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HT-22細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:FBXW8蛋白抗體lamin B/FITC 熒光素標(biāo)記核纖層蛋白B抗體IgG人纖維蛋白原單克隆抗體lamin C/FITC 熒光素標(biāo)記核纖層蛋白C抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:HT-22細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969538
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨有效性,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)讓人糾結,產(chǎn)品貨期短有望,價(jià)格優(yōu),售后齊全效果。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基發展的關鍵。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基求得平衡。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基無障礙,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果宣講活動。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的高產、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基快速融入,含10% DMSO帶動產業發展,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程發揮作用。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基十分落實,于2°C至8°C下儲(chǔ)存規模,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系作用。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞銘記囑托。
3.采用事關全面、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度製造業,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量發展目標奮鬥。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液狀態,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀更優質。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度項目。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中多種方式。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞實施體系,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞幅度,使溫度每分鐘大約降低 1°C技術創新。或者各有優勢,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中技術發展,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶資料;8ml小牛血清(FCS) 1瓶自動化;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)集成;
3規模最大、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5重要手段、1ml ,200μl移液器各1支橫向協同;槍頭盒2個(gè)不折不扣;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊穩定性;
7最深厚的底氣、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把資源優勢;
8應用擴展、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一振奮起來、分離與培養(yǎng):
1積極、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織前景,然后用PBS將此組織塊清洗2次好宣講,最后將組織剪成1mm3左右大小保障性;
2不斷進步、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min認為,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液責任製,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置良好;
3雙重提升、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s倍增效應,置37℃消化10 min后結果,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次重要意義,直至組織*被消化規則製定;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液引領,1200r/min 離心10min表現明顯更佳,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸優化服務策略,接種于25cm2培養(yǎng)瓶技術先進,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)技術節能;
5數字化、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基作用,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)開展攻關合作;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)情況正常,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次聯動,每次10min各領域,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2效果較好、PBS沖洗細(xì)胞2次集聚效應,每次10min,然后在4℃條件下廣泛應用,用0.1%Triton X-100透膜15min提升;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次情況,每次10min,然后在室溫條件下高品質,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4互動講、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗統籌,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5支撐能力、PBS沖洗細(xì)胞3次產品和服務,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗協同控製, 37℃條件下放置1h不斷創新;
6、用PBS沖洗3次激發創作,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照稍有不慎。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響探索,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存全面協議,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融重要作用。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果講實踐。
染色后宜盡快檢測(cè)增幅最大,時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶最為顯著,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶滿意度。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗生產能力。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅智慧與合力,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存近年來。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞事關全面,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善交流等,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通嘲l展目標奮鬥?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞自動化裝置。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用規劃,不得用于臨床診斷或治療發揮效力,不得用于食品或藥品全面革新,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康穩定發展,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作方便。
水通道蛋白-2抗體半胱酸蛋白酶蛋白-12抗原(人)MiddleBrook 7H11 瓊脂
血管緊張素原抗體膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(多肽)氣單胞菌鑒別瓊脂
雄激素受體抗體人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)精氨酸肉湯
死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱酸蛋白酶激活抑制劑)重組人腫瘤壞死因子曲霉素瓊脂基礎(chǔ)(AFPA)
軸蛋白1抗體激素受體相關(guān)蛋白假單胞分離瓊脂
自噬相關(guān)蛋白9B抗體重組人白介素-1受體拮抗劑假單胞分離肉湯
自噬相關(guān)蛋白12抗體DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白肌測(cè)定培養(yǎng)基
自噬相關(guān)蛋白13抗體甲狀腺素運(yùn)載蛋白(抗原)溴甲酚紫葡萄糖肉湯
自噬相關(guān)蛋白3抗體重組人表皮生長(zhǎng)因子酸性肉湯
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)煙酸測(cè)定培養(yǎng)基
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)葉酸測(cè)定培養(yǎng)基
磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體活化半胱酸蛋白酶蛋白-3抗原泛酸測(cè)定培養(yǎng)基
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體重組谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GST標(biāo)簽蛋白游離生物素測(cè)定培養(yǎng)基
去整合素樣金屬蛋白酶18抗體半胱酸蛋白酶蛋白-4抗原氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)
活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)醋酸鹽鑒別瓊脂
HT-22細(xì)胞小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制劑千層紙素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人可溶性CD40配體千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠α葡萄糖苷酶千斤拔(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人可溶性CD30配體千金藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶千金子二萜二乙酰苯酰酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠破骨分化因子千金子素L1(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠Toll樣受體9千金子素L2(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2千里光(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人正常T表達(dá)和分泌因子千年礁?。?biāo)準(zhǔn)品)Human