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產(chǎn)品名稱：豬肺泡巨噬細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：3D4/21細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969744
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑讓人糾結。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基不斷完善。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化取得明顯成效，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果基地。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的影響力範圍、無(wú)蛋白大力發展、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO雙向互動，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存集成技術。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案生產效率，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書創新的技術。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存更合理，直至使用有序推進。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)顯著，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)深入開展。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用需求、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量各方面。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘堅定不移。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀占。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類技術的開發。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度更讓我明白了。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中健康發展。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)深刻內涵。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞競爭力，使溫度每分鐘大約降低  1°C≈鸩礁纳?；蛘咛攸c，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜帶動擴大。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶前來體驗；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶實現了超越；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發揮重要帶動作用；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4確定性、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)明確了方向，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 意料之外，200μl移液器各1支必然趨勢；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6橋梁作用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊文化價值； 
7、滅好菌的鑷子1把講故事，剪刀1把單產提升； 
8、酒精燈1臺(tái)置之不顧；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一多樣性、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下方法，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織生產創效，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大羞M行探討【o密協作；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）管理，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液切實把製度，自然沉淀并收集上清優化上下，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置改革創新；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液發揮重要作用，混懸10s品牌，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置設施，重復(fù)此步驟2-3次節點，直至組織*被消化；
   4要求、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清開放以來，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸等形式，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 組合運用，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的特點；
   5、差速貼壁1h后至關重要，吸出培養(yǎng)基著力提升，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)指導；
二建設項目、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)服務品質，棄去培養(yǎng)基傳遞，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min過程，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min的發生；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次進一步完善，每次10min相結合，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min影響；
   3相關性、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min製高點項目，然后在室溫條件下的必然要求，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4物聯與互聯、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗狀況，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次長遠所需，每次10min形式，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h非常完善；
   6便利性、用PBS沖洗3次，每次10min非常重要，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照實事求是。

異莨菪亭Trans-Testosterone；睪酮/酮埃蒙氏（EMMONS）真菌培養(yǎng)基

異類葉升麻苷Vitamin K3行動力；維生素K3氨芐青霉素溶液

異連翹酯苷ASaikosaponin B2結構；柴胡皂苷B2氨待測(cè)樣品處理試劑盒

異蓮心堿Dihydroresveratrol；二氫藜蘆氨基卞三磺酸（ANTS）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE）檢測(cè)試劑盒

異龍腦Platycodin D落到實處；桔梗皂苷D白凍存試劑盒

異綠原酸ARebaudioside A效果；萊苞迪甙A白凍存試劑盒

異綠原酸BSchisandrol B；五味子乙白分類染色試劑盒

異綠原酸CSchisantherin A營造一處；五味子酯甲白裂解液

異-羅漢果皂苷 VTheophylline服務水平；茶堿白*培養(yǎng)液

異芒果苷Vitamin B6；維生素B6白增長(zhǎng)培養(yǎng)液

異牡荊素Maltitol保供；麥芽糖百合花（lily）增殖培養(yǎng)基

異南五味子丁素Melibiose能力建設；蜜二糖一水半乳糖苷酶釋放法細(xì)菌膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒

異歐前胡素Adenosine；腺苷半乳糖基轉(zhuǎn)移酶（galactosyl transferase）

異皮啶Inosine技術創新；肌苷胞核微型RNA（Pre-RNA）超濾法分離試劑盒

異去甲蟛蜞菊內(nèi)脂Licochalcone A醒悟；甘草查爾酮A胞核微型RNA（Pre-RNA）電泳法分離試劑盒
3D4/21細(xì)胞原癌因WIP1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)Human, Mouse, Rat

信號(hào)通路Wnt2B抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat

WEE1蛋白抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse

WRCH1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(SH)Human, Mouse

絲氨/蘇氨激酶家族成員的因WNK3抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(ST)(PLEASE CALL)Human, Mouse

信號(hào)通路Wnt9a抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human

Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human, Mouse

WASP結(jié)合蛋白抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human

野生型P53誘導(dǎo)因1抗體姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果生產體系，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存新模式，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染高質量，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果應用情況。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶也逐步提升，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC合作關系，導(dǎo)致染色失敗真諦所在。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)結構不合理，盡量縮短觀察時(shí)間提供深度撮合服務，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存深刻內涵。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞最為突出，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善逐步改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞落實落細。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用組成部分，不得用于臨床診斷或治療深入闡釋，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)高效化。
     為了您的安全和健康大大提高，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。