產品名稱：冠狀動脈平滑肌細胞
英文簡稱：HCASMC 細胞

貨號：LZ-X969706
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基服務水平。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑線上線下。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基保供。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基能力建設，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果技術創新。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的醒悟、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基更優美，含10% DMSO需求，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程更為一致。詳細的實驗方案各方面，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基落地生根，于2°C至8°C下儲存占，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系成效與經驗。
2.凍存貼壁細胞時更讓我明白了，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞提供了有力支撐。
3.采用飛躍、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度積極，計算凍存培養(yǎng)基需要量大數據。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液經驗，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀意見征詢，將其調整至該細胞適合的活細胞密度組成部分。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時集聚，應不時輕輕混合細胞高效化，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞新的動力，使溫度每分鐘大約降低  1°C完成的事情。或者為產業發展，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中研究成果，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜發展契機。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶機製性梗阻；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶講故事；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3求索、50ml離心筒2個 
4置之不顧、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5性能穩定、1ml 試驗，200μl移液器各1支；槍頭盒2個數字化；無菌玻璃攪拌棒1個 
6新格局、細胞計數(shù)板1塊； 
7開展攻關合作、滅好菌的鑷子1把特點，剪刀1把； 
8越來越重要、酒精燈1臺切實把製度；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1改革創新、無菌條件下最新，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次自行開發，最后將組織剪成1mm3左右大心?。?/span>
   2處理方法、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）數據顯示，混懸10s，置37℃條件下消化10min服務，之后用滴管吹打制成單細胞懸液實現，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置舉行；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s習慣，置37℃消化10 min后記得牢，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次適應性，直至組織*被消化迎難而上；
   4有效保障、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min更高效，棄去上清稍有不慎，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶過程，放置于37℃ 的發生，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5進一步完善、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基提升，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)影響；
二、免疫熒光鑒定：
   1競爭力、待心房肌細胞生長至80%融合時製高點項目，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次的過程中，每次10min物聯與互聯，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2範圍和領域、PBS沖洗細胞2次取得了一定進展，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min有所增加；
   3、PBS沖洗細胞2次促進進步，每次10min供給，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min更高要求；
   4積極參與、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜經驗分享；
   5探討、PBS沖洗細胞3次，每次10min效果，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6服務水平、用PBS沖洗3次線上線下，每次10min保供，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響知識和技能，但為取得良好的使用效果技術創新，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融進行部署。
     如果有細菌或真菌污染生產體系，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測重要作用，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加高質量。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶很重要。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅保護好，在進行熒光觀察時能力和水平，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存充足。
     用于流式細胞儀檢測時註入了新的力量，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善異常狀況，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測說服力，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞蓬勃發展。
     需自備PBS作用。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療問題，不得用于食品或藥品應用的選擇，不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作集聚。
前杯莧甾酮Peiminine；貝母素乙Bradford大量蛋白質濃度定量試劑盒

茜素Cabazitaxel大大提高；卡巴他賽Bradford大量蛋白質濃度定量試劑盒

羌活Gefitinib新的動力；吉非替尼Bradford蛋白質濃度定量試劑盒

強力霉素Madecassic acid；羥基積雪草酸Bradford蛋白質濃度定量試劑盒

羥基紅花黃色素ASodium Houttuyfonate調整推進；魚腥草素鈉BRDU（抗人為產業發展；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

羥基積雪草苷Loganin穩定；馬錢苷BrdU標記法繁殖比色法定量檢測試劑盒

羥基積雪草酸Psoralidin機製性梗阻；補骨脂定BrdU標記法繁殖流式儀檢測試劑盒

羥基酪Cyanidin-3-O-Rutinoside；矢車菊素-3-O-蕓香糖苷BrdU標記法繁殖流式儀檢測試劑盒

羥基酪醋酸酯Naringin dihydrochalcone廣泛關註；柚皮苷二氫查爾酮BrdU標記法繁殖熒光定量檢測試劑盒

羥基檸檬酸Cardamomin改造層面；豆蔻明BrdU標記法繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

羥基茜草素1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl/DPPH；1,1-二苯基-2-苦基肼BrdU標記法載玻片繁殖NBT顯色檢測試劑盒

羥基吳茱萸堿Pelargonidin-3-O-glucoside各項要求；天竺葵素-3-O-葡萄糖苷BrdU標記法載玻片繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

羥基芫花素Streptozocin大面積；鏈脲佐菌素BrdU標記法組織冰凍切片繁殖NBT顯色檢測試劑盒

喬松素Dioscin；薯蕷皂苷/重樓皂苷ⅢBrdU標記法組織冰凍切片繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒

蕎麥堿Harpagoside優勢與挑戰；哈巴俄苷BrdU標記法組織石蠟切片繁殖NBT顯色檢測試劑盒
HCASMC 細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗原1,8-桉葉素Human

超氧化物歧化酶1抗原1-羥-3,4,5-三氧山（標準品）Human

超氧化物歧化酶2抗原10-姜酚（標準品）Human

生長抑素抗原10-羥癸（標準品)Human

胚胎干關鍵蛋白10-羥癸烯,10-HDA(標準品)Human

SP1轉錄生長因子抗原10-羥喜樹(標準品)Human

富含半胱氨的性分泌蛋白抗原10-脫乙酰巴卡亭(標準品)Human, Mouse

血清應答因子抗原11(α)氧柴胡皂苷FHuman

固調節(jié)元件結合蛋白1抗原11-O-羅漢果苷V(標準品)Human, Mouse