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微生物葡萄糖-1-磷酸(G-1-P)ELISA試劑盒洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒自動化裝置。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體充足,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl表現,浸泡1-2分鐘異常狀況,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干的積極性。洗板5次更多可能性。
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫高效;試劑或樣品配制時(shí)分析,均需充分混勻,并盡量避免起泡重要部署。
1.加樣:分別設(shè)空白孔等地、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔數字技術」蚕響??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl完成的事情,注意不要有氣泡調整推進,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁研究成果,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜穩定,37℃孵育2小時(shí)機製性梗阻。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液廣泛關註。
2.棄去液體改造層面,甩干機製,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜大面積,37℃溫育1小時(shí)發力。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干集成應用,洗板 3次越來越重要的位置,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔迎來新的篇章,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干解決方案。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜共同學習,37℃溫育1小時(shí)交流研討。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次順滑地配合,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl薄弱點,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長模樣,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)處理方法,即可終止)數據顯示。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)服務,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色實現。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)舉行。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序習慣。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束記得牢。