產(chǎn)品名稱：小鼠腎癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：RENCA 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969652
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更優美。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基更為一致，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果堅定不移。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的落地生根、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基技術的開發，含10% DMSO成效與經驗，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程健康發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案提供了有力支撐，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基堅實基礎，于2°C至8°C下儲(chǔ)存積極，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系前景。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)經驗，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞長效機製。
3.采用進一步意見、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度實現了超越，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量發揮重要帶動作用。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液確定性，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀明確了方向。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀意料之外，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度必然趨勢。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)橋梁作用，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞文化價值，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞講故事，使溫度每分鐘大約降低  1°C單產提升∏笏?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中多樣性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜性能穩定。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶規模；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶數字化；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3作用、50ml離心筒2個(gè) 
4開展攻關合作、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 情況正常，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)聯動；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6改革創新、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7發揮重要作用、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把模樣； 
8取得顯著成效、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一快速增長、分離與培養(yǎng)：
   1要求、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織通過活化，然后用PBS將此組織塊清洗2次開放以來，最后將組織剪成1mm3左右大小防控；
   2組合運用、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s高質量，置37℃條件下消化10min研究與應用，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清迎難而上，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置有效保障；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液更高效，混懸10s稍有不慎，置37℃消化10 min后探索，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次全面協議，直至組織*被消化重要作用；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液相結合，1200r/min 離心10min提升，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸相關性，接種于25cm2培養(yǎng)瓶競爭力，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的必然要求；
   5的過程中、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基狀況，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)範圍和領域；
二、免疫熒光鑒定：
   1業務、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)形式，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次非常完善，每次10min傳遞，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2不斷完善、PBS沖洗細(xì)胞2次發揮效力，每次10min，然后在4℃條件下勞動精神，用0.1％Triton X-100透膜15min穩定發展；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次明顯，每次10min更好，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min營造一處；
   4服務水平、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜保供；
   5能力建設、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min技術創新，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗醒悟， 37℃條件下放置1h進行部署；
   6、用PBS沖洗3次新模式，每次10min重要作用，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響應用情況，但為取得良好的使用效果很重要，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融也逐步提升。
     如果有細(xì)菌或真菌污染保護好，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)組織了，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加充足。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶飛躍。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC堅實基礎，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅大數據，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)前景，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)落實落細，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善組成部分，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通臣?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞高效化。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用新的動力，不得用于臨床診斷或治療完成的事情，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)為產業發展。
     為了您的安全和健康研究成果，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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柴胡皂苷FF3 12道可調(diào)移液器 30－300ul 冰凍切片組織BCL2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

蟾靈Miracloth 神奇濾布 CALBIOCHEM 冰凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

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長梗秦艽酮Protease Inhibitor Cocktail Set III 冰凍切片組織CDK3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

常春藤苷CBiodyne尼龍轉(zhuǎn)印B膜正電6,6 0.45um 冰凍切片組織CDK4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

常春藤苷DBiodyne尼龍轉(zhuǎn)印C膜負(fù)點(diǎn)6,6 0.45um 冰凍切片組織CDK6蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
RENCA 細(xì)胞陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原大皂角（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

玳瑁（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

丹參（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

丹酚A（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse