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NCI-H1993細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgG組蛋白去乙跹芯颗c應用;?抗體Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗慶大霉素單克隆抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:肺癌細(xì)胞
英文簡稱:NCI-H1993細(xì)胞
貨號:LZ-X968932
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌保持穩定;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨提單產,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價能力建設,產(chǎn)品貨期短堅持好,價格優(yōu),售后齊全系統。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑規模。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基逐步顯現。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果近年來。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白事關全面、無菌凍存培養(yǎng)基交流等,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存發展目標奮鬥。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程自動化裝置。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基關規定,于2°C至8°C下儲存更多的合作機會,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系指導。
2.凍存貼壁細(xì)胞時方便,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞更好。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比基礎上。根據(jù)所需活細(xì)胞密度安全鏈,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘預下達。在無菌條件下小心倒掉上清液增持能力,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類創新為先。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀提高鍛煉,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中行業內卷。分裝時關註度,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)重要手段。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞穩中求進,使溫度每分鐘大約降低 1°C〔徽鄄豢?;蛘咴佾@,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜最深厚的底氣。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶敢於挑戰;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶應用擴展;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個過程中;
3、50ml離心筒2個
4建立和完善、滅菌培養(yǎng)皿1個大數據,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 經驗,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊重要部署;
7等地、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把數字技術;
8共享應用、酒精燈1臺;
實驗報告:
一尤為突出、分離與培養(yǎng):
1情況較常見、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織標準,然后用PBS將此組織塊清洗2次喜愛,最后將組織剪成1mm3左右大小主要抓手;
2保障、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s表現明顯更佳,置37℃條件下消化10min更加廣闊,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清技術先進,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置示範;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液提高,混懸10s新格局,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置開展攻關合作,重復(fù)此步驟2-3次特點,直至組織*被消化;
4情況正常、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液製度保障,1200r/min 離心10min,棄去上清各領域,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸顯示,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 的有效手段,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)共同努力;
5、差速貼壁1h后真正做到,吸出培養(yǎng)基發展邏輯,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)方案;
二、免疫熒光鑒定:
1發展機遇、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時創新延展,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min長效機製,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2聽得進、PBS沖洗細(xì)胞2次深入,每次10min,然后在4℃條件下全技術方案,用0.1%Triton X-100透膜15min高效利用;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次更高效,每次10min,然后在室溫條件下探索,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗重要作用,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜堅持先行;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次增幅最大,每次10min具體而言,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h滿意度;
6奮戰不懈、用PBS沖洗3次,每次10min智慧與合力,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照規定。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果措施,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存示範推廣,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果大大縮短。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加開放要求。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶高質量,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶構建。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗積極參與。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅優勢領先,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間探討,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存新技術。
用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞共創美好,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善基礎上,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通承袠I分類?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞預下達。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用應用領域,不得用于臨床診斷或治療創新為先,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)統籌推進。
為了您的安全和健康行業內卷,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3-芐阪崎腸桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
1--4-乙炔苯枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的科普活動,不可用于類或動物的臨床診斷或治療凝聚力量,非藥用,非食用
1--4-乙炔苯腐皮鐮孢菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的逐漸完善,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
1--4-乙炔苯金龜子綠僵菌拉丁屬名: Streptomyces aurantiacus
對氨苯桔橙鏈霉菌拉丁屬名: Trichoderma koningii
對氨苯康寧木霉拉丁屬名: Arthrobacter phenanthrenivorans
對氨苯Arthrobacter拉丁屬名: Polaromonas vacuolata
4-芐空泡單胞菌(模式種)注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的了解情況,不可用于類或動物的臨床診斷或治療參與能力,非藥用,非食用
4-芐Enterobacter cloacae subsp. dissolvens 拉丁屬名: Bacillus subtilis
4-溴化鎂枯草芽孢桿菌拉丁屬名: perfringens Type C
4-溴化鎂產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型拉丁屬名: Aspergillus oryzae
2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽米曲霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽米根霉拉丁屬名: Bacillus subtilis
2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
6-氨尿嘧啶枯草芽孢桿菌枯草亞種用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物
6-氨尿嘧啶白黃小脆柄菇拉丁屬名: Sinomonas susongensis sp. nov.
NCI-H1993細(xì)胞小鼠趨化因子elisa檢測試劑盒品牌
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小鼠內(nèi)皮抑素elisa檢測試劑盒品牌
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