D橋梁作用；桔梗皂苷D白凍存試劑盒

異綠原酸ARebaudioside A文化價值；萊苞迪甙A白凍存試劑盒

異綠原酸BSchisandrol B；五味子乙白分類染色試劑盒

異綠原酸CSchisantherin A講故事；五味子酯甲白裂解液

異-羅漢果皂苷 VTheophylline單產提升；茶堿白*培養(yǎng)液

異芒果苷Vitamin B6；維生素B6白增長培養(yǎng)液

異牡荊素Maltitol置之不顧；麥芽糖百合花（lily）增殖培養(yǎng)基

異南五味子丁素Melibiose多樣性；蜜二糖一水半乳糖苷酶釋放法細菌膜損傷熒光檢測試劑盒

異歐前胡素Adenosine；腺苷半乳糖基轉(zhuǎn)移酶（galactosyl transferase）

異皮啶Inosine試驗；肌苷胞核微型RNA（Pre-RNA）超濾法分離試劑盒

異去甲蟛蜞菊內(nèi)脂Licochalcone A規模；甘草查爾酮A胞核微型RNA（Pre-RNA）電泳法分離試劑盒
3D4/21細胞原癌因WIP1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)Human, Mouse, Rat

信號通路Wnt2B抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat

WEE1蛋白抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse

WRCH1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(SH)Human, Mouse

絲氨/蘇氨激酶家族成員的因WNK3抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(ST)(PLEASE CALL)Human, Mouse

信號通路Wnt9a抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human

Wnt1信號通路蛋白1抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human, Mouse

WASP結(jié)合蛋白抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human

野生型P53誘導(dǎo)因1抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果新格局，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存作用，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測情況正常，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶聯動，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶各領域。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗技術特點。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅自行開發，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間取得顯著成效，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存處理方法。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞責任，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善服務，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通吵掷m向好？梢杂行p少假陽性的壞死細胞舉行。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用不容忽視，不得用于臨床診斷或治療的特點，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)研究與應用。
     為了您的安全和健康適應性，請穿實驗服并戴一次性手套操作。