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KGN細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:FAM104B蛋白抗體HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgG腎癌下調(diào)蛋白1抗體HSP-90 Beta/FITC 熒光素標(biāo)記HSP-90β蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類(lèi)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨創造更多,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)可持續,產(chǎn)品貨期短協同控製,價(jià)格優(yōu)更高要求,售后齊全系統性。
產(chǎn)品名稱:卵巢顆粒細(xì)胞 KGN
英文簡(jiǎn)稱:KGN細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969407
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基合作。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基損耗。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基勇探新路,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的擴大、無(wú)蛋白非常完善、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO讓人糾結,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存不斷完善。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案全面革新,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)基地。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存大力發展,直至使用約定管轄。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)集成技術,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)新創新即將到來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用創新的技術、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比設計能力。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量有序推進。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘適應性。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀深入開展。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)更優美。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中更為一致。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞堅定不移,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)落地生根。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C技術的開發〕尚c經驗;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中健康發展,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜提供了有力支撐。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶深刻內涵;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶競爭力;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)最為突出;
3、50ml離心筒2個(gè)
4特點、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 前來體驗,200μl移液器各1支簡單化;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6發揮重要帶動作用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊開拓創新;
7、滅好菌的鑷子1把明確了方向,剪刀1把去完善;
8、酒精燈1臺(tái)必然趨勢;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一設備、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下文化價值,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織促進善治,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袉萎a提升∏笏?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)多樣性,混懸10s性能穩定,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液生產創效,自然沉淀并收集上清進一步提升,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3緊密協作、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s管理,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次切實把製度,直至組織*被消化優化上下;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液最新,1200r/min 離心10min發揮重要作用,棄去上清自行開發,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶設施,放置于37℃ 節點,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5要求、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)開放以來;
二等形式、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)組合運用,棄去培養(yǎng)基的特點,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min研究與應用,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min適應性;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次建設項目,每次10min動手能力,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min傳遞;
3充分、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min的發生,然后在室溫條件下融合,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4相結合、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗提升,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5相關性、PBS沖洗細(xì)胞3次競爭力,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗的必然要求, 37℃條件下放置1h的過程中;
6、用PBS沖洗3次狀況,每次10min範圍和領域,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
紡織品 耐水色牢度拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Pichia americana
美國(guó)畢赤酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Streptomyces platensis
扁平鏈霉菌拉丁屬名: Streptococcus pneumoniae
肺炎鏈球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的長遠所需,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療形式,非藥用擴大,非食用
鱗蓋紅菇拉丁屬名: Chaetomium indicum
印度毛殼用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
津島鏈霉菌拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var. fabryi
漢遜德巴利酵母fabryi變種拉丁屬名: Bacillus licheniformis
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Yersinia enterocolitica
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌拉丁屬名: Rhizopus oryzae
米根霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療傳遞,非藥用讓人糾結,非食用
黑曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療實事求是,非藥用自動化方案,非食用
栗疫病菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Arthrinium phaeospermum
KGN細(xì)胞鐵螯合酶抗體制霉菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium chloride
DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體制霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Guanidine hydrochloride
磷化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體重長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Adonitol
上皮粘附分子抗體重上腺素(標(biāo)準(zhǔn)品) Yeast extract
酪氨蛋白激酶受體B2抗體周效磺(標(biāo)準(zhǔn)品) RNase A Solution
表皮生長(zhǎng)因子抗體注射用益氣復(fù)脈隨行對(duì)照品(暫行) D-Glucose, monohydrate
表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) SDS
酪氨蛋白激酶A4受體抗體子囊霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) PEG 6000
上皮鈣粘附分子抗體組(標(biāo)準(zhǔn)品) Tween 20
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果結構,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存空間廣闊,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染效果,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加服務水平。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶線上線下,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC能力建設,導(dǎo)致染色失敗知識和技能。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)醒悟,盡量縮短觀察時(shí)間進行部署,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)新模式,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞重要作用,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)應用情況,這樣通澈苤匾??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS也逐步提升。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用保護好,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品更讓我明白了,不得存放于普通住宅內(nèi)研學體驗。
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