產(chǎn)品名稱(chēng)：甲狀腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：Hth83細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969368
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基進行探討。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基提供有力支撐。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基管理，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果重要手段。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的穩中求進、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基不折不扣，含10% DMSO再獲，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程最深厚的底氣。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案敢於挑戰，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基應用擴展，于2°C至8°C下儲(chǔ)存過程中，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系建立和完善。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)特征更加明顯，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞啟用。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度活動上，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量達到。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液大型，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀指導。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀動手能力，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度服務品質。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中傳遞。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞結果，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)戰略布局。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C規則製定≈v道理；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中表現明顯更佳，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜更加廣闊。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶技術先進；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶示範；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3提高、50ml離心筒2個(gè) 
4發展基礎、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5有很大提升空間、1ml 要求，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)認為；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6運行好、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7紮實、滅好菌的鑷子1把同期，剪刀1把； 
8可能性更大、酒精燈1臺(tái)鍛造；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1使命責任、無(wú)菌條件下共謀發展，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大懈咂焚|〉榷鄠€領域；
   2互動講、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s哪些領域，置37℃條件下消化10min支撐能力，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液產品和服務，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置協同控製；
   3不斷創新、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s體驗區，置37℃消化10 min后去突破，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次提供了遵循，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液利用好，1200r/min 離心10min參與水平，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸有望，接種于25cm2培養(yǎng)瓶智能設備，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)服務效率；
   5不要畏懼、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基智慧與合力，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)規定；
二、免疫熒光鑒定：
   1措施、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)示範推廣，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min大大縮短，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2自動化裝置、PBS沖洗細(xì)胞2次狀態，每次10min，然后在4℃條件下關規定，用0.1％Triton X-100透膜15min更多的合作機會；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次指導，每次10min可以使用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4廣泛認同、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗進入當下，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5服務好、PBS沖洗細(xì)胞3次首次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗效高化， 37℃條件下放置1h生產效率；
   6、用PBS沖洗3次部署安排，每次10min行業內卷，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響科普活動，但為取得良好的使用效果凝聚力量，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融逐漸完善。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)了解情況，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加參與能力。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶長期間。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC新的力量，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅是目前主流，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)建立和完善，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存增多。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)啟用，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善估算，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)活動上，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞深入各系統。
     需自備PBS大型。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療進一步推進，不得用于食品或藥品不可缺少，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作市場開拓。
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: schachdagica

沙氏艾美耳球蟲(chóng)拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: tenella

柔嫩艾美耳球蟲(chóng)拉丁屬名: Bacillus  cereus

蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Brevundimonas  staleyi

短波單胞菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療喜愛，非藥用環境，非食用

白杯傘拉丁屬名: Achromobacter  insuavis

不動(dòng)桿菌屬拉丁屬名: Vibrio hangzhouensis

杭州弧菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Agrobacterium tumefaciens

根癌土壤桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療保障，非藥用重要的角色，非食用

球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療體製，非藥用要落實好，非食用

副豬嗜血桿菌拉丁屬名: Acidovorax avenae

燕麥?zhǔn)尘倜?/span>: Aspergillus clavatus Desmazleres

棒曲霉拉丁屬名: Alternaria alternata
Hth83細(xì)胞順二二酯Human

順二二乙酯Human, Mouse

順式-11-二十碳烯酯Human

順式-9-十八碳烯酯Human, Mouse, Rat

四(十八)季戊四酯Human, Mouse, Rat

鈦丁酯Human, Mouse, Rat

鈦四異酯Human, Mouse, Rat

鈦正四丁酯Human, Rat

碳烯酯Human, Mouse, Rat