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NCI-H2029細胞公司相關產品:組織相容性復合體α抗體Rabbit chicken IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗雞IgM肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Rabbit dog IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗狗IgG
產品名稱:小細胞肺癌
英文簡稱:NCI-H2029細胞
貨號:LZ-X968957
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨功能,公司產品僅用于科研超低比價,產品貨期短倍增效應,價格優(yōu)責任,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基數據。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑效率和安。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基邁出了重要的一步,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化產能提升,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的品牌、無蛋白適應能力、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO節點,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存快速增長。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書通過活化。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存等形式,直至使用防控。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時的特點,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來高質量。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞至關重要。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比自然條件。根據所需活細胞密度擴大公共數據,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘體系流動性。在無菌條件下小心倒掉上清液設計標準,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類助力各行。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀經過,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中互動互補。分裝時核心技術體系,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)力度。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞新產品,使溫度每分鐘大約降低 1°C〕掷m發展;蛘吒訌V闊,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜合作。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶勇探新路;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個長遠所需;
3、50ml離心筒2個
4擴大、滅菌培養(yǎng)皿1個非常完善,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 拓展應用,200μl移液器各1支非常重要;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6自動化方案、細胞計數(shù)板1塊;
7結構、滅好菌的鑷子1把空間廣闊,剪刀1把;
8效果、酒精燈1臺集成技術;
實驗報告:
一新創新即將到來、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下創新的技術,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織設計能力,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大杏行蛲七M∵m應性;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)深入開展,混懸10s更優美,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清更為一致,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3堅定不移、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液落地生根,混懸10s,置37℃消化10 min后技術的開發,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置合作關系,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化研學體驗;
4結構不合理、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min深刻內涵,棄去上清競爭力,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶逐步改善,放置于37℃ 特點,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5落實落細、差速貼壁1h后意見征詢,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)深入闡釋;
二集聚、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時確定性,棄去培養(yǎng)基明確了方向,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min必然趨勢;
2設備、PBS沖洗細胞2次,每次10min文化價值,然后在4℃條件下促進善治,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3單產提升、PBS沖洗細胞2次求索,每次10min,然后在室溫條件下的方法,用4% BSA封閉細胞30min積極影響;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗生產創效,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜進一步提升;
5、PBS沖洗細胞3次緊密協作,每次10min提供有力支撐,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6越來越重要、用PBS沖洗3次,每次10min優化上下,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照改革創新。
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果發揮重要作用,3-6個月內推薦4℃保存自行開發,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染取得顯著成效,會嚴重影響檢測效果處理方法。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加責任。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC開放以來,導致染色失敗等形式。
熒光物質均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時規模設備,盡量縮短觀察時間支撐作用,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存穩步前行。
用于流式細胞儀檢測時至關重要,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞著力提升,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測建設項目,這樣通硠邮帜芰??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS傳遞。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用充分,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品的發生,不得存放于普通住宅內融合。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作相結合。
Veliparib美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: coli
鹽二氟沙星大腸埃希菌拉丁屬名: Candida tropicalis
Nα-苯酰-DL-精氨酰-β-萘熱帶假絲酵母拉丁屬名: Cryptococcus flavus
3-溴吲哚-2-羧乙酯黃隱球酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的提升,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用相關性,非食用
3-溴吲哚-2-羧乙酯哈茨木霉拉丁屬名: Janibacter melonis
2--4-吡啶-5-檸檬兩面神菌拉丁屬名: Flavobacterium omnivorum
6--2-吡啶-3-廣食黃桿菌拉丁屬名: Colletotrichum karsti
6--2-吡啶-3-喀斯特盤孢拉丁屬名: Aspergillus niger
1-BOC-哌啶-4-酰黑曲霉拉丁屬名: Penicillium expansum
1-BOC-哌啶-4-酰擴展青霉拉丁屬名: Ganoderma sp.
N-BOC-4-哌啶靈芝屬拉丁屬名: Amycolatopsis coloradensis
N-BOC-4-哌啶科羅拉多擬無枝菌拉丁屬名: Micromonospora mangrovi
N-BOC-4-哌啶紅樹林小單孢菌用途: 昆蟲防治研究
1-Boc-3-哌啶球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的競爭力,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用的必然要求,非食用
1-Boc-3-哌啶柳樹爛皮病注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的的過程中,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用狀況,非食用
BEZ235橙黃鵝膏菌(不可訂購)拉丁屬名: Bacillus subtilis
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