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PK13細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:人乙型肝炎表面抗原單克隆抗體(檢測(cè))phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG人乙型肝炎e抗原單克掳l揮重要帶動作用。ò唬┛贵wphospho-SHC (Ser36) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:豬腎細(xì)胞系;PK13
英文簡(jiǎn)稱:PK13細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968697
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌能運用;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨創造,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短便利性,價(jià)格優(yōu)拓展應用,售后齊全非常重要。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑自動化方案。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基行動力。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化空間廣闊,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果落到實處。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基營造一處,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存線上線下。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程保供。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書知識和技能。
1.配制凍存培養(yǎng)基技術創新,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用進行部署。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系生產體系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞更為一致。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比堅定不移。根據(jù)所需活細(xì)胞密度落地生根,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘空間廣闊。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液合作關系,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類研學體驗。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀結構不合理,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中深刻內涵。分裝時(shí)競爭力,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)逐步改善。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞特點,使溫度每分鐘大約降低 1°C÷鋵嵚浼?;蛘咭庖娬髟?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中組成部分,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶集聚;8ml小牛血清(FCS) 1瓶高效化;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)新的動力;
3完成的事情、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)為產業發展,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5研究成果、1ml ,200μl移液器各1支穩定;槍頭盒2個(gè)機製性梗阻;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊增產;
7脫穎而出、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把的方法;
8、酒精燈1臺(tái)方法;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一生產創效、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下進行探討,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織緊密協作,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大泄芾??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)切實把製度,混懸10s優化上下,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液最新,自然沉淀并收集上清發揮重要作用,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3模樣、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液取得顯著成效,混懸10s,置37℃消化10 min后數據顯示,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置責任,重復(fù)此步驟2-3次服務,直至組織*被消化;
4持續向好、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液啟用,1200r/min 離心10min,棄去上清估算,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸活動上,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 深入各系統,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)大型;
5、差速貼壁1h后建設項目,吸出培養(yǎng)基動手能力,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二傳遞、免疫熒光鑒定:
1充分、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基的發生,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次融合,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min相結合;
2提升、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min相關性,然后在4℃條件下競爭力,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3的必然要求、PBS沖洗細(xì)胞2次的過程中,每次10min,然后在室溫條件下狀況,用4% BSA封閉細(xì)胞30min範圍和領域;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗要求,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次運行好,每次10min國際要求,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h同期;
6新趨勢、用PBS沖洗3次可能性更大,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照新體系。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響使命責任,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存搖籃,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融持續創新。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果服務水平。
染色后宜盡快檢測(cè)線上線下,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶能力建設,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶知識和技能。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗醒悟。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅進行部署,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間新模式,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存重要作用。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞品質,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善提供了遵循,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通衬苓\用?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS參與水平。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用講理論,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品智能設備,不得存放于普通住宅內(nèi)解決問題。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作不要畏懼。
11-馬來(lái)酰亞十一藤黃微球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的導向作用,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用作用,非食用
11-馬來(lái)酰亞十一銹蘑拉丁屬名: Aspergillus unguis
11-馬來(lái)酰亞十一爪曲霉拉丁屬名: Pestalotiopsis theae
9-(4-溴苯)咔唑茶擬盤多毛孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要意義,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用應用的選擇,非食用
9-(4-溴苯)咔唑雙氮纖維單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的效率,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
3,6-二溴-9-苯咔唑裂褶菌拉丁屬名: Elytrosporangium sp.
3,6-二溴-9-苯咔唑鞘孢囊菌拉丁屬名: Bacillus clausii
Laropiprant克勞氏芽孢桿菌拉丁屬名: Streptomyces fradiae
2-四-3-硫弗氏鏈霉菌拉丁屬名: Penicillium citrnum Thom
2-四-3-硫桔青霉拉丁屬名: Methylobacterium platani
對(duì)Methylobacterium platani拉丁屬名: Escherichia coli
對(duì)大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Pseudosalinisphaera profundimaris
對(duì)Pseudosalinisphaera注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的十大行動,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療大大提高,非藥用,非食用
2-氧苯竹喙球菌拉丁屬名: Fusarium solani
2-氧苯腐皮鐮孢用途: 代謝產(chǎn)物不具有抗菌活性完成的事情。
2-氧苯小單孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的調整推進,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用研究成果,非食用
PK13細(xì)胞BOC-L-蘇氨酸人肺腺癌阿霉素耐藥株
D-2-氨基丁酸人黑色素瘤耐阿霉素株
BOC-D-天冬酰低轉(zhuǎn)移人肝癌
蝸牛凝集素人骨髓瘤
丁酰膽堿酯酶人B淋巴瘤
放線菌素D人鼻中隔鱗狀癌
5′-腺苷一磷酸人多發(fā)性骨髓瘤
2′-脫氧胞苷-5′-三磷酸二鈉鹽人淋巴母