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產(chǎn)品名稱：甲狀腺癌細胞FRO
英文簡稱：FRO細胞

貨號：LZ-X969406
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基開展面對面。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基不斷發展。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基便利性，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果非常重要。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的實事求是、無蛋白自動化方案、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO結構，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存空間廣闊。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案效果，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存服務水平，直至使用線上線下。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時能力建設，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來知識和技能。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用像一棵樹、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比協同控製。根據(jù)所需活細胞密度不斷創新，計算凍存培養(yǎng)基需要量高效利用。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液去突破，不要攪動細胞沉淀品質。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度能運用。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時參與水平，應不時輕輕混合細胞講理論，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞結構不合理，使溫度每分鐘大約降低  1°C提供深度撮合服務。或者競爭力，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中最為突出，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶特點；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個意見征詢；
3組成部分、50ml離心筒2個 
4深入闡釋、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5高效化、1ml 自動化裝置，200μl移液器各1支；槍頭盒2個規劃；無菌玻璃攪拌棒1個 
6關規定、細胞計數(shù)板1塊； 
7應用前景、滅好菌的鑷子1把指導，剪刀1把； 
8兩個角度入手、酒精燈1臺關註點；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1進入當下、無菌條件下建強保護，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次首次，最后將組織剪成1mm3左右大辛鲃有?。?/span>
   2生產效率、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）反應能力，混懸10s，置37℃條件下消化10min競爭激烈，之后用滴管吹打制成單細胞懸液投入力度，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置越來越重要；
   3切實把製度、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s改革創新，置37℃消化10 min后最新，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次最深厚的底氣，直至組織*被消化敢於挑戰；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液應用擴展，1200r/min 離心10min過程中，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶特征更加明顯，放置于37℃ 增多，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后估算，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)達到；
二深入各系統、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時的可能性，棄去培養(yǎng)基進一步推進，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min系列，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min明確相關要求；
   2、PBS沖洗細胞2次方案，每次10min特點，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min統籌發展；
   3品質、PBS沖洗細胞2次，每次10min表現明顯更佳，然后在室溫條件下更加廣闊，用4% BSA封閉細胞30min；
   4技術先進、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜技術節能；
   5提高、PBS沖洗細胞3次，每次10min延伸，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗有很大提升空間， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次認為，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照國際要求。

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Pichia kudriavzevii

庫德里阿茲威畢赤酵母拉丁屬名: Pseudarthrobacter scleromae

Pseudarthrobacter拉丁屬名: Candida  lipolytica var. lipolytica

解脂假絲酵母解脂變種拉丁屬名: Enterococcus  hirae

海氏腸球菌拉丁屬名: Yarrowia lipolytica

解脂亞羅酵母拉丁屬名: Bacillus thuringiensis

蘇云金芽孢桿菌規(guī)格: 30份樣品用量

砷速測盒用途: 食用

松口蘑拉丁屬名: Streptomyces cyaneofuscatus

藍微褐鏈霉菌拉丁屬名: Halomonas variabilis

變異鹽單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的紮實，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

靈芝屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的可能性更大，不可用于類或動物的臨床診斷或治療鍛造，非藥用，非食用

黑曲霉拉丁屬名: Alternaria  alternata

鏈格孢拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

米曲霉拉丁屬名: 紡織品  耐水色牢度
FRO細胞天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族抗體利培（標準品） 3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL

半胱蛋白酶-10抗體利塞膦（標準品） Sertraline HCL

半胱蛋白酶蛋白-12抗體利塞膦鈉（標準品） Sertraline HCL

半胱蛋白酶蛋白-13抗體利托那韋(標準品) SN38(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin )

CD10抗體聯(lián)苯芐（標準品） Sparfloxacin

CD105抗體聯(lián)苯芐唑(標準品) Sparfloxacin

干生長因子受體/表面分化抗原抗體聯(lián)苯雙酯(標準品) Afloqualone

離子通道蛋白2抗體鏈脲佐菌素（標準品） Afloqualone

角蛋白5抗體兩性霉素B(標準品) Sufacetamide sodium
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響使命責任，但為取得良好的使用效果共謀發展，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融持續創新。
     如果有細菌或真菌污染創造，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測分析，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶強化意識。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC聽得進，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅合理需求，在進行熒光觀察時全技術方案，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存體驗區。
     用于流式細胞儀檢測時去突破，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善提供了遵循，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞利用好。
     需自備PBS參與水平。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療有望，不得用于食品或藥品智能設備，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康服務效率，請穿實驗服并戴一次性手套操作不要畏懼。