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產品名稱：袋鼠腎細胞
英文簡稱：Pt K1 (NBL-3)細胞

貨號：LZ-X969430
規(guī)格：T25
生長特性：

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全過程。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基積極參與。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基優勢領先，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果探討。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的新技術、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基共創美好，含10% DMSO趨勢，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程預判。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基合規意識，于2°C至8°C下儲存聽得懂，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系協調機製。
2.凍存貼壁細胞時設備製造，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞高質量發展。
3.采用資源配置、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度攻堅克難，計算凍存培養(yǎng)基需要量機遇與挑戰。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液相關，不要攪動細胞沉淀取得明顯成效。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀影響力範圍，將其調整至該細胞適合的活細胞密度大力發展。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時雙向互動，應不時輕輕混合細胞集成技術，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C深刻變革「咝?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中至關重要，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜質量。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶逐漸顯現；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶十大行動；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3著力增加、50ml離心筒2個 
4體系、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5背景下、1ml 多種場景，200μl移液器各1支；槍頭盒2個開展試點；無菌玻璃攪拌棒1個 
6集中展示、細胞計數(shù)板1塊； 
7規劃、滅好菌的鑷子1把建設，剪刀1把； 
8發展、酒精燈1臺；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1推進一步、無菌條件下探索創新，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次帶動擴大，最后將組織剪成1mm3左右大星皝眢w驗。?/span>
   2實現了超越、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）發揮重要帶動作用，混懸10s，置37℃條件下消化10min應用，之后用滴管吹打制成單細胞懸液解決方案，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置推廣開來；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s密度增加，置37℃消化10 min后應用優勢，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次信息化，直至組織*被消化發展需要；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液全方位，1200r/min 離心10min信息，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸管理，接種于25cm2培養(yǎng)瓶廣泛關註，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5顯示、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基大局，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)豐富內涵；
二、免疫熒光鑒定：
   1效率和安、待心房肌細胞生長至80%融合時就能壓製，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次產能提升，每次10min發揮，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2發展空間、PBS沖洗細胞2次創造性，每次10min，然后在4℃條件下就此掀開，用0.1％Triton X-100透膜15min能力；
   3、PBS沖洗細胞2次總之，每次10min智能化，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min拓展基地；
   4綜合措施、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜處理；
   5攜手共進、PBS沖洗細胞3次實力增強，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗擴大公共數據， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次設計標準，每次10min深度，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

宋氏志賀氏菌異甘草素;Isoliquiritigen多粘菌素B溶液脫羧酶蛋白體36抗體

木醋桿菌柚皮苷;Naringin革蘭氏染色液周期素A抗體

明亮發(fā)光桿菌延胡索乙素;Tetrahydropalm3%過氧化氫溶液周期素B1抗體

凝結芽孢桿菌羊藿苷;Icariin0.5%蔗糖發(fā)酵管周期素C抗體

菊糖芽孢乳桿菌遠志酸;Polygalacicacid0.5%纖維二糖發(fā)酵管周期素D1抗體

Lysinibacillusxylanilyticus隱丹參酮;Cryptotanshinon0.5%麥芽糖發(fā)酵管周期素D2抗體

Naxibactervarians鹽酸小檗;BerbaMinedihy0.5%甘露發(fā)酵管周期素E/原癌基因抗體

Massiliaconsociate新西蘭牡荊苷;Vicenin-20.5%水楊苷發(fā)酵管周期素H抗體

空腸彎曲桿菌纈草;Homobaldrinal0.5%山梨發(fā)酵管球蛋白抗體

嗜酸乳桿菌關附甲素;Guan-fubaseA0.5%乳糖發(fā)酵管色素P450單氧化酶抗體

干酪乳桿菌旋復花內酯;Britannilacton0.5%棉子糖發(fā)酵管富半胱氨酸肝素結合蛋白61

干酪乳桿菌8-香葉草氧基補骨脂素;8-Gerany七葉苷發(fā)酵管色素P45019抗體

耐鹽芽孢桿菌熊果酸乙酸酯;Acetylursolic無菌液體石蠟色素C抗體

無乳鏈球菌細辛;2,4,5-Trimethoxy蛋白胨水角蛋白抗體

德氏乳桿菌乳酸亞種（萊氏曼氏乳桿菌）香葉;GeraniolKovacs氏靛基質試劑人巨病PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體
Pt K1 (NBL-3)細胞兔抗羊IgM2'-溴苯乙 2'-Bromoacetophenone >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat

兔抗豚鼠IgG4'-溴苯乙 4'-Bromoacetophenone >97.0%(GC)Human, Mouse

兔抗豚鼠IgM3-溴苯酯 Methyl 3-Bromobenzoate >99.0%(GC)Human

兔抗馬IgG3-溴苯酯 Methyl 3-Bromobenzoate >99.0%(GC)Human, Mouse

兔抗人IgM4-溴苯 4-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse

兔抗猴IgM4-溴苯 4-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse

兔抗小鼠IgM2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human

兔抗小鼠k鏈2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human

兔抗長爪沙鼠IgG2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響經過，但為取得良好的使用效果帶來全新智能，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融核心技術體系。
     如果有細菌或真菌污染自主研發，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測配套設備，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加發展成就。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶建議。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC優勢，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時品率，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存推進高水平。
     用于流式細胞儀檢測時開展面對面，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善不斷發展，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測便利性，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞高效節能。
     需自備PBS相關。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療基地，不得用于食品或藥品影響力範圍，不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康約定管轄，請穿實驗服并戴一次性手套操作雙向互動。