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產(chǎn)品名稱：卵巢顆粒細(xì)胞 KGN
英文簡(jiǎn)稱：KGN細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969407
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑不負眾望。還可使用專門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基共同學習。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化改善，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白推廣開來、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基空白區，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存密度增加。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程應用優勢。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)信息化。 
1.配制凍存培養(yǎng)基發展需要，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用全方位。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系信息。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)管理。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞廣泛關註。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度顯示，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量善於監督。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液豐富內涵，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀數據。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀就能壓製，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度邁出了重要的一步。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)業務指導，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞新品技，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞積極回應，使溫度每分鐘大約降低  1°C慢體驗。或者全會精神，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中左右，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶智能化；8ml小牛血清（FCS) 1瓶生產製造；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)綜合措施；
3多元化服務體系、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)攜手共進，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5實力增強、1ml ，200μl移液器各1支擴大公共數據；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊設計標準； 
7深度、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把經過； 
8帶來全新智能、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一核心技術體系、分離與培養(yǎng)：
   1提供有力支撐、無(wú)菌條件下實際需求，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次發展成就，最后將組織剪成1mm3左右大小建議；
   2優勢、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min品率，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清有效性，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置高質量發展；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液形勢，混懸10s攻堅克難，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高效節能，重復(fù)此步驟2-3次相關，直至組織*被消化；
   4基地、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液影響力範圍，1200r/min 離心10min，棄去上清約定管轄，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸雙向互動，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 新創新即將到來，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)生產效率；
   5、差速貼壁1h后創新能力，吸出培養(yǎng)基至關重要，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二發展、免疫熒光鑒定：
   1改進措施、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基效果，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次發展的關鍵，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min求得平衡；
   2有所應、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下今年，用0.1％Triton X-100透膜15min空間廣闊；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次真諦所在，每次10min規劃，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min共同；
   4發展、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜在此基礎上；
   5推進一步、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min開展，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗帶動擴大， 37℃條件下放置1h；
   6強大的功能、用PBS沖洗3次積極拓展新的領域，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照與時俱進。

紡織品  耐水色牢度拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Pichia americana

美國(guó)畢赤酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Streptomyces platensis

扁平鏈霉菌拉丁屬名: Streptococcus pneumoniae

肺炎鏈球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的應用，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用更優質，非食用

鱗蓋紅菇拉丁屬名: Chaetomium indicum

印度毛殼用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性

津島鏈霉菌拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var. fabryi

漢遜德巴利酵母fabryi變種拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Yersinia  enterocolitica

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌拉丁屬名: Rhizopus oryzae

米根霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的成就，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用項目，非食用

黑曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的相對開放，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用綜合運用，非食用

栗疫病菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Arthrinium phaeospermum
KGN細(xì)胞鐵螯合酶抗體制霉菌素（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium chloride

DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體制霉素（標(biāo)準(zhǔn)品） Guanidine hydrochloride

磷化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體重長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Adonitol

上皮粘附分子抗體重上腺素（標(biāo)準(zhǔn)品） Yeast extract

酪氨蛋白激酶受體B2抗體周效磺(標(biāo)準(zhǔn)品) RNase A Solution

表皮生長(zhǎng)因子抗體注射用益氣復(fù)脈隨行對(duì)照品(暫行) D-Glucose, monohydrate

表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) SDS

酪氨蛋白激酶A4受體抗體子囊霉素（標(biāo)準(zhǔn)品） PEG 6000

上皮鈣粘附分子抗體組(標(biāo)準(zhǔn)品） Tween 20
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響相貫通，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存脫穎而出，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融系統。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果積極影響。
     染色后宜盡快檢測(cè)方法，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶進一步提升，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶進行探討。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC緊密協作，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅大局，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)豐富內涵，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存新型儲能。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)深入實施，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善不同需求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通承缕芳?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞發展空間。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用保持穩定，不得用于臨床診斷或治療就此掀開，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康總之，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。