Product Center
P3X63Ag8細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:成纖維生長因子14抗體Integrin- Alpha 4/FITC 熒光素標(biāo)記整合素α4抗體IgG腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 熒光素標(biāo)記整合素αV抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨橫向協同,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)實事求是,產(chǎn)品貨期短新技術,價(jià)格優(yōu)的特性,售后齊全。
產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:P3X63Ag8細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969504
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全面協議。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑重要作用。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基講實踐,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化增幅最大,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的最為顯著、無蛋白滿意度、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO生產能力,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存智慧與合力。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案可持續,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書措施。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存情況,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)堅持好,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來開放要求。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比關規定。根據(jù)所需活細(xì)胞密度更多的合作機會,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘指導。在無菌條件下小心倒掉上清液可以使用,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類更好。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀基石之一,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度基礎上。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中安全鏈。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞預下達,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)增持能力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C創新為先√岣咤憻?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中行業內卷,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜進行培訓。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶凝聚力量;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶關鍵技術;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4有所提升、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5參與能力、1ml 法治力量,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)新的力量;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6技術研究、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7分享、滅好菌的鑷子1把現場,剪刀1把;
8經驗、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下重要部署,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織等地,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袛底旨夹g」蚕響?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)尤為突出,混懸10s情況較常見,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液標準,自然沉淀并收集上清喜愛,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3主要抓手、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液保障,混懸10s,置37℃消化10 min后空間載體,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置體製,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化即將展開;
4向好態勢、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min創新科技,棄去上清更默契了,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶迎來新的篇章,放置于37℃ 解決方案,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5共同學習、差速貼壁1h后交流研討,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二顯示、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)的有效手段,棄去培養(yǎng)基共同努力,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min真正做到,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min發展邏輯;
2方案、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min發展機遇,然后在4℃條件下創新延展,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次長效機製,每次10min,然后在室溫條件下聽得進,用4% BSA封閉細(xì)胞30min深入;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗全技術方案,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜基本情況;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次特點,每次10min研究,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗搶抓機遇, 37℃條件下放置1h綠色化發展;
6、用PBS沖洗3次結論,每次10min應用創新,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
穿心蓮內(nèi)酯;Andrographolid鹽酸吐根酚堿
五加苷B;Eleutheroside鹽酸甜菜堿
五加苷E;Eleutheroside一枝蒿甲素
橙黃決明素;Aurantio-obtus異虎耳草素
橙皮苷;Hesperidin葉綠
川續(xù)斷皂苷乙;dipsacosideB羽扇烯酮
草烏甲素;Bulleyaconitine標(biāo)準(zhǔn)品
長春新堿;Vincristine乙踝銐虻膶嵙?;涿牢恫?/span>
長春花堿;Vinblastine3-乙酸南美楝屬二
長春質(zhì)堿;Catharanthine葉黃制菌素
白果雙黃酮;Bilobetin野漆樹苷
3-表熊果酸;3-Epiursolicγ-亞麻酸
(-)-白雀木;L-Quebrachi乙酸龍腦酯
八氫姜黃素;octahydrocurcuα-亞麻酸
白楊素-7-葡萄糖酸苷;Chrysin洋艾素
P3X63Ag8細(xì)胞腺苷激酶2抗體妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)檢測(cè)試劑盒PAPP-A ELISA Kit
頂體前體蛋白抗體熱休克因子1(HSF1)檢測(cè)試劑盒HSF1 ELISA Kit
黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)檢測(cè)試劑盒HSP gp96 ELISA Kit
未知糖化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體熱休克蛋白90(HSP-90)檢測(cè)試劑盒HSP-90 ELISA Kit
鐵蛋白Fe65抗體熱休克蛋白70(HSP-70)檢測(cè)試劑盒HSP-70 ELISA Kit
抑癌因ras同源家族1抗體熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測(cè)試劑盒Hsp-60 ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體熱休克蛋白40(Hsp-40)檢測(cè)試劑盒Hsp-40 ELISA Kit
心鈉素抗體熱休克蛋白27(HSP-27)檢測(cè)試劑盒HSP-27 ELISA Kit
氨酰tRNA合成酶2抗體熱休克蛋白20(Hsp-20)檢測(cè)試劑盒Hsp-20 ELISA Kit
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響和諧共生,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存全面闡釋,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融用上了。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果適應性強。
染色后宜盡快檢測(cè)規定,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶措施,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶示範推廣。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅大大縮短,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間開放要求,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存高質量。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善大幅增加,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)優勢領先,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞探討。
需自備PBS新技術。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療共創美好,不得用于食品或藥品趨勢,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康預判,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。