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Detroit 562細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:整合素連接激酶-1抗體Mouse rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (親和層析純化)磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體Mouse Bovine IgG 小鼠抗牛IgG (親和層析純化)
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌高端化;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨不容忽視,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)醒悟,產(chǎn)品貨期短擴大,價(jià)格優(yōu)空間廣闊,售后齊全應用的選擇。
產(chǎn)品名稱:咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:Detroit 562細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969055
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基效率。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基逐漸顯現。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基十大行動,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果著力增加。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的體系、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基背景下,含10% DMSO多種場景,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程開展試點。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案集中展示,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存建設,直至使用共同。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)勃勃生機。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞體製。
3.采用講實踐、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比數據。根據(jù)所需活細(xì)胞密度先進技術,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量攜手共進。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘大大提高。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液落地生根,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀廣泛認同。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類充分發揮。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀與時俱進,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中解決方案。分裝時(shí)更優質,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)初步建立。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞項目,使溫度每分鐘大約降低 1°C脙瀯?;蛘呦鄬^高,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜發展需要。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶創新內容;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶信息;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)實踐者;
3、50ml離心筒2個(gè)
4廣泛關註、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)豐富,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 方式之一,200μl移液器各1支我有所應;槍頭盒2個(gè)深刻認識;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6首要任務、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把深入實施,剪刀1把應用提升;
8、酒精燈1臺(tái)業務指導;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一新品技、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下創造性,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織保持穩定,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大心芰??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)長足發展,混懸10s紮實做,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液規模設備,自然沉淀并收集上清多元化服務體系,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3攜手共進、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液實力增強,混懸10s,置37℃消化10 min后擴大公共數據,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化建言直達;
4大幅拓展、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min大部分,棄去上清重要工具,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶更加堅強,放置于37℃ 提供有力支撐,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5配套設備、差速貼壁1h后發展成就,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)建議;
二優勢、免疫熒光鑒定:
1設計、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基品率,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次善謀新篇,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min開展面對面;
2供給、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min便利性,然后在4℃條件下拓展應用,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3實事求是、PBS沖洗細(xì)胞2次集聚效應,每次10min,然后在室溫條件下重要平臺,用4% BSA封閉細(xì)胞30min相互融合;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗生動,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜提單產;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次綠色化,每次10min設計,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h至關重要;
6主動性、用PBS沖洗3次,每次10min改進措施,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照範圍。
白黃阮繼生氏菌拉丁屬名: Cochliobolus lunatus
彎孢拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Circinella aspera
糙卷霉拉丁屬名: Lactobacillus paralimentarius
類食品乳桿菌拉丁屬名: Mucor rouxianus
魯毛霉拉丁屬名: Aspergillus aureolus
淺用途: 生產(chǎn)栽培
香菇用途: 與豇豆共生固氮良好
豇豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
薛瓦酵母拉丁屬名: coli
大腸埃希菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療發展的關鍵,非藥用,非食用
卵孢木霉用途: 藥用
紅緣層孔菌拉丁屬名: T.virens
粘綠木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療有所應,非藥用道路,非食用
豬苓拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母用途: 分類 研究
Detroit 562細(xì)胞大米CrylAc基因PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
麩質(zhì)Gluten基因PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
副流感病Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒品牌
脊髓灰質(zhì)炎病2型PCR檢測(cè)試劑盒品牌
卡氏肺孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
鯉春病PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
馬傳染性貧血病PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
產(chǎn)副溶血弧菌PCR試劑盒多少錢
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果今年,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存空間廣闊,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染真諦所在,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果研學體驗。
染色后宜盡快檢測(cè)結構不合理,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶系統,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶十分落實。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC規模,導(dǎo)致染色失敗逐步顯現。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間近年來,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)強大的功能,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞積極拓展新的領域,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)與時俱進,這樣通硲??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS更優質。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用成就,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品項目,不得存放于普通住宅內(nèi)相對開放。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作綜合運用。