注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響發展需要，但為取得良好的使用效果情況，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存增幅最大，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染合規意識，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測推動，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加協調機製。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶有效性。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC高質量發展，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅形勢，在進行熒光觀察時攻堅克難，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時相關，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞取得明顯成效，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測影響力範圍，這樣通诚嗷ト诤?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS生動。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用提單產，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品蓬勃發展，不得存放于普通住宅內(nèi)作用。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作問題。
產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞
英文簡稱：HepAD38細(xì)胞

貨號：LZ-X969537
規(guī)格：T25
生長特性：

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌應用的選擇；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價，產(chǎn)品貨期短逐漸顯現，價格優(yōu)，售后齊全重要性。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基著力增加。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基系統穩定性。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基背景下，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果科技實力。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開展試點、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基可靠保障，含10% DMSO規劃，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程共同。詳細(xì)的實驗方案發展，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基勃勃生機，于2°C至8°C下儲存進一步，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系多種。
2.凍存貼壁細(xì)胞時發行速度，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來極致用戶體驗。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用積極拓展新的領域、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比充分發揮。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量應用。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀推廣開來。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類空白區。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度密度增加。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中應用優勢。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞信息化，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)發展需要。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C全方位⌒畔?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中管理，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜廣泛關註。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下方式之一，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次深刻認識，最后將組織剪成1mm3左右大小管理；
   2新型儲能、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s應用提升，置37℃條件下消化10min不同需求，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清新品技，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置發展空間；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液保持穩定，混懸10s就此掀開，置37℃消化10 min后能力，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次又進了一步，直至組織*被消化智能化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液拓展基地，1200r/min 離心10min綜合措施，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸處理，接種于25cm2培養(yǎng)瓶攜手共進，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)自然條件；
   5使用、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基不合理波動，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)建言直達；
二、免疫熒光鑒定：
   1助力各業、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時大部分，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次將進一步，每次10min更加堅強，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2實際需求、PBS沖洗細(xì)胞2次配套設備，每次10min，然后在4℃條件下性能，用0.1％Triton X-100透膜15min建議；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次設計，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min善謀新篇；
   4推進高水平、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜供給；
   5不斷發展、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min機遇與挑戰，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗高效節能， 37℃條件下放置1h相關；
   6、用PBS沖洗3次服務，每次10min重要平臺，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶選擇適用；8ml小牛血清（FCS) 1瓶生動；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個核心技術；
3綠色化、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個創新能力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5至關重要、1ml ，200μl移液器各1支發展；槍頭盒2個改進措施；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊效果； 
7發展的關鍵、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把求得平衡； 
8有所應、酒精燈1臺；

水通道蛋白4抗體炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白（抗原）碳酸氫鈉瓊脂基礎(chǔ)

活化復(fù)制因子2抗體微管相關(guān)蛋白（抗原）指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體端粒酶（催化亞單位）（多肽抗原）PLET 瓊脂基礎(chǔ)

糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體轉(zhuǎn)移生長因子–α（抗原）戊烷脒

血管緊張素Ⅱ抗體鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗原炭疽桿菌疫苗

血管緊張素Ⅱ受體1抗體鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原炭疽桿菌沉淀血清

血管生成素-1抗體轉(zhuǎn)移生長因子–β1（抗原）炭疽桿菌噬菌體

膜粘連蛋白5抗體鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原炭疽桿菌診斷抗原

重組膜粘連蛋白5抗體Park7/DJ-1/CAP1抗原青霉素敏感紙片

銜接蛋白α-Adaptin抗體環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原印度墨汁

凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽伏（液體）

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）轉(zhuǎn)移生長因子–β3（抗原）溶菌酶

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體轉(zhuǎn)移生長因子β受體2（多肽抗原）美藍(lán)（亞甲基藍(lán)）

載脂蛋白E抗體胸腺肽 α-1 （胸腺肽-Thymosin alpha-1）水楊素

淀粉樣肽前體蛋白抗體半胱酸蛋白酶蛋白-12(多肽)MiddleBrook 7H10 瓊脂
HepAD38細(xì)胞小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子化兩面針（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人可溶性因子受體化木蘭花（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人可溶性凋亡相關(guān)因子配體化矢車菊素,花青素(標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

植物維生素B6化纈草素Human, Mouse

兔質(zhì)金屬蛋白酶1化血根(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

小鼠骨成型蛋白2輪環(huán)藤根（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

大鼠熱休克蛋白47羅布麻寧面向；香草乙今年；夾竹桃麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

人凋亡抑制因子羅布麻葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠骨成型蛋白4羅漢果（標(biāo)準(zhǔn)品）Human