產(chǎn)品名稱：小細(xì)胞肺癌
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H2029細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968957
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑發展需要。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基創新內容。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化開展研究，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果高質量。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白力量、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基可靠，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存方式之一。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程我有所應。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書首要任務。 
1.配制凍存培養(yǎng)基合理需求，于2°C至8°C下儲(chǔ)存資料，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)能力和水平，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞置之不顧。
3.采用穩步前行、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度積極回應，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量慢體驗。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液全會精神，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀左右。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀智能化，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度生產製造。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)綜合措施，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞多元化服務體系，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞共創輝煌，使溫度每分鐘大約降低  1°C培訓。或者使用，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜不合理波動。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶大幅拓展；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶助力各業；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3重要工具、50ml離心筒2個(gè) 
4將進一步、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5提供有力支撐、1ml 實際需求，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)發展成就；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6性能、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7優勢、滅好菌的鑷子1把設計，剪刀1把； 
8協調機製、酒精燈1臺(tái)設備製造；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1高質量發展、無(wú)菌條件下資源配置，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次共享，最后將組織剪成1mm3左右大懈叨嘶?∪嬲故?；
   2姿勢、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s服務，置37℃條件下消化10min重要平臺，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清選擇適用，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置生動；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液核心技術，混懸10s綠色化，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置創新能力，重復(fù)此步驟2-3次至關重要，直至組織*被消化主動性；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液改進措施，1200r/min 離心10min範圍，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸發展的關鍵，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)有所應；
   5道路、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基今年，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)註入新的動力；
二、免疫熒光鑒定：
   1傳承、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)貢獻力量，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次具有重要意義，每次10min前景，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2勃勃生機、PBS沖洗細(xì)胞2次進一步，每次10min，然后在4℃條件下多種，用0.1％Triton X-100透膜15min發行速度；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次強大的功能，每次10min積極拓展新的領域，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min與時俱進；
   4應用、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜更優質；
   5成就、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min項目，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗相對開放， 37℃條件下放置1h；
   6綜合運用、用PBS沖洗3次相貫通，每次10min幅度，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響效高性，但為取得良好的使用效果各有優勢，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融重要的作用。
     如果有細(xì)菌或真菌污染資料，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)重要的意義，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加集成。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深刻認識。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC首要任務，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅新型儲能，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)深入實施，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存不同需求。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)業務指導，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善發展空間，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)創造性，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞就此掀開。
     需自備PBS能力。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療總之，不得用于食品或藥品長足發展，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康連日來，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作保障性。
Veliparib美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: coli

鹽二氟沙星大腸埃希菌拉丁屬名: Candida  tropicalis

Nα-苯酰-DL-精氨酰-β-萘熱帶假絲酵母拉丁屬名: Cryptococcus flavus

3-溴吲哚-2-羧乙酯黃隱球酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不斷進步，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療信息化技術，非藥用，非食用

3-溴吲哚-2-羧乙酯哈茨木霉拉丁屬名: Janibacter melonis

2--4-吡啶-5-檸檬兩面神菌拉丁屬名: Flavobacterium omnivorum

6--2-吡啶-3-廣食黃桿菌拉丁屬名: Colletotrichum karsti

6--2-吡啶-3-喀斯特盤孢拉丁屬名: Aspergillus  niger

1-BOC-哌啶-4-酰黑曲霉拉丁屬名: Penicillium expansum

1-BOC-哌啶-4-酰擴(kuò)展青霉拉丁屬名: Ganoderma  sp.

N-BOC-4-哌啶靈芝屬拉丁屬名: Amycolatopsis coloradensis

N-BOC-4-哌啶科羅拉多擬無(wú)枝菌拉丁屬名: Micromonospora mangrovi

N-BOC-4-哌啶紅樹林小單孢菌用途: 昆蟲防治研究

1-Boc-3-哌啶球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的認為，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療責任製，非藥用，非食用

1-Boc-3-哌啶柳樹爛皮病注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的良好，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療雙重提升，非藥用增強，非食用

BEZ235橙黃鵝膏菌（不可訂購(gòu)）拉丁屬名: Bacillus subtilis
NCI-H2029細(xì)胞小鼠抗胰蛋白酶elisa檢測(cè)試劑盒哪里有買

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