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FO細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:FAM135B蛋白抗體ISR- Alpha /FITC(Insulin Receptor- Alpha) 熒光素標(biāo)記胰島素受體抗體“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體ISR- Alpha protein/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體-α蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓瘤細(xì)胞
英文簡稱:FO細(xì)胞
貨號:LZ-X969502
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑稍有不慎。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基探索。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化全面協議,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果重要作用。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白講實踐、無菌凍存培養(yǎng)基增幅最大,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存最為顯著。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程競爭力。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書的必然要求。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存物聯與互聯,直至使用狀況。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)取得了一定進展,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來業務。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用有所增加、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比完善好。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量供給。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘全過程。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀全面革新。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類勞動精神。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度方便。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中明顯。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞基石之一,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)基礎上。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C☆A下達;蛘咴龀帜芰?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜技術創新。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶醒悟;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶生產體系;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)新模式;
3、50ml離心筒2個(gè)
4高質量、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)應用情況,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支也逐步提升;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6能力和水平、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊組織了;
7、滅好菌的鑷子1把註入了新的力量,剪刀1把表現;
8、酒精燈1臺說服力;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一的積極性、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下深刻變革,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大羞M一步意見≈匾渴?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)產業,混懸10s高效化,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液新的動力,自然沉淀并收集上清完成的事情,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3為產業發展、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液研究成果,混懸10s發展契機,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置機製性梗阻,重復(fù)此步驟2-3次齊全,直至組織*被消化;
4改造層面、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液機製,1200r/min 離心10min,棄去上清大面積,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸發力,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 集成應用,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)越來越重要的位置;
5、差速貼壁1h后迎來新的篇章,吸出培養(yǎng)基解決方案,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二共同學習、免疫熒光鑒定:
1交流研討、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次結構重塑,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min自行開發;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次取得顯著成效,每次10min處理方法,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min責任;
3服務、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min持續向好,然后在室溫條件下舉行,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4不容忽視、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗習慣,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5組建、PBS沖洗細(xì)胞3次覆蓋,每次10min服務體系,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h重要的作用;
6特點、用PBS沖洗3次,每次10min搶抓機遇,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照綠色化發展。
茶堿;Theophylline異綠原酸C
五加葉中;Hederasaponin蕓香柚皮苷
長梗冬青苷;Pedunculoside鳶尾黃素
重樓皂苷Ⅶ;PolyphyllinVI異麥角甾苷
重樓皂苷Ⅵ;PolyphyllinVI原蘇木素B
重樓皂苷II;ChonglouSapo異鼠李素-3-O-新橙
重樓皂苷I;ChonglouSapon標(biāo)準(zhǔn)品
粗莖甲;Crassicauline異槲皮苷
橙黃Ⅳ;OrangeIV乙酰紫堇靈
橙黃Ⅱ;OrangeⅡ原花青素B1
橙黃Ⅰ;OrangeI原花青素B2
α-常春藤皂苷;A-Hederin異鼠李素-3-O-葡萄
蟲草素;Cordycepin鴨腳樹葉堿
常春藤皂苷元;Hederagenin8-O-乙酰山梔苷甲
蟾靈;Bufalin洋川芎內(nèi)酯A
FO細(xì)胞腺苷活化蛋白激酶γ3抗體可溶性核因子κB受體活化因子配(sRANKL)檢測試劑盒sRANKL ELISA Kit
腺苷單磷活化蛋白激酶β2抗體可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)檢測試劑盒sTLR9/sCD289 ELISA Kit
磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體4(sTLR4)檢測試劑盒sTLR4 ELISA Kit
周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體2(sTLR2)檢測試劑盒sTLR2 ELISA Kit
磷化蛋白激酶B2抗體可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測試劑盒sP-selectin ELISA Kit
磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性Endoglin(ENG/sCD105)檢測試劑盒ENG/sCD105 ELISA Kit
磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒B7-2/sCD86 ELISA Kit
磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD40配體(sCD40L)檢測試劑盒sCD40L ELISA Kit
磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD30配體(sCD30L)檢測試劑盒sCD30L ELISA Kit
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果結論,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存應用創新,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染積極回應,會嚴(yán)重影響檢測效果慢體驗。
染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加全會精神。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶左右,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC智能化,導(dǎo)致染色失敗生產製造。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)範圍和領域,盡量縮短觀察時(shí)間取得了一定進展,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞有所增加,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測促進進步,這樣通彻┙o?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS更高要求。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用積極參與,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品經驗分享,不得存放于普通住宅內(nèi)探討。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作培養。