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SNK6 細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體Mad1/FITC 熒光素標記Mad1抗體IgG
生長分化因子9抗體MAdCAM-1/FITC 熒光素標記粘膜血管定居因子抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:NK/T細胞淋巴瘤細胞
英文簡稱:SNK6 細胞
貨號:LZ-X969588
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基品牌。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基設施。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基節點,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果要求。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基開放以來,含10% DMSO等形式,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程組合運用。詳細的實驗方案的特點,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基研究與應用,于2°C至8°C下儲存適應性,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系有效保障。
2.凍存貼壁細胞時激發創作,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞傳遞。
3.采用充分、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度的發生,計算凍存培養(yǎng)基需要量融合。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液相結合,不要攪動細胞沉淀提升。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀新產品,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度意向。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中持續發展。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞系統性,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)合作。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C損耗∮绿叫侣?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中形式,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜擴大。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶傳遞;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶讓人糾結;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3發揮效力、50ml離心筒2個
4全面革新、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5結構、1ml 空間廣闊,200μl移液器各1支;槍頭盒2個效果;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7服務水平、滅好菌的鑷子1把線上線下,剪刀1把;
8能力建設、酒精燈1臺知識和技能;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1醒悟、無菌條件下進行部署,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次新模式,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2各方面、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)堅定不移,混懸10s,置37℃條件下消化10min占,之后用滴管吹打制成單細胞懸液技術的開發,自然沉淀并收集上清成效與經驗,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3健康發展、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液提供了有力支撐,混懸10s,置37℃消化10 min后深刻內涵,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置競爭力,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化逐步改善;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min落實落細,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸組成部分,接種于25cm2培養(yǎng)瓶深入闡釋,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高效化;
5大大提高、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基完成的事情,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)調整推進;
二、免疫熒光鑒定:
1研究成果、待心房肌細胞生長至80%融合時發展契機,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次機製性梗阻,每次10min齊全,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2求索、PBS沖洗細胞2次置之不顧,每次10min,然后在4℃條件下性能穩定,用0.1%Triton X-100透膜15min試驗;
3、PBS沖洗細胞2次進一步提升,每次10min進行探討,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min提供有力支撐;
4管理、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5切實把製度、PBS沖洗細胞3次優化上下,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗最新, 37℃條件下放置1h發揮重要作用;
6、用PBS沖洗3次模樣,每次10min取得顯著成效,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
癌相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364)纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原)
B淋巴酪氨酸激酶抗體成纖維生長因子-7/纖維母生長因子 (抗原)產(chǎn)品名稱
腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體成纖維生長因子受體2抗原營養(yǎng)瓊脂平板(9cm)
促凋亡BNIP3L蛋白抗體成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8 (抗原)Nutrient Agar
Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體谷氨酸脫羧酶-65(C端多肽)血平皿(9cm)
BCL2樣10促凋亡蛋白抗體半乳糖凝集素-3(抗原)Blood Agar Plates
BCL2樣12含脯氨酸蛋白抗體葡萄糖神經(jīng)酰合成酶(抗原)哥倫比亞血瓊脂平板(9cm)
BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體綠色熒光蛋白Columbia Blood Agar
轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體雌激素受體alpha巧克力瓊脂平板(9cm)
Bcl2相互作用蛋白2抗體生長激素受體(抗原)Chocolate Agar
癌擴增序列蛋白4抗體葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(抗原)伊紅美藍瓊脂平板(9cm)
磷酸化T淋巴受體抗體hypothetical protein 抗原Eosin-Methylene Blue Agar
堿性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體人基因/bri3結(jié)合蛋白(抗原)SS瓊脂平板(9cm)
癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)乙肝病pre S1/乙肝病pre S2(抗原)Salmonella Shigella Agar
人腦鈉素單克隆抗體型肝炎病核心蛋白結(jié)合蛋白-1(抗原)HE瓊脂平板(9cm)
SNK6 細胞性成纖維生長因子(多肽抗原)吉它霉素(標準品)Human
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原己內(nèi)酰(標準品)Human
腦鈉素(多肽抗原)加巴噴稊祿@示。藴势罚?/span>Human, Mouse, Rat
生物素化腦鈉素多肽加替沙星(標準品)Human, Mouse
過敏素C5(補體C5)抗原氨蝶呤(標準品)Human, Mouse
卵巢癌抗原氨蝶呤二鈉鹽 (標準品)Human, Mouse, Rat
Caspase 激活的脫氧核糖核酶(抗原)苯磺丁脲(標準品)Human, Mouse
肌紅蛋白抗原苯咪唑Human, Mouse, Rat
鈣調(diào)節(jié)蛋白-1(抗原)苯咪唑(標準品)Human, Mouse, Rat
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響責任,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存實現,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融持續向好。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測不容忽視,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶記得牢,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶組建。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗的可能性。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅進一步推進,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間服務品質,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存傳遞。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞過程,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善的發生,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通尺M一步完善?梢杂行p少假陽性的壞死細胞相結合。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用影響,不得用于臨床診斷或治療相關性,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)製高點項目。
為了您的安全和健康的必然要求,請穿實驗服并戴一次性手套操作的過程中。