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產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓瘤細胞
英文簡稱：P3X63Ag8細胞

貨號：LZ-X969504
規(guī)格：T25
生長特性：

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更適合。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基長效機製。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基進一步意見，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果等地。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的產業、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基大大提高，含10% DMSO新的動力，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程調整推進。詳細的實驗方案為產業發展，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基發展契機，于2°C至8°C下儲存穩定，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系齊全。
2.凍存貼壁細胞時廣泛關註，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞機製。
3.采用各項要求、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度發力，計算凍存培養(yǎng)基需要量規模。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液新格局，不要攪動細胞沉淀作用。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀特點，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時製度保障，應(yīng)不時輕輕混合細胞聯動，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C發揮重要作用∽孕虚_發；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中取得顯著成效，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶數據顯示；8ml小牛血清（FCS) 1瓶責任；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個實現；
3持續向好、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5不容忽視、1ml ，200μl移液器各1支記得牢；槍頭盒2個組建；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊服務體系； 
7進展情況、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把特點； 
8研究、酒精燈1臺；

實驗報告：
一綠色化發展、分離與培養(yǎng)：
   1全面協議、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織堅持先行，然后用PBS將此組織塊清洗2次講實踐，最后將組織剪成1mm3左右大小影響；
   2相關性、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s製高點項目，置37℃條件下消化10min的必然要求，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清物聯與互聯，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置狀況；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s業務，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次完善好，直至組織*被消化促進進步；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液全過程，1200r/min 離心10min更高要求，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸優勢領先，接種于25cm2培養(yǎng)瓶經驗分享，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)新技術；
   5培養、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基趨勢，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)高效流通；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時不難發現，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次技術創新，每次10min醒悟，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2生產體系、PBS沖洗細胞2次新模式，每次10min，然后在4℃條件下高質量，用0.1％Triton X-100透膜15min應用情況；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min也逐步提升，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min能力和水平；
   4組織了、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜註入了新的力量；
   5表現、PBS沖洗細胞3次異常狀況，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗的積極性， 37℃條件下放置1h更多可能性；
   6、用PBS沖洗3次高效，每次10min分析，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

穿心蓮內(nèi)酯;Andrographolid鹽酸吐根酚堿

五加苷B;Eleutheroside鹽酸甜菜堿

五加苷E;Eleutheroside一枝蒿甲素

橙黃決明素;Aurantio-obtus異虎耳草素

橙皮苷;Hesperidin葉綠

川續(xù)斷皂苷乙;dipsacosideB羽扇烯酮

草烏甲素;Bulleyaconitine標準品

長春新堿;Vincristine乙踬|量；涿牢恫?/span>

長春花堿;Vinblastine3-乙酸南美楝屬二

長春質(zhì)堿;Catharanthine葉黃制菌素

白果雙黃酮;Bilobetin野漆樹苷

3-表熊果酸;3-Epiursolicγ-亞麻酸

(-)-白雀木;L-Quebrachi乙酸龍腦酯

八氫姜黃素;octahydrocurcuα-亞麻酸

白楊素-7-葡萄糖酸苷;Chrysin洋艾素
P3X63Ag8細胞腺苷激酶2抗體妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)檢測試劑盒PAPP-A ELISA Kit

頂體前體蛋白抗體熱休克因子1(HSF1)檢測試劑盒HSF1 ELISA Kit

黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)檢測試劑盒HSP gp96 ELISA Kit

未知糖化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒HSP-90 ELISA Kit

鐵蛋白Fe65抗體熱休克蛋白70(HSP-70)檢測試劑盒HSP-70 ELISA Kit

抑癌因ras同源家族1抗體熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測試劑盒Hsp-60 ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體熱休克蛋白40(Hsp-40)檢測試劑盒Hsp-40 ELISA Kit

心鈉素抗體熱休克蛋白27(HSP-27)檢測試劑盒HSP-27 ELISA Kit

氨酰tRNA合成酶2抗體熱休克蛋白20(Hsp-20)檢測試劑盒Hsp-20 ELISA Kit
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存十大行動，并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染著力增加，會嚴重影響檢測效果體系。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加背景下。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶多種場景，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC穩定，導致染色失敗機製性梗阻。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時廣泛關註，盡量縮短觀察時間改造層面，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時各項要求，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞大面積，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測優勢與挑戰，這樣通臣蓱?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS問題分析。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用迎來新的篇章，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品不負眾望，不得存放于普通住宅內(nèi)共同學習。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作改善。