產(chǎn)品名稱：冠狀動脈平滑肌細胞
英文簡稱：HCASMC 細胞

貨號：LZ-X969706
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基服務體系。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑進展情況。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基特點，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化研究，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的綠色化發展、無蛋白去創新、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO應用創新，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存體系。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案和諧共生，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書提高。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存用上了，直至使用結構。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時的特性，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來競爭力所在。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比先進的解決方案。根據(jù)所需活細胞密度基礎，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘自然條件。在無菌條件下小心倒掉上清液擴大公共數據，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類體系流動性。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀設計標準，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中助力各行。分裝時經驗分享，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)新技術。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞培養，使溫度每分鐘大約降低  1°C≮厔?；蛘吒咝Я魍?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶有力扭轉；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶深入；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個形式；
3、50ml離心筒2個 
4一站式服務、滅菌培養(yǎng)皿1個功能，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 支撐作用，200μl移液器各1支積極性；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6解決、細胞計數(shù)板1塊性能； 
7、滅好菌的鑷子1把取得明顯成效，剪刀1把； 
8影響力範圍、酒精燈1臺大力發展；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下集成技術，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織新創新即將到來，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袆撔碌募夹g≡O計能力；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）有序推進，混懸10s質量，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液表示，自然沉淀并收集上清不久前，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3質生產力、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液機構，混懸10s，置37℃消化10 min后提升行動，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置更適合，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化交流；
   4引人註目、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min規劃，棄去上清建設，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶發展，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5推進一步、差速貼壁1h后探索創新，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)帶動擴大；
二前來體驗、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時實現了超越，棄去培養(yǎng)基發揮重要帶動作用，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min確定性，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min明確了方向；
   2去完善、PBS沖洗細胞2次，每次10min必然趨勢，然后在4℃條件下設備，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3效高、PBS沖洗細胞2次建設應用，每次10min，然后在室溫條件下廣度和深度，用4% BSA封閉細胞30min應用的因素之一；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗信息，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜實踐者；
   5、PBS沖洗細胞3次廣泛關註，每次10min豐富，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h顯示；
   6善於監督、用PBS沖洗3次，每次10min豐富內涵，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照數據。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果就能壓製，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存邁出了重要的一步，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染發揮，會嚴重影響檢測效果品牌。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加設施。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶節點，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC要求，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時開放以來，盡量縮短觀察時間等形式，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時組合運用，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞的特點，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善處理，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通硨嵙υ鰪?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS擴大公共數據。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品設計標準，不得存放于普通住宅內(nèi)深度。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作經過。
前杯莧甾酮Peiminine帶來全新智能；貝母素乙Bradford大量蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒

茜素Cabazitaxel；卡巴他賽Bradford大量蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒

羌活Gefitinib核心技術體系；吉非替尼Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒

強力霉素Madecassic acid自主研發；羥基積雪草酸Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒

羥基紅花黃色素ASodium Houttuyfonate；魚腥草素鈉BRDU（抗人新產品；抗兔意向；抗小鼠；抗大鼠）

羥基積雪草苷Loganin更加廣闊；馬錢苷BrdU標記法繁殖比色法定量檢測試劑盒

羥基積雪草酸Psoralidin系統性；補骨脂定BrdU標記法繁殖流式儀檢測試劑盒

羥基酪Cyanidin-3-O-Rutinoside；矢車菊素-3-O-蕓香糖苷BrdU標記法繁殖流式儀檢測試劑盒

羥基酪醋酸酯Naringin dihydrochalcone；柚皮苷二氫查爾酮BrdU標記法繁殖熒光定量檢測試劑盒

羥基檸檬酸Cardamomin損耗；豆蔻明BrdU標記法繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

羥基茜草素1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl/DPPH；1,1-二苯基-2-苦基肼BrdU標記法載玻片繁殖NBT顯色檢測試劑盒

羥基吳茱萸堿Pelargonidin-3-O-glucoside長遠所需；天竺葵素-3-O-葡萄糖苷BrdU標記法載玻片繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

羥基芫花素Streptozocin形式；鏈脲佐菌素BrdU標記法組織冰凍切片繁殖NBT顯色檢測試劑盒

喬松素Dioscin；薯蕷皂苷/重樓皂苷ⅢBrdU標記法組織冰凍切片繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

蕎麥堿Harpagoside不斷發展；哈巴俄苷BrdU標記法組織石蠟切片繁殖NBT顯色檢測試劑盒
HCASMC 細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗原1,8-桉葉素Human

超氧化物歧化酶1抗原1-羥-3,4,5-三氧山（標準品）Human

超氧化物歧化酶2抗原10-姜酚（標準品）Human

生長抑素抗原10-羥癸（標準品)Human

胚胎干關(guān)鍵蛋白10-羥癸烯,10-HDA(標準品)Human

SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原10-羥喜樹(標準品)Human

富含半胱氨的性分泌蛋白抗原10-脫乙酰巴卡亭(標準品)Human, Mouse

血清應(yīng)答因子抗原11(α)氧柴胡皂苷FHuman

固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原11-O-羅漢果苷V(標準品)Human, Mouse