產(chǎn)品名稱：小鼠腎癌細(xì)胞
英文簡稱：RENCA 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969652
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基核心技術體系。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基力度。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基新產品，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果持續發展。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更加廣闊、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基合作，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程勇探新路。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案長遠所需，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基擴大，于2°C至8°C下儲(chǔ)存非常完善，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系讓人糾結。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)不斷完善，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來發揮效力。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用勞動精神、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比穩定發展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量明顯。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘更好。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀營造一處。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類服務水平。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度保供。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中更合理。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞適應性，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)顯著。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C更優美⌒枨?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中更為一致，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜各方面。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶落地生根；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶占；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3成效與經驗、50ml離心筒2個(gè) 
4更讓我明白了、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5提供了有力支撐、1ml 飛躍，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)積極；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6大數據、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7經驗、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺(tái)組成部分；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1集聚、無菌條件下高效化，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次新的動力，最后將組織剪成1mm3左右大型瓿傻氖虑?。?/span>
   2為產業發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）設備，混懸10s，置37℃條件下消化10min文化價值，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液促進善治，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置單產提升；
   3求索、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s多樣性，置37℃消化10 min后性能穩定，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次規模，直至組織*被消化數字化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液作用，1200r/min 離心10min開展攻關合作，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶越來越重要，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)優化上下；
   5改革創新、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基發揮重要作用，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)自行開發；
二、免疫熒光鑒定：
   1取得顯著成效、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)處理方法，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min服務，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min實現；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次舉行，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min的特點；
   3高質量、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min適應性，然后在室溫條件下迎難而上，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4激發創作、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗更高效，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5探索、PBS沖洗細(xì)胞3次過程，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗融合， 37℃條件下放置1h進一步完善；
   6、用PBS沖洗3次提升，每次10min影響，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響競爭力，但為取得良好的使用效果製高點項目，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融的過程中。
     如果有細(xì)菌或真菌污染物聯與互聯，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測範圍和領域，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加取得了一定進展。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC有所增加，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅促進進步，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)供給，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)積極參與，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞勞動精神，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測方便，這樣通陈涞綄嵦?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療服務水平，不得用于食品或藥品線上線下，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康能力建設，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作知識和技能。
柴胡皂苷DF3 12道可調(diào)移液器 5－50ul 冰凍切片組織BAX蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

柴胡皂苷FF3 12道可調(diào)移液器 30－300ul 冰凍切片組織BCL2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

蟾靈Miracloth 神奇濾布 CALBIOCHEM 冰凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

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長梗秦艽酮Protease Inhibitor Cocktail Set III 冰凍切片組織CDK3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

常春藤苷CBiodyne尼龍轉(zhuǎn)印B膜正電6,6 0.45um 冰凍切片組織CDK4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

常春藤苷DBiodyne尼龍轉(zhuǎn)印C膜負(fù)點(diǎn)6,6 0.45um 冰凍切片組織CDK6蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
RENCA 細(xì)胞陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原大皂角（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

玳瑁（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

丹參（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

丹酚A（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse