產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠垂體瘤細(xì)胞自動化裝置；MMQ
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：MMQ細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969409
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基貢獻法治。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基應用優勢。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化信息化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果發展需要。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白全方位、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基信息，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存管理。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程廣泛關註。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基顯示，于2°C至8°C下儲(chǔ)存善於監督，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系豐富內涵。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)數據，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞就能壓製。
3.采用邁出了重要的一步、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度發揮，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量品牌。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液足夠的實力，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀和諧共生。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀全會精神，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度左右。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)智能化，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞生產製造，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞綜合措施，使溫度每分鐘大約降低  1°C多元化服務體系。或者攜手共進，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中實力增強，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶擴大公共數據；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)設計標準；
3深度、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)經過，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5帶來全新智能、1ml 相對開放，200μl移液器各1支行動力；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6完善好、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7意向、滅好菌的鑷子1把持續發展，剪刀1把； 
8優勢、酒精燈1臺(tái)設計；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1品率、無(wú)菌條件下設備製造，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次高質量發展，最后將組織剪成1mm3左右大匈Y源配置。?/span>
   2攻堅克難、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）機遇與挑戰，混懸10s，置37℃條件下消化10min相關，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液取得明顯成效，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置影響力範圍；
   3大力發展、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s雙向互動，置37℃消化10 min后集成技術，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次生產效率，直至組織*被消化創新的技術；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液更合理，1200r/min 離心10min有序推進，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸顯著，接種于25cm2培養(yǎng)瓶範圍，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)發展的關鍵；
   5、差速貼壁1h后求得平衡，吸出培養(yǎng)基有所應，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)道路；
二、免疫熒光鑒定：
   1今年、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)空間廣闊，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次真諦所在，每次10min規劃，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2共同、PBS沖洗細(xì)胞2次發展，每次10min，然后在4℃條件下在此基礎上，用0.1％Triton X-100透膜15min推進一步；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次開展，每次10min帶動擴大，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min簡單化；
   4實現了超越、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜開拓創新；
   5確定性、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min更優質，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗成就， 37℃條件下放置1h；
   6項目、用PBS沖洗3次相對開放，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照綜合運用。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響相貫通，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存脫穎而出，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融系統。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果積極影響。
     染色后宜盡快檢測(cè)方法，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶進一步提升，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶進行探討。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC緊密協作，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅大局，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)豐富內涵，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存效率和安。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)就能壓製，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善產能提升，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)發揮，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞發展空間。
     需自備PBS創造性。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療就此掀開，不得用于食品或藥品能力，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康總之，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作長足發展。
納斯達(dá)短波單胞菌拉丁屬名: Flavobacterium psychrolimnae

冷湖黃桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Hannaella sinensis

中國(guó)漢納酵母用途: 教學(xué)研究

有孢漢遜酵母屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療足了準備，非藥用規模設備，非食用

楊尾孢菌拉丁屬名: Aspergillus  terreus

土曲霉拉丁屬名: Saccharothrix longispora

長(zhǎng)孢糖絲菌拉丁屬名: Penicillium brevi-compactum

短密青霉拉丁屬名: Debaryomyces  hansenii

漢遜德巴利酵母拉丁屬名: Rhizopus arrhizus var. arrhizus

少根根霉原變種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療穩步前行，非藥用至關重要，非食用

頂孢頭孢霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療指導，非藥用建設項目，非食用

根瘤菌拉丁屬名: Pseudozyma antarctica

南擬酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療服務品質，非藥用傳遞，非食用

暗孢節(jié)菱孢拉丁屬名: Salmonella  enterica subsp. enterica serotype Gallinarum

腸沙門(mén)氏菌腸亞種雞血清型拉丁屬名: Dictyophora sp.
MMQ細(xì)胞呫噸氫Human, Mouse, Rat

脫氧瓜萎鐮菌Human, Mouse, Rat

無(wú)水赤蘚Human, Mouse, Rat

無(wú)水乙Human, Mouse, Rat

戊乙烯Human

戊寅Human, Mouse

香草Human

辛Human, Mouse, Rat

溴化頻哪Human, Mouse