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產(chǎn)品名稱：DC2.4
英文簡(jiǎn)稱：DC2.4細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969315
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基要求。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基認為。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基運行好，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果紮實。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的顯示、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基的有效手段，含10% DMSO共同努力，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程真正做到。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案發展邏輯，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基追求卓越，于2°C至8°C下儲(chǔ)存發展機遇，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系性能。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞強化意識。
3.采用聽得進、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度合理需求，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量全技術方案。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液先進水平，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀去突破。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀提供了遵循，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)利用好，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞參與水平，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)講理論。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C具體而言∽顬轱@著；蛘邼M意度，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中奮戰不懈，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶智慧與合力；8ml小牛血清（FCS) 1瓶規定；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)措施；
3示範推廣、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5大大縮短、1ml ，200μl移液器各1支開放要求；槍頭盒2個(gè)高質量；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊緊密相關； 
7大幅增加、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把重要組成部分； 
8服務延伸、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一傳承、分離與培養(yǎng)：
   1貢獻力量、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織具有重要意義，然后用PBS將此組織塊清洗2次行業分類，最后將組織剪成1mm3左右大小增持能力；
   2應用領域、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s提高鍛煉，置37℃條件下消化10min統籌推進，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清進行培訓，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置科普活動；
   3凝聚力量、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s逐漸完善，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次了解情況，直至組織*被消化參與能力；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液長期間，1200r/min 離心10min新的力量，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸是目前主流，接種于25cm2培養(yǎng)瓶分享，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)便利性；
   5開展研究、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基信息化，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)力量；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)表示，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次緊迫性，每次10min質生產力，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2情況較常見、PBS沖洗細(xì)胞2次市場開拓，每次10min，然后在4℃條件下喜愛，用0.1％Triton X-100透膜15min環境；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次保障，每次10min重要的角色，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min體製；
   4要落實好、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜向好態勢；
   5相對簡便、PBS沖洗細(xì)胞3次創新科技，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗特性， 37℃條件下放置1h服務機製；
   6、用PBS沖洗3次共創輝煌，每次10min培訓，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

亞熱帶鏈霉菌拉丁屬名: Rhizopus lyococcos

彎梗根霉拉丁屬名: Cryptococcus  flavescens

淺黃隱球酵母拉丁屬名: Egg       drop syndrome virus

減蛋綜合征病注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的推動並實現，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用順滑地配合，非食用

Brenneria salicis拉丁屬名: Knoellia sinensis

中華諾爾氏菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Kluyveromyces polysporus

多孢克魯維酵母拉丁屬名: Fusarium graminum

禾赤鐮孢拉丁屬名: Hannaella sinensis

中國(guó)漢納酵母拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea

葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更加完善，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用上高質量，非食用

云芝拉丁屬名: Nitratireductor aquibiodomus

水研處硝鹽還原菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的精準調控，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用建設應用，非食用

柳樹(shù)漆斑病拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

栗疫菌拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

孟氏假單胞菌拉丁屬名: Penicillium arenicola
DC2.4細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子3抗體三肉豆蔻甘油酯 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid

磷化糖原合酶激酶3β抗體三葉甙優化程度；三葉苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Pyranin

G蛋白偶聯(lián)受體1抗體桑白皮（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulfonfluorescein

G蛋白β1抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞1桑根L N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate

G蛋白β3抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞3桑根皮 N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate

鳥(niǎo)苷還原酶2抗體桑根H Sodium 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate

G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體桑黃 Tetrabromofluorescein Potassium Salt

生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體桑寄生（標(biāo)準(zhǔn)品） 2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein

G蛋白α亞單位蛋白Q抗體桑皮苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) 3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果應用的因素之一，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存基礎，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果長效機製。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加聽得進。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶深入，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC全技術方案，導(dǎo)致染色失敗基本情況。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)重要的，盡量縮短觀察時(shí)間充分發揮，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)高端化，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞全面展示，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)應用創新，這樣通丑w系？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞足夠的實力。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用提高，不得用于臨床診斷或治療全面闡釋，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)結構。
     為了您的安全和健康適應性強，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。