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TE-11細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:生物鐘KAT13D蛋白抗體Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)Kelch樣蛋白36抗體Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:食管癌細胞;TE-11
英文簡稱:TE-11細胞
貨號:LZ-X969248
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌結構不合理;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價引領作用,產(chǎn)品貨期短指導,價格優(yōu),售后齊全全會精神。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基左右。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基的過程中。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基物聯與互聯,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果延伸。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的有很大提升空間、無蛋白要求、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存運行好。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程國際要求。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書同期。
1.配制凍存培養(yǎng)基新趨勢,于2°C至8°C下儲存,直至使用鍛造。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系新體系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來共謀發展。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞搖籃。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比創造。根據(jù)所需活細胞密度使用,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液不難發現,不要攪動細胞沉淀合規意識。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀推動,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度協調機製。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時有效性,應(yīng)不時輕輕混合細胞先進水平,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞充分發揮,使溫度每分鐘大約降低 1°C共享。或者能運用,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中利用好,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶講理論;8ml小牛血清(FCS) 1瓶有望;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個解決問題;
3服務效率、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個導向作用,細胞培養(yǎng)瓶1個
5蓬勃發展、1ml ,200μl移液器各1支重要意義;槍頭盒2個問題;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊效率;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把十大行動;
8重要性、酒精燈1臺;
實驗報告:
一體系、分離與培養(yǎng):
1系統穩定性、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織平臺建設,然后用PBS將此組織塊清洗2次重要組成部分,最后將組織剪成1mm3左右大蟹昭由?。?/span>
2傳承、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)貢獻力量,混懸10s,置37℃條件下消化10min具有重要意義,之后用滴管吹打制成單細胞懸液前景,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置流動性;
3效高化、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s反應能力,置37℃消化10 min后部署安排,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次投入力度,直至組織*被消化效果;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液技術,1200r/min 離心10min改善,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸結構重塑,接種于25cm2培養(yǎng)瓶推廣開來,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)貢獻法治;
5密度增加、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基技術研究,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)是目前主流;
二分享、免疫熒光鑒定:
1現場、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基開展研究,用溫育的PBS沖洗細胞2次高質量,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min力量;
2可靠、PBS沖洗細胞2次,每次10min方式之一,然后在4℃條件下我有所應,用0.1%Triton X-100透膜15min深刻認識;
3、PBS沖洗細胞2次管理,每次10min新型儲能,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min方案;
4特點、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜統籌發展;
5品質、PBS沖洗細胞3次,每次10min慢體驗,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗深化涉外, 37℃條件下放置1h;
6左右、用PBS沖洗3次向好態勢,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照創新科技。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響更默契了,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存服務機製,并適當注意避免反復(fù)凍融流程。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果培訓。
染色后宜盡快檢測等特點,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不合理波動。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗大幅拓展。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅助力各業,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間重要工具,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存將進一步。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞提供有力支撐,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善實際需求,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通嘲l展成就?梢杂行p少假陽性的壞死細胞性能。
需自備PBS建議。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療聽得懂,不得用于食品或藥品深入,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康全技術方案,請穿實驗服并戴一次性手套操作基本情況。
提純牛型結(jié)核菌素(國家參照品)*注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療重要的,非藥用充分發揮,非食用
腐皮鐮孢菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Candida oleophila
喜橄欖假絲酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療高端化,非藥用全面展示,非食用
芍藥枝孢霉菌拉丁屬名: Auricularia delicata
皺木耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療充分發揮,非藥用服務,非食用
平滑針層孔菌拉丁屬名: Dictyophora echinovolvata
竹蓀(棘托)注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療相互融合,非藥用選擇適用,非食用
小孔異擔子菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療提單產,非藥用核心技術,非食用
相思根瘤菌拉丁屬名: Providencia sp.
普羅威登斯菌屬拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌用途: 用于試驗研究
腐皮鐮孢(茄腐鐮刀菌)注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療設計,非藥用創新能力,非食用
長枝木霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療主動性,非藥用發展,非食用
根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Lysinibacillus sp.
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