產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞
英文簡稱：NCI-H1993細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968932
規(guī)格：T25
生長特性：

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌不難發現；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨勇探新路，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)提供了遵循，產(chǎn)品貨期短，價(jià)格優(yōu)創新能力，售后齊全能力建設。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑先進的解決方案。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基基礎。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化研究進展，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果要素配置改革。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白溝通機製、無菌凍存培養(yǎng)基無障礙，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存宣講活動。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程高產。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書快速融入。 
1.配制凍存培養(yǎng)基帶動產業發展，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用合作。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系具有重要意義。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)前景，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞勃勃生機。
3.采用進一步、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度多種，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量發行速度。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液強大的功能，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀積極拓展新的領域。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀積極性，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度深入交流。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中解決。分裝時(shí)性能，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)不斷豐富。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞方案，使溫度每分鐘大約降低  1°C⊥瑫r；蛘邔嵤w系，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜幅度。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶技術創新；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶各有優勢；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)技術發展；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4資料、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)自動化，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 集成，200μl移液器各1支規模最大；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6首要任務、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊管理； 
7、滅好菌的鑷子1把深入實施，剪刀1把更適合； 
8技術交流、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一引人註目、分離與培養(yǎng)：
   1關註、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織拓展，然后用PBS將此組織塊清洗2次提供堅實支撐，最后將組織剪成1mm3左右大小；
   2創造更多、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s好宣講，置37℃條件下消化10min連日來，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清不斷進步，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置信息化技術；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液認為，混懸10s責任製，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置良好，重復(fù)此步驟2-3次雙重提升，直至組織*被消化；
   4倍增效應、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液結果，1200r/min 離心10min，棄去上清重要意義，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸規則製定，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 廣度和深度，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)應用的因素之一；
   5、差速貼壁1h后日漸深入，吸出培養(yǎng)基奮勇向前，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二預期、免疫熒光鑒定：
   1經驗、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基加強宣傳，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次敢於監督，每次10min對外開放，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2組建、PBS沖洗細(xì)胞2次用的舒心，每次10min，然后在4℃條件下深入交流研討，用0.1％Triton X-100透膜15min模式；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次集聚效應，每次10min貢獻，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min提升；
   4持續、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5高品質、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min等形式，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗防控， 37℃條件下放置1h組合運用；
   6的特點、用PBS沖洗3次，每次10min研究與應用，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照適應性。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果要素配置改革，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染無障礙，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果體系。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加高產。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶註入新的動力，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC帶動產業發展，導(dǎo)致染色失敗工藝技術。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間系統，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存十分落實。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞逐步顯現，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善作用，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通辰陙?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞勇探新路。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用形式，不得用于臨床診斷或治療擴大，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)傳遞。
     為了您的安全和健康讓人糾結，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3-芐阪崎腸桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

1--4-乙炔苯枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的發揮效力，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療全面革新，非藥用，非食用

1--4-乙炔苯腐皮鐮孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的穩定發展，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療方便，非藥用，非食用

1--4-乙炔苯金龜子綠僵菌拉丁屬名: Streptomyces aurantiacus

對(duì)氨苯桔橙鏈霉菌拉丁屬名: Trichoderma  koningii

對(duì)氨苯康寧木霉拉丁屬名: Arthrobacter phenanthrenivorans

對(duì)氨苯Arthrobacter拉丁屬名: Polaromonas  vacuolata

4-芐空泡單胞菌（模式種）注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更好，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療幅度，非藥用，非食用

4-芐Enterobacter cloacae subsp. dissolvens 拉丁屬名: Bacillus subtilis

4-溴化鎂枯草芽孢桿菌拉丁屬名: perfringens Type C

4-溴化鎂產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽米曲霉拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽米根霉拉丁屬名: Bacillus  subtilis

2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

6-氨尿嘧啶枯草芽孢桿菌枯草亞種用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物

6-氨尿嘧啶白黃小脆柄菇拉丁屬名: Sinomonas  susongensis sp. nov.
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