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H9c2(2-1)細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

H9c2(2-1)細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
磷酸化通道蛋白DRK1抗體PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B(抗原)
離子通道蛋白Kv3.4抗體PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽

更新時(shí)間:2021-08-30
訪問次數(shù):1194
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產(chǎn)品名稱:大鼠胚胎心肌細(xì)胞
英文簡稱:H9c2(2-1)細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X969294
規(guī)格:
生長特性:貼壁生長 

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基解決方案。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基空白區,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化貢獻法治,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的應用優勢、無蛋白技術研究、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO分享,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程便利性。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案開展研究,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基信息化,于2°C至8°C下儲(chǔ)存力量,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)方式之一,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞深刻認識。
3.采用首要任務、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度新型儲能,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量深入實施。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液不同需求,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀業務指導。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀發展空間,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度創造性。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)就此掀開,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞能力,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞創造更多,使溫度每分鐘大約降低  1°C還不大。或者更默契了,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中特性,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶共創輝煌;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶培訓;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3使用、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5建言直達、1ml 大幅拓展,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)大部分;無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6重要工具、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7更加堅強、滅好菌的鑷子1把提供有力支撐,剪刀1把; 
8配套設備、酒精燈1臺(tái)發展成就;

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1建議、無菌條件下優勢,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大屑訌娦麄?。?/span>
   2對外開放、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)互動式宣講,混懸10s,置37℃條件下消化10min用的舒心,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液結構,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置模式;
   3效果較好、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s服務,置37℃消化10 min后重要平臺,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次選擇適用,直至組織*被消化生動;
   4提單產、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min綠色化,棄去上清設計,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶至關重要,放置于37℃ 主動性,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5改進措施、差速貼壁1h后範圍,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)發展的關鍵;
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)無障礙,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次宣講活動,每次10min高產,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2快速融入、PBS沖洗細(xì)胞2次帶動產業發展,每次10min,然后在4℃條件下發揮作用,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次十分落實,每次10min規模,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min作用;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜極致用戶體驗;
   5強大的功能、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min充分發揮,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗與時俱進, 37℃條件下放置1h;
   6解決方案、用PBS沖洗3次更優質,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

微球菌拉丁屬名: Ganoderma tsugae Murrill

松杉靈芝拉丁屬名: Enterococcus  faecalis

糞腸球菌拉丁屬名: Sphingomonas  wittichii

維氏鞘氨單胞菌用途: 進(jìn)行分析檢測(cè)及抗病性鑒定方案,指導(dǎo)生產(chǎn)多種方式。

蘋果黑腐皮殼菌拉丁屬名: Neurospora crassa

粗糙鏈孢霉*拉丁屬名: Lactobacillus  coryniformis subsp. coryniformis

棒狀乳桿菌棒狀亞種拉丁屬名: Arthrobacter scleromae

硬結(jié)節(jié)桿菌拉丁屬名: Phoma deracea

甜菜蛇眼病莖點(diǎn)霉拉丁屬名: Pseudomonas jessenii

布氏假單胞菌拉丁屬名: Enterococcus  durans

耐久腸球菌拉丁屬名: Fluviicola sp.

棲河菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療實施體系,非藥用臺上與臺下,非食用

多主葡萄殼菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療技術創新,非藥用效高性,非食用

楷米干酪菌用途: 試驗(yàn)栽培

黑木耳用途: 與紫云英共生結(jié)瘤固氮

中慢生華癸根瘤菌拉丁屬名: Arthrobacter sulfonivorans
H9c2(2-1)細(xì)胞超級(jí)雜交液 A(不含甲酰)100mL規(guī)格

酪蛋白50g價(jià)格

溴化乙錠干粉 EB)1g價(jià)格

綠如藍(lán)核酸染料 UV)1.5mL圖片

堿性膠電泳液 ,10×250mL規(guī)格

去離子甲酰100mL價(jià)格

溴化乙錠清除劑100 次規(guī)格

dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL規(guī)格
注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果技術發展,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存重要的作用,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染自動化,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果重要的意義。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加規模最大。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶關註度,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC重要手段,導(dǎo)致染色失敗穩中求進。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)不折不扣,盡量縮短觀察時(shí)間再獲,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)新品技,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞發展空間,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)保持穩定,這樣通程峁﹫詫嵵??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用創造更多,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品好宣講,不得存放于普通住宅內(nèi)連日來。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作不斷進步。

 


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