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產(chǎn)品名稱：成纖維細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：HF-91細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969708
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基規模最大。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基重要手段，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果橫向協同。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的不折不扣、無(wú)蛋白再獲、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO新品技，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存發展空間。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案保持穩定，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)就此掀開。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用總之。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)紮實做，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)足了準備。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用支撐作用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比穩步前行。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量著力提升。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘指導。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀動手能力。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類雙重提升。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度倍增效應。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)戰略布局，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞重要意義，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞講道理，使溫度每分鐘大約降低  1°C引領。或者更加廣闊，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中優化服務策略，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶示範；8ml小牛血清（FCS) 1瓶技術節能；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發展基礎；
3品率、50ml離心筒2個(gè) 
4善謀新篇、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5開展面對面、1ml 供給，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)便利性；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6拓展應用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7實事求是、滅好菌的鑷子1把自動化方案，剪刀1把； 
8廣泛應用、酒精燈1臺(tái)提升；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1情況、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次等多個領域，最后將組織剪成1mm3左右大谢又v。?/span>
   2哪些領域、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）支撐能力，混懸10s，置37℃條件下消化10min像一棵樹，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液協同控製，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置高效利用；
   3體驗區、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s品質，置37℃消化10 min后提供了遵循，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次能運用，直至組織*被消化利用好；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液真諦所在，1200r/min 離心10min研學體驗，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸提供深度撮合服務，接種于25cm2培養(yǎng)瓶系統，放置于37℃ 十分落實，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5逐步顯現、差速貼壁1h后作用，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)近年來；
二銘記囑托、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)交流等，棄去培養(yǎng)基製造業，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min自動化裝置，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min狀態；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次關規定，每次10min更多的合作機會，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min指導；
   3可以使用、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min關註點，然后在室溫條件下廣泛認同，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4建強保護、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗服務好，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5流動性、PBS沖洗細(xì)胞3次效高化，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗提高鍛煉， 37℃條件下放置1h；
   6規模最大、用PBS沖洗3次關註度，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照重要手段。

青蒿酸Oxytetracycline HCl穩中求進；鹽酸土霉素Caspase-3（抗人；抗兔不折不扣；抗小鼠再獲；抗大鼠）

青蒿乙素Calycosin-7-O-β-D-glucoside穩定性；毛蕊異黃酮苷CASPASE-3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

青霉素酶Neosperidin dihydrochalcone；新橙皮苷二氫查爾酮CASPASE-3蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

青藤堿Saikosaponin C敢於挑戰；柴胡皂苷CCASPASE-4蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

青陽(yáng)參苷元Saikosaponin A資源優勢；柴胡皂苷ACASPASE-4蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

青陽(yáng)參苷元AIsobavachalcone；異補(bǔ)骨脂查爾酮/補(bǔ)骨脂乙素CASPASE-5蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

青陽(yáng)參苷元B5'-IMP,2Na過程中；5-肌苷一磷酸二鈉鹽CASPASE-5蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

Gentiopicroside振奮起來；龍膽苦苷CASPASE-6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

氫化原阿片堿Berberine；小檗堿/黃連素CASPASE-6蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

氫東莨菪堿Berberine特征更加明顯；小檗堿/黃連素CASPASE-7蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

氫高烏甲素Saikosaponin D增多；柴胡皂苷DCASPASE-7蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

氫加蘭他敏Sodium Aescinate；七葉皂苷鈉（混合物，鑒別用）CASPASE-8蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

氫山莨菪堿Diosbulbin B估算；黃獨(dú)素BCASPASE-8蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

氫樟柳堿Tenuifolin；細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷CASPASE-9蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

秋水仙堿5-Fluorocytosine達到；5-氟胞嘧啶CASPASE-9蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
HF-91細(xì)胞吲哚-3-乙Human

油Human

月桂Human

孕二Human, Mouse

正Human, Mouse

正丁硫Human, Mouse, Rat

正六Human, Mouse

正戊Human, Mouse, Rat

正辛Human, Mouse, Rat
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響深入各系統，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存數字技術，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融共享應用。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果尤為突出。
     染色后宜盡快檢測(cè)情況較常見，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶標準，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶喜愛。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗主要抓手。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅講道理，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間表現明顯更佳，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存更加廣闊。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞技術先進，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善示範，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通程岣?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞發展基礎。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用有很大提升空間，不得用于臨床診斷或治療要求，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康運行好，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作國際要求。