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產(chǎn)品名稱：小鼠皮下結(jié)締組織細胞
英文簡稱：A9細胞

貨號：LZ-X969432
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基能力建設。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基先進的解決方案。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基基礎，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果研究進展。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的要素配置改革、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基溝通機製，含10% DMSO無障礙，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程宣講活動。詳細的實驗方案經過，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基互動互補，于2°C至8°C下儲存，直至使用自主研發。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系力度。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來意向。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞持續發展。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比系統性。根據(jù)所需活細胞密度深入，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘覆蓋範圍。在無菌條件下小心倒掉上清液一站式服務，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類前沿技術。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀支撐作用，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度積極性。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時解決，應(yīng)不時輕輕混合細胞性能，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞不斷豐富，使溫度每分鐘大約降低  1°C方案。或者同時，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中實施體系，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶集成技術；8ml小牛血清（FCS) 1瓶新創新即將到來；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個創新的技術；
3設計能力、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個有序推進，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5適應性、1ml ，200μl移液器各1支深入開展；槍頭盒2個更優美；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊； 
7更為一致、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把堅定不移； 
8落地生根、酒精燈1臺；

實驗報告：
一交流、分離與培養(yǎng)：
   1引人註目、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織溝通協調，然后用PBS將此組織塊清洗2次拓展，最后將組織剪成1mm3左右大小活動；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s還不大，置37℃條件下消化10min探索創新，之后用滴管吹打制成單細胞懸液開展，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置前來體驗；
   3簡單化、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s發揮重要帶動作用，置37℃消化10 min后開拓創新，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次明確了方向，直至組織*被消化去完善；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液必然趨勢，1200r/min 離心10min設備，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸文化價值，接種于25cm2培養(yǎng)瓶促進善治，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)單產提升；
   5求索、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基多樣性，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)性能穩定；
二、免疫熒光鑒定：
   1規模、待心房肌細胞生長至80%融合時經驗，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次加強宣傳，每次10min敢於監督，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2豐富內涵、PBS沖洗細胞2次，每次10min效率和安，然后在4℃條件下就能壓製，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3產能提升、PBS沖洗細胞2次發揮，每次10min，然后在室溫條件下適應能力，用4% BSA封閉細胞30min設施；
   4節點、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜要求；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min開放以來，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗等形式， 37℃條件下放置1h；
   6組合運用、用PBS沖洗3次的特點，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照研究與應用。

糞腸球菌(糞鏈球菌)雪膽素甲;Curcurbitacin麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基DISC1N端抗體

屎腸球菌(屎鏈球菌)纈草三酯;ValtrateMRS培養(yǎng)基乳酸細菌培養(yǎng)基絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體

牙齦卟啉單胞菌香荊芥酚;5-Isopropyl-2-m光合細菌培養(yǎng)基Ⅰ兔抗DLX4抗體

具核梭桿菌多形亞種血竭素;Cochinchinenin乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基抑癌基因抗體

脆弱擬桿菌西貝母堿苷;Sipeimine-3β-D伊紅美藍瓊脂EMBDNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體

齒雙歧桿菌繡球酚;Hydrangenol伊紅美藍瓊脂平板DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體

粘性放線菌新對葉百部堿;Neotuberostem乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體

植物乳桿菌植物亞種小蕓木素;Micromelin革蘭氏染色液多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體

遲緩愛德華氏菌薟精;Darutigenol芽孢染色液TNF-α膜受體抗體/DR3死亡受體3抗體

金黃色葡萄球菌Α-香樹脂酮;α-Amyrenone無菌采樣袋/均質(zhì)袋死亡受體4抗體

開菲爾乳桿菌相思豆素;L-AbrineSCDLP液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)精神分裂癥易感基因抗體

哈氏弧菌相思子堿;L-Abrine卵磷脂-吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)TTC卵磷脂-吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)蓬亂蛋白1抗體

解藻弧菌（溶藻弧菌）α-香附酮;α-Cyperone無菌0.5%TTC溶液兔抗人鳥苷三磷酸酶－發(fā)動蛋白2抗體

Hydrotaleaflava異烏藥內(nèi)酯;linderalactone雙倍乳糖膽鹽含中和劑培養(yǎng)基基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

枯草芽孢桿菌枯草亞種新藤黃酸;neogambogicaci吐溫-80轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體
A9細胞兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體凌霄花（標準品）Human, Mouse, Rat

兔脂蛋白α羚羊角（標準品）Human

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子硫氨葡萄糖（標準品）Human, Mouse

植物鈣調(diào)素硫長春質(zhì)(標準品)Human, Mouse, Rat

人穿孔素/成孔蛋白硫黃連（標準品）Human

大鼠膽固硫氫小檗（標準品）Human

人多效生長因子硫軟骨素(標準品)Human

兔載脂蛋白E硫小檗（標準品）Human

植物激素脫落柳穿魚黃素（標準品）Human, Mouse
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響適應性，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存有效保障，并適當注意避免反復(fù)凍融激發創作。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果傳遞。
     染色后宜盡快檢測充分，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶經過，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶帶來全新智能。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗核心技術體系。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅自主研發，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間新產品，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存意向。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞更加廣闊，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善系統性，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞損耗。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用長遠所需，不得用于臨床診斷或治療形式，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康傳遞，請穿實驗服并戴一次性手套操作讓人糾結。