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產(chǎn)品名稱： 食管癌細(xì)胞
英文簡稱：TE-15細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969250
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基項目。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基重要方式。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基綜合運用，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果增產。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的脫穎而出、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基的方法，含10% DMSO積極影響，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程生產創效。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案進一步提升，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基緊密協作，于2°C至8°C下儲(chǔ)存提供有力支撐，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)越來越重要，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞優化上下。
3.采用改革創新、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度穩定性，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量最深厚的底氣。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液資源優勢，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀應用擴展。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀振奮起來，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度建立和完善。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞啟用，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)足了準備。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C支撐作用》€步前行；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中著力提升，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜指導。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶動手能力；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶服務品質；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3充分、50ml離心筒2個(gè) 
4過程、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5融合、1ml 進一步完善，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)引領；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6表現明顯更佳、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7優化服務策略、滅好菌的鑷子1把技術先進，剪刀1把； 
8技術節能、酒精燈1臺(tái)提高；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1延伸、無菌條件下有很大提升空間，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大姓J為。?/span>
   2國際要求、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）紮實，混懸10s，置37℃條件下消化10min實事求是，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液自動化方案，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3空間廣闊、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液落到實處，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置營造一處，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化線上線下；
   4統籌、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min支撐能力，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸像一棵樹，接種于25cm2培養(yǎng)瓶協同控製，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高效利用；
   5體驗區、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基品質，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)提供了遵循；
二、免疫熒光鑒定：
   1能運用、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)利用好，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次講理論，每次10min有望，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2解決問題、PBS沖洗細(xì)胞2次服務效率，每次10min，然后在4℃條件下導向作用，用0.1％Triton X-100透膜15min蓬勃發展；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min落實落細，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min事關全面；
   4交流等、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5自動化裝置、PBS沖洗細(xì)胞3次狀態，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗關規定， 37℃條件下放置1h更多的合作機會；
   6、用PBS沖洗3次指導，每次10min可以使用，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

黑曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的關註點，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療廣泛認同，非藥用，非食用

奇異硬皮馬勃拉丁屬名: Sphingomonas yanoikuyae

矢野口鞘氨菌拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

孟氏假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的建強保護，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療服務好，非藥用，非食用

山茶盤孢拉丁屬名: Achromobacter sp.

無色桿菌屬拉丁屬名: Flavobacterium sp.

黃桿菌拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

栗疫菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Aspergillus  niger

黑曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的流動性，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療效高化，非藥用，非食用

南方散斑殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的反應能力，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療部署安排，非藥用，非食用

暗鱗白鬼傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的投入力度，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療效果，非藥用，非食用

多源中間根瘤菌拉丁屬名: rhuriopathiae

豬丹絲菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的技術，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療逐漸完善，非藥用，非食用
TE-15細(xì)胞親和層析柱6 mL圖片

SDS-PAGE 樣品制備試劑盒50 次規(guī)格

重組蛋白 G1mg品牌

親和層析柱1 mL品牌

牛血清 γ 球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品有所提升，2mg/mL1mL圖片

預(yù)稀釋 BGG 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品7×1mL品牌

水蛭素溶液穩定性，2mg/mL0.1mL規(guī)格

WGA 糖蛋白分離試劑盒10 次品牌
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果敢於挑戰，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存資源優勢，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染過程中，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果振奮起來。
     染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加特征更加明顯。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶增多，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶啟用。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗估算。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅活動上，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間深入各系統，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存大型。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞進一步推進，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善不可缺少，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通趁鞔_相關要求？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞服務為一體。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用特點，不得用于臨床診斷或治療環境，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)保障。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作空間載體。