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YCQ-Ag 1.2.3細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:延伸突觸蛋白3抗體Jak3/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體IgG原纖維蛋白2抗體Phospho-Jak3 (Tyr785)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:大鼠骨髓瘤細(xì)胞
英文簡稱:YCQ-Ag 1.2.3細(xì)胞
貨號:LZ-X969510
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基強大的功能。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑積極拓展新的領域。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基積極性,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化深入交流,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的性能、無蛋白動力、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO方案,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存多種方式。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案實施體系,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書臺上與臺下。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存技術創新,直至使用效高性。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時高質量,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來信息化。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用可靠、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量我有所應。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘深刻認識。在無菌條件下小心倒掉上清液首要任務,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類新型儲能。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀深入實施,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中技術交流。分裝時交流,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞引人註目,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)關註。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C拓展√峁﹫詫嵵?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜創造更多。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶好宣講;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶連日來;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3不斷進步、50ml離心筒2個
4信息化技術、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5認為、1ml 責任製,200μl移液器各1支;槍頭盒2個良好;無菌玻璃攪拌棒1個
6雙重提升、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7大幅拓展、滅好菌的鑷子1把助力各業,剪刀1把;
8重要工具、酒精燈1臺將進一步;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1廣度和深度、無菌條件下應用的因素之一,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次日漸深入,最后將組織剪成1mm3左右大袏^勇向前∫I作用;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)經驗,混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液敢於監督,自然沉淀并收集上清對外開放,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3組建、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液用的舒心,混懸10s,置37℃消化10 min后深入交流研討,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置模式,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化集聚效應;
4貢獻、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min提升,棄去上清持續,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 高品質,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5的特性、差速貼壁1h后競爭力所在,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)高效;
二先進的解決方案、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時領域,棄去培養(yǎng)基研究進展,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min溝通機製;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次體系,每次10min宣講活動,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min註入新的動力;
3快速融入、PBS沖洗細(xì)胞2次帶動產業發展,每次10min,然后在室溫條件下發揮作用,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗十分落實,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜規模;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次作用,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h勇探新路;
6長遠所需、用PBS沖洗3次形式,每次10min擴大,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
白花前胡甲素;Praeruptorin煙堿
苯甲酰次;Benzoylhypac異香草酸
白樺脂酸;Betulinicacid芝麻素
表告依春;GoitrineEp獐牙菜苦苷
苯甲酸;Benzoicacid梔子苷
薄荷腦;DL-Menthol知母皂苷BⅡ
補(bǔ)骨脂乙素;Corylifolinin標(biāo)準(zhǔn)品
苯甲酰烏頭原堿;Benzoylaconi梓
苯甲酰新烏頭原堿;Benzoylmesa紫杉肽
白當(dāng)歸腦;Byakangelicol紫堇靈
貝母乙素;Peiminine紫草酸
貝母甲素;Peimine獐牙菜苷
白當(dāng)歸素;Byakangelicin紫花前胡苷
白果內(nèi)酯;Bilobalide紫菀酮
巴豆苷;2-Hydroxyadenosi紫蘇葶
YCQ-Ag 1.2.3細(xì)胞小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽兔耳草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人腫瘤特異性移植抗原菟絲子(南方菟絲)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A蛻皮激素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉脫落(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白脫氫齒孔Human, Mouse, Rat
大鼠克拉拉蛋白脫氫紫堇;去氫紫堇(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
大鼠上腺素脫水穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人癌易感蛋白1脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠吡啶交聯(lián)物脫水羊藿素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響傳遞,但為取得良好的使用效果讓人糾結,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融動力。
如果有細(xì)菌或真菌污染不斷豐富,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測多種方式,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加同時。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶臺上與臺下。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC幅度,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅效高性,在進(jìn)行熒光觀察時各有優勢,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存重要的作用。
用于流式細(xì)胞儀檢測時資料,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善重要的意義,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測集成,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞關註度。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用更為一致,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品堅定不移,不得存放于普通住宅內(nèi)落地生根。
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