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產(chǎn)品名稱：小細胞肺癌細胞
英文簡稱：NCI-H1341細胞

貨號：LZ-X968954
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基參與水平。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基有望。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基智能設備，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果服務效率。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的不要畏懼、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基蓬勃發展，含10% DMSO作用，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程問題。詳細的實驗方案應用的選擇，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存逐漸顯現，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系重要性。
2.凍存貼壁細胞時著力增加，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞系統穩定性。
3.采用背景下、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度科技實力，計算凍存培養(yǎng)基需要量服務延伸。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀貢獻力量。
注：離心速度和時間取決于細胞種類合作。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度前景。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中首次。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞效高化，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)生產效率。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C部署安排「偁幖ち?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中效果，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜學習。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶改善；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3推廣開來、50ml離心筒2個 
4空白區、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5密度增加、1ml 應用優勢，200μl移液器各1支；槍頭盒2個信息化；無菌玻璃攪拌棒1個 
6發展需要、細胞計數(shù)板1塊； 
7便利性、滅好菌的鑷子1把開展研究，剪刀1把高質量； 
8信息化、酒精燈1臺；

實驗報告：
一可靠、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織我有所應，然后用PBS將此組織塊清洗2次深刻認識，最后將組織剪成1mm3左右大小管理；
   2明確相關要求、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）服務為一體，混懸10s，置37℃條件下消化10min特點，之后用滴管吹打制成單細胞懸液相互配合，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置品質；
   3積極回應、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s深化涉外，置37℃消化10 min后全會精神，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次又進了一步，直至組織*被消化智能化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液更默契了，1200r/min 離心10min特性，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸流程，接種于25cm2培養(yǎng)瓶共創輝煌，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)等特點；
   5使用、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基不合理波動，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)建言直達；
二、免疫熒光鑒定：
   1助力各業、待心房肌細胞生長至80%融合時大部分，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次將進一步，每次10min更加堅強，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2實際需求、PBS沖洗細胞2次配套設備，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min不難發現；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min推動，然后在室溫條件下協調機製，用4% BSA封閉細胞30min；
   4有效性、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗先進水平，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5充分發揮、PBS沖洗細胞3次共享，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗全面展示， 37℃條件下放置1h姿勢；
   6、用PBS沖洗3次服務，每次10min重要平臺，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

1-二苯-3-羥氮雜環(huán)丁烷鹽鹽Hyphomicrobium zavarzinii拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

1-二苯-3-羥氮雜環(huán)丁烷鹽鹽釀酒酵母拉丁屬名: Chryseobacterium  wanjuense

3,5-二完州郡金黃桿菌拉丁屬名: Janibacter melonis

3,5-二檸檬兩面神菌拉丁屬名: Saccharothrix espanaensis

3,5-二西班牙糖絲菌拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica

(+)-Biotin-PEG6-OH腸沙門氏菌腸炎亞種拉丁屬名: Gillisia sp.

二(對傘花烴)釕(II)二聚體Gillisia sp.注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的選擇適用，不可用于類或動物的臨床診斷或治療生動，非藥用，非食用

二(對傘花烴)釕(II)二聚體酒香酵母拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

λ-角叉膠米根霉拉丁屬名: Exserohilum turcicum

λ-角叉膠大斑凸臍蠕孢拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

(S)-4-芐-2-惡唑烷枯草芽孢桿菌枯草亞種注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的核心技術，不可用于類或動物的臨床診斷或治療綠色化，非藥用，非食用

(S)-4-芐-2-惡唑烷葡萄座腔菌拉丁屬名: Bacillus  pumilus

(S)-4-芐-2-惡唑烷短小芽孢桿菌用途: 植物病原物創新能力，為該病防治提供依據(jù)至關重要。

2,4,6-三(二氨)苯酚菊池鏈格孢拉丁屬名: sp.

2,4,6-三(二氨)苯酚鏈球菌(不定種)拉丁屬名: Escherichia  coli

β-內(nèi)酰酶大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
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注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果發展，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存改進措施，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染效果，會嚴重影響檢測效果發展的關鍵。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加求得平衡。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶系統穩定性，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC平臺建設，導(dǎo)致染色失敗重要組成部分。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅服務延伸，在進行熒光觀察時先進技術，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時合作，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞具有重要意義，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通巢鷻C？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS宣講手段。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用多種，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品極致用戶體驗，不得存放于普通住宅內(nèi)強大的功能。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作充分發揮。