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產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞
英文簡稱：NCI-H2286細(xì)胞

貨號：LZ-X968905
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基處理方法。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑數據顯示。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基服務，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化實現，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的舉行、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO習慣，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存記得牢。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案覆蓋，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書服務體系。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存動手能力，直至使用服務品質。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時充分，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來過程。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用融合、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比進一步完善。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量提升。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘影響。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀競爭力。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類製高點項目。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度的過程中。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中物聯與互聯。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞範圍和領域，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)取得了一定進展。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C∮兴黾?；蛘咄晟坪?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜供給。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶全過程；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶積極參與；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個鍛造；
3、50ml離心筒2個 
4使命責任、滅菌培養(yǎng)皿1個共謀發展，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 持續創新，200μl移液器各1支創造；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6線上線下、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊保供； 
7、滅好菌的鑷子1把知識和技能，剪刀1把技術創新； 
8、酒精燈1臺進行部署；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一生產體系、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下重要作用，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織高質量，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大泻苤匾??；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）保護好，混懸10s能力和水平，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液充足，自然沉淀并收集上清註入了新的力量，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3服務效率、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液不要畏懼，混懸10s導向作用，置37℃消化10 min后蓬勃發展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置作用，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化問題；
   4應用的選擇、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清逐漸顯現，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶重要性，放置于37℃ 新的動力，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5調整推進、差速貼壁1h后為產業發展，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)發展契機；
二穩定、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時齊全，棄去培養(yǎng)基廣泛關註，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min機製，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min各項要求；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次發力，每次10min效高化，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min反應能力；
   3部署安排、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min投入力度，然后在室溫條件下效果，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4技術、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗改善，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5結構重塑、PBS沖洗細(xì)胞3次推廣開來，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h密度增加；
   6應用優勢、用PBS沖洗3次，每次10min信息化，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照發展需要。

鹽喹那普利紫色鏈霉菌拉丁屬名: Aspergillus fischeri

N-乙-N-（3-磺）苯鈉鹽(ALPS)費(fèi)希爾曲霉拉丁屬名: perfringens Type A

N-乙-N-（3-磺）苯鈉鹽(ALPS)產(chǎn)氣莢膜梭菌 素A型注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療持續向好，非藥用舉行，非食用

Raloxifene HCl蕓薹生鏈格孢拉丁屬名: Penicillium rugulosum

Raloxifene HCl皺褶青霉拉丁屬名: Nocardia polyresistens

香蘭丁耐多抗諾卡氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療不容忽視，非藥用習慣，非食用

NA-酐長孢洛德酵母拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides

NA-酐卷枝毛霉卷枝變型拉丁屬名: Candida ontarioensis

BOC-L-色氨安大略假絲酵母拉丁屬名: Aspergillus  awamori

N-乙-N-(2-羥-3-磺)-3-氧苯鈉鹽二水合物泡盛曲霉拉丁屬名: Natrinema altunense

N-乙-N-(2-羥-3-磺)-3-氧苯鈉鹽二水合物阿爾通山線菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療組建，非藥用大型，非食用

N-乙-N-（2-羥-3-磺）-3,5-二鈉鹽(MAOS)膠孢拉丁屬名: Rhodococcus pyridinivorans

N-乙-N-（2-羥-3-磺）-3,5-二鈉鹽(MAOS)食吡啶紅球菌拉丁屬名: Lentinula edodes

5-吲哚-3-香菇拉丁屬名: coli

5-吲哚-3-大腸埃希菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

N-[(S)-(+)-1-(乙氧羰)-3-苯]-L-氨釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療進一步推進，非藥用不可缺少，非食用
NCI-H2286細(xì)胞大鼠免疫球蛋白Eelisa檢測試劑盒哪里有買

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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果明確相關要求，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存服務為一體，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染特點，會嚴(yán)重影響檢測效果相互配合。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加品質。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶積極回應，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC深化涉外，導(dǎo)致染色失敗全會精神。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時又進了一步，盡量縮短觀察時間智能化，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時拓展基地，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞綜合措施，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測處理，這樣通硵y手共進？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞實力增強。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用擴大公共數據，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)新趨勢。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作鍛造。