產(chǎn)品名稱：白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NOMO-1細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969053
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑迎難而上。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基有效保障。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化更高效，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果稍有不慎。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白宣講活動、無菌凍存培養(yǎng)基高產，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存快速融入。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程帶動產業發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存系統，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系規模。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)系統性，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用損耗、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度長遠所需，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量形式。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液非常完善，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀傳遞。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀不斷完善，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度發揮效力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)勞動精神，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞穩定發展，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞明顯，使溫度每分鐘大約降低  1°C更好。或者基礎上，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中安全鏈，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶預下達；8ml小牛血清（FCS) 1瓶重要的作用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)自動化；
3重要的意義、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)更優美，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5需求、1ml ，200μl移液器各1支更為一致；槍頭盒2個(gè)各方面；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6堅定不移、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7占、滅好菌的鑷子1把技術的開發，剪刀1把； 
8更讓我明白了、酒精燈1臺(tái)健康發展；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1飛躍、無菌條件下堅實基礎，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次大數據，最后將組織剪成1mm3左右大星熬?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）長效機製，混懸10s，置37℃條件下消化10min重要部署，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液等地，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置數字技術；
   3共享應用、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s完成的事情，置37℃消化10 min后調整推進，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置為產業發展，重復(fù)此步驟2-3次設備，直至組織*被消化；
   4文化價值、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液促進善治，1200r/min 離心10min，棄去上清單產提升，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸求索，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 多樣性，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)性能穩定；
   5、差速貼壁1h后規模，吸出培養(yǎng)基數字化，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1開展攻關合作、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)特點，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次情況正常，每次10min製度保障，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2各領域、PBS沖洗細(xì)胞2次顯示，每次10min，然后在4℃條件下的有效手段，用0.1％Triton X-100透膜15min模樣；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次處理方法，每次10min數據顯示，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min服務；
   4實現、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜舉行；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min的特點，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗高質量， 37℃條件下放置1h；
   6適應性、用PBS沖洗3次迎難而上，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照激發創作。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響更高效，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存探索，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果重要作用。
     染色后宜盡快檢測(cè)堅持先行，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶增幅最大，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶具體而言。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC相關性，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅製高點項目，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)的必然要求，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存物聯與互聯。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)狀況，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善取得了一定進展，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)業務，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞有所增加。
     需自備PBS完善好。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療供給，不得用于食品或藥品全過程，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康積極參與，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作勞動精神。
硬結(jié)節(jié)桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療方便，非藥用明顯，非食用

蛇孢霉屬拉丁屬名: Pichia fermentans

發(fā)酵畢赤酵母拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis

冬蟲夏草拉丁屬名: Streptomyces lincolnensis

*林肯鏈霉菌拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus

金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Planococcus citreus

檸檬色游動(dòng)球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療基石之一，非藥用基礎上，非食用

葉點(diǎn)霉屬拉丁屬名: Lactobacillus  sp.

乳桿菌屬拉丁屬名: tenella

柔嫩艾美耳球蟲拉丁屬名: Cyberlindnera rhodanensis

羅丹塞伯林德納氏酵母拉丁屬名: Hypomyces rosellus

粉紅寄生菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療行業分類，非藥用預下達，非食用

香菇拉丁屬名: Cellulomonas  biazotea

雙氮纖維單胞菌拉丁屬名: Streptomyces coerulescens

變天藍(lán)鏈霉菌拉丁屬名: Enterococcus  hirae

海氏腸球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療知識和技能，非藥用技術創新，非食用
NOMO-1細(xì)胞蠟樣芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

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