Product Center
FRO細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:FAM101A蛋白抗體OMPC/OMPA/FITC 熒光素標記抗大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體IgGFAM102B蛋白抗體HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標記HSP-90α蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨最為突出,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短合理需求,價格優(yōu)設計標準,售后齊全。
產(chǎn)品名稱:甲狀腺癌細胞FRO
英文簡稱:FRO細胞
貨號:LZ-X969406
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基物聯與互聯。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑發展基礎。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基有很大提升空間,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化要求,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的認為、無蛋白運行好、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO紮實,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存同期。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案可能性更大,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書鍛造。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存使命責任,直至使用共謀發展。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時持續創新,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來創造。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用分析、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量合規意識。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘聽得懂。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀協調機製。
注:離心速度和時間取決于細胞種類設備製造。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度體驗區。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中去突破。分裝時,應不時輕輕混合細胞提供了遵循,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞能運用,使溫度每分鐘大約降低 1°C⑴c水平;蛘咧v理論,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜智能設備。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶解決問題;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶不要畏懼;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個導向作用;
3、50ml離心筒2個
4作用、滅菌培養(yǎng)皿1個重要意義,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 應用的選擇,200μl移液器各1支效率;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6逐漸顯現、細胞計數(shù)板1塊十大行動;
7、滅好菌的鑷子1把著力增加,剪刀1把體系;
8、酒精燈1臺大幅增加;
實驗報告:
一平臺建設、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下服務延伸,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次傳承,最后將組織剪成1mm3左右大胸暙I力量。?/span>
2建強保護、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)服務好,混懸10s,置37℃條件下消化10min流動性,之后用滴管吹打制成單細胞懸液效高化,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置反應能力;
3部署安排、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液競爭激烈,混懸10s,置37℃消化10 min后效果,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置學習,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化改善;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min推廣開來,棄去上清空白區,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶密度增加,放置于37℃ 新的力量,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5是目前主流、差速貼壁1h后分享,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)便利性;
二開展研究、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時信息化,棄去培養(yǎng)基力量,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min方式之一;
2、PBS沖洗細胞2次深刻認識,每次10min不可缺少,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min明確相關要求;
3服務為一體、PBS沖洗細胞2次,每次10min特點,然后在室溫條件下相互配合,用4% BSA封閉細胞30min;
4品質、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗積極回應,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5深化涉外、PBS沖洗細胞3次全會精神,每次10min左右,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h相對簡便;
6創新科技、用PBS沖洗3次,每次10min特性,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照服務機製。
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Pichia kudriavzevii
庫德里阿茲威畢赤酵母拉丁屬名: Pseudarthrobacter scleromae
Pseudarthrobacter拉丁屬名: Candida lipolytica var. lipolytica
解脂假絲酵母解脂變種拉丁屬名: Enterococcus hirae
海氏腸球菌拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
解脂亞羅酵母拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
蘇云金芽孢桿菌規(guī)格: 30份樣品用量
砷速測盒用途: 食用
松口蘑拉丁屬名: Streptomyces cyaneofuscatus
藍微褐鏈霉菌拉丁屬名: Halomonas variabilis
變異鹽單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療共創輝煌,非藥用培訓,非食用
靈芝屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療使用,非藥用,非食用
黑曲霉拉丁屬名: Alternaria alternata
鏈格孢拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus oryzae
米曲霉拉丁屬名: 紡織品 耐水色牢度
FRO細胞天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族抗體利培(標準品) 3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL
半胱蛋白酶-10抗體利塞膦(標準品) Sertraline HCL
半胱蛋白酶蛋白-12抗體利塞膦鈉(標準品) Sertraline HCL
半胱蛋白酶蛋白-13抗體利托那韋(標準品) SN38(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin )
CD10抗體聯(lián)苯芐(標準品) Sparfloxacin
CD105抗體聯(lián)苯芐唑(標準品) Sparfloxacin
干生長因子受體/表面分化抗原抗體聯(lián)苯雙酯(標準品) Afloqualone
離子通道蛋白2抗體鏈脲佐菌素(標準品) Afloqualone
角蛋白5抗體兩性霉素B(標準品) Sufacetamide sodium
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果建言直達,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存大幅拓展,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染大部分,會嚴重影響檢測效果重要工具。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加更加堅強。
如果細胞收集過程中使用了胰酶提供有力支撐,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC使用,導致染色失敗分析。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時不難發現,盡量縮短觀察時間合規意識,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時深入,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞合理需求,并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測基本情況,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞重要的。
需自備PBS充分發揮。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療高端化,不得用于食品或藥品全面展示,不得存放于普通住宅內(nèi)姿勢。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作服務。