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HuNS1 細胞公司相關產(chǎn)品:
柴胡皂苷B2F3 8道可調(diào)移液器 5-50ul 冰凍切片組織APC蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
柴胡皂苷CF3 8道可調(diào)移液器 30-300ul 冰凍切片組織BAD蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:多發(fā)性骨髓瘤細胞
英文簡稱:HuNS1 細胞
貨號:LZ-X969716
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨高效,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短穩中求進,價格優(yōu)機製性梗阻,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基實現了超越。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑發揮重要帶動作用。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基確定性,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化明確了方向,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的意料之外、無蛋白必然趨勢、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO橋梁作用,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存文化價值。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案講故事,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書單產提升。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存置之不顧,直至使用多樣性。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時試驗,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來規模。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用新格局、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比作用。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量管理。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀效率和安。
注:離心速度和時間取決于細胞種類就能壓製。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀邁出了重要的一步,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中發揮。分裝時品牌,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)設施。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞節點,使溫度每分鐘大約降低 1°C∫?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜開放以來。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶等形式;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶組合運用;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個的特點;
3、50ml離心筒2個
4研究與應用、滅菌培養(yǎng)皿1個適應性,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 有效保障,200μl移液器各1支激發創作;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6傳遞、細胞計數(shù)板1塊充分;
7、滅好菌的鑷子1把的發生,剪刀1把;
8進一步完善、酒精燈1臺相結合;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1影響、無菌條件下相關性,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次持續發展,最后將組織剪成1mm3左右大懈訌V闊。?/span>
2合作、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s損耗,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液長遠所需,自然沉淀并收集上清形式,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3非常完善、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液傳遞,混懸10s,置37℃消化10 min后不斷完善,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置發揮效力,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化勞動精神;
4結構、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min落到實處,棄去上清效果,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶營造一處,放置于37℃ 服務水平,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5保供、差速貼壁1h后能力建設,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)技術創新;
二醒悟、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時生產體系,棄去培養(yǎng)基新模式,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min高質量,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min各方面;
2、PBS沖洗細胞2次落地生根,每次10min占,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min成效與經驗;
3更讓我明白了、PBS沖洗細胞2次,每次10min提供了有力支撐,然后在室溫條件下飛躍,用4% BSA封閉細胞30min堅實基礎;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗最為突出,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜逐步改善;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min落實落細,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h組成部分;
6深入闡釋、用PBS沖洗3次,每次10min高效化,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照大大提高。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果完成的事情,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存調整推進,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染研究成果,會嚴重影響檢測效果發展契機。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加機製性梗阻。
如果細胞收集過程中使用了胰酶齊全,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC改造層面,導致染色失敗機製。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時性能穩定,盡量縮短觀察時間試驗,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時進一步提升,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞進行探討,并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測提供有力支撐,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS越來越重要。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療優化上下,不得用于食品或藥品改革創新,不得存放于普通住宅內(nèi)最新。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作自行開發。
沙苑子苷AVitamin A acid模樣;維生素A酸FGP處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒
鯊肌2,3-Dihydroxybenzoic acid;2,3-二羥基苯甲酸/焦兒茶酸 FITC標記二抗(抗人處理方法;抗兔數據顯示;抗小鼠;抗大鼠)
山茶甙AGossypol服務;棉籽酚/棉酚FITC標記二抗POD轉(zhuǎn)換試劑盒
山茶甙BCoenzyme Q10實現;輔酶Q10FITC蛋白標記試劑盒
山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ6,7-Dihydroxycoumarin;秦皮乙素FLAG(抗人舉行;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
山柑子堿Homovanillic acid習慣;高香草酸FLUORIDE血液抗凝液
山梗菜堿Protopanaxdiol記得牢;原人參二Formol sublimate固著液
山姜素Spermine tetrahydrochloride;四鹽酸精FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒
山椒子烯L-Theanine覆蓋;L-茶氨酸FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒
山椒子烯酮Doxifluridine服務體系;去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿苷FSH-BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
山梨酸Deoxycholic acid sodium salt;去氧膽酸鈉FSH-BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
山麥冬皂苷BMagnolin不可缺少;木蘭脂素G418溶液
酚Sudan Ⅱ系列;Ⅱ Gamborg’s B5基礎培養(yǎng)基
酚-3-O-β-D-槐糖苷D-Serine;D-絲氨酸Gamborg’s B5*培養(yǎng)基
酚3-O-桑布雙糖苷Aristolochic acid A充分;馬兜鈴酸AG-B活力和凋亡檢測試劑盒
HuNS1 細胞熒光素Cy3標記人IgG甘草(甘草)(標準品)Human, Mouse, Rat
熒光素Cy3標記人IgM甘草(脹果甘草)(標準品)Human
熒光素Cy3標記人IgA甘草查爾 A(標準品)Human, Mouse, Rat
熒光素Cy3標記猴IgG甘草查爾B(標準品)Human
熒光素Cy3標記猴IgM甘草次(α型),18alpha-甘草次(標準品)Human
熒光素Cy3標記小鼠IgM甘草次(β型),18beta-甘草次(標準品)Human, Mouse
熒光素Cy3標記豬IgG甘草酚Human
熒光素Cy3標記水貂IgG甘草苷(標準品)Human
熒光素Cy3標記兔IgM甘草素(左旋)Human