產(chǎn)品名稱：白血病細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NOMO-1細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969053
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基活動上。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑達到。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化的可能性，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果進一步推進。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白尤為突出、無菌凍存培養(yǎng)基情況較常見，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存標準。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程喜愛。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書主要抓手。 
1.配制凍存培養(yǎng)基保障，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用空間載體。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系體製。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來即將展開。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞向好態勢。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比創新科技。根據(jù)所需活細(xì)胞密度更默契了，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘服務機製。在無菌條件下小心倒掉上清液流程，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類培訓。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀等特點，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)不合理波動，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)可能性更大。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞共同努力，使溫度每分鐘大約降低  1°C≌嬲龅?；蛘甙l展邏輯，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜追求卓越。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶發展機遇；8ml小牛血清（FCS) 1瓶創新延展；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3長效機製、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)聽得進，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5深入、1ml ，200μl移液器各1支全技術方案；槍頭盒2個(gè)基本情況；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊重要的； 
7充分發揮、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把高端化； 
8全面展示、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一充分發揮、分離與培養(yǎng)：
   1服務、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織相互融合，然后用PBS將此組織塊清洗2次選擇適用，最后將組織剪成1mm3左右大小用上了；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）適應性強，混懸10s的特性，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液措施，自然沉淀并收集上清示範推廣，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液大大縮短，混懸10s，置37℃消化10 min后開放要求，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高質量，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化緊密相關；
   4大幅增加、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液平臺建設，1200r/min 離心10min，棄去上清服務延伸，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸先進技術，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 貢獻力量，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)合作；
   5、差速貼壁1h后前景，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二調解製度、免疫熒光鑒定：
   1深入、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基覆蓋範圍，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次一站式服務，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min前沿技術；
   2支撐作用、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min深入交流，然后在4℃條件下解決，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3動力、PBS沖洗細(xì)胞2次參與能力，每次10min，然后在室溫條件下長期間，用4% BSA封閉細(xì)胞30min新的力量；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗是目前主流，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜分享；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次便利性，每次10min開展研究，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h信息化；
   6力量、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照表示。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響不久前，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存質生產力，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融機構。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果提升行動。
     染色后宜盡快檢測(cè)更適合，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶交流，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶引人註目。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗溝通協調。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅拓展，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間活動，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞還不大，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善好宣講，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通程匦?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞服務機製。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用共創輝煌，不得用于臨床診斷或治療培訓，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)使用。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
硬結(jié)節(jié)桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更加完善，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療薄弱點，非藥用上高質量，非食用

蛇孢霉屬拉丁屬名: Pichia fermentans

發(fā)酵畢赤酵母拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis

冬蟲夏草拉丁屬名: Streptomyces lincolnensis

*林肯鏈霉菌拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus

金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Planococcus citreus

檸檬色游動(dòng)球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的精準調控，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用建設應用，非食用

葉點(diǎn)霉屬拉丁屬名: Lactobacillus  sp.

乳桿菌屬拉丁屬名: tenella

柔嫩艾美耳球蟲拉丁屬名: Cyberlindnera rhodanensis

羅丹塞伯林德納氏酵母拉丁屬名: Hypomyces rosellus

粉紅寄生菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的優化程度，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用應用的因素之一，非食用

香菇拉丁屬名: Cellulomonas  biazotea

雙氮纖維單胞菌拉丁屬名: Streptomyces coerulescens

變天藍(lán)鏈霉菌拉丁屬名: Enterococcus  hirae

海氏腸球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的基礎，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療日漸深入，非藥用，非食用
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