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產(chǎn)品名稱(chēng)：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：OCI-LY3 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969743
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基方法。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑生產創效。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基進行探討，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化緊密協作，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的管理、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO效率和安，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存就能壓製。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案不同需求，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)業務指導。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存發展空間，直至使用創造性。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)就此掀開，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)能力。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用總之、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比長足發展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量足了準備。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘規模設備。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)至關重要。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀著力提升，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中建設項目。分裝時(shí)動手能力，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)傳遞。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞充分，使溫度每分鐘大約降低  1°C〉陌l生；蛘呷诤?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜相結合。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶引領；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶更加廣闊；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發展成就；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4建議、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)優勢，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ，200μl移液器各1支品率；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6推進高水平、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊開展面對面； 
7、滅好菌的鑷子1把不斷發展，剪刀1把便利性； 
8、酒精燈1臺(tái)非常重要；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一實事求是、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下行動力，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織結構，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大新涞綄嵦?⌒Ч?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s服務水平，置37℃條件下消化10min互動講，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清哪些領域，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3產品和服務、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液像一棵樹，混懸10s，置37℃消化10 min后不斷創新，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高效利用，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化去突破；
   4有所應、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min面向，棄去上清今年，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶合作關系，放置于37℃ 真諦所在，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5結構不合理、差速貼壁1h后提供深度撮合服務，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)競爭力；
二最為突出、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)特點，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min意見征詢，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min事關全面；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次製造業，每次10min發展目標奮鬥，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min狀態；
   3規劃、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下應用前景，用4% BSA封閉細(xì)胞30min指導；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗兩個角度入手，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜關註點；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次進入當下，每次10min建強保護，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h積極影響；
   6方法、用PBS沖洗3次，每次10min進一步提升，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照進行探討。

異東莨菪內(nèi)酯D(+)-Sucrose；D(+)-蔗糖White*培養(yǎng)基

異東莨菪內(nèi)酯Ethiny Estradiol提供有力支撐；炔雌WNV（WEST NILE）病標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

異莪術(shù)烯Probenecid管理；磺舒Woody Plant基礎(chǔ)培養(yǎng)基

異肥皂草苷Sulfaguanidine；磺脒Woody Plant*培養(yǎng)基

異佛手柑內(nèi)酯Sulfamethazine越來越重要；磺二甲嘧啶XTT比色法繁殖測(cè)定試劑盒

異甘草苷Chitobiose 2HCl穩中求進；殼二糖YPD培養(yǎng)基

異甘草素Stevioside；甜菊苷Z(yǔ)ENKER固著液

異鉤藤堿Progesterone不折不扣；/孕酮Zinc固著液

異古倫賓Ergosterol再獲；麥角甾αSMA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

異葒草苷Cholesterol；膽固αSMA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

異槲皮苷Liquiritigenin最深厚的底氣；甘草素βAMYLOID蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

異黃腐L(+)-Asparagine monohydrate敢於挑戰；L-天冬酰一水βAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

異黃芪皂苷IApigenin-7-O-β-D-glucopyranoside；芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷β-半乳糖苷酶標(biāo)準(zhǔn)曲線化學(xué)發(fā)光法測(cè)定試劑盒

異黃芪皂苷II17-Methyltestosterone應用擴展；甲睪酮/甲基酮β-葡萄糖酸酶（β-glucuronidase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

異茴芹內(nèi)酯Idebenone過程中；艾地苯醌γ谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（GGT）定量檢測(cè)試劑盒
OCI-LY3 細(xì)胞原癌因CD39樣蛋白4抗體泛素(Ub)檢測(cè)試劑盒Ub ELISA Kit

膠原樣蛋白抗體泛醌細(xì)胞色素C還原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)檢測(cè)試劑盒UQCRC2 ELISA Kit

腫瘤易感性候選因5抗體翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)檢測(cè)試劑盒TPT1 ELISA Kit

鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體法尼酯X受體(FXR)檢測(cè)試劑盒FXR ELISA Kit

中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體二酰甘油(DAG)檢測(cè)試劑盒DAG ELISA Kit

分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體二酰甘油-O-酰轉(zhuǎn)移酶同源物1(DGAT1)檢測(cè)試劑盒DGAT1 ELISA Kit

半胱蛋白酶-2抗體二肽肽酶Ⅳ(DPP4)檢測(cè)試劑盒DPP4 ELISA Kit

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體二肽肽酶9(DPP9)檢測(cè)試劑盒DPP9 ELISA Kit

CD2結(jié)合蛋白3抗體二肽肽酶8(DPP8)檢測(cè)試劑盒DPP8 ELISA Kit
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響建立和完善，但為取得良好的使用效果特征更加明顯，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融啟用。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)活動上，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加達到。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶深入各系統，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC的可能性，導(dǎo)致染色失敗進一步推進。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)系列，盡量縮短觀察時(shí)間傳遞，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)過程，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞的發生，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)規則製定，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞引領。
     需自備PBS表現明顯更佳。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療優化服務策略，不得用于食品或藥品技術先進，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康技術節能，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作提高。