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產(chǎn)品名稱：豬睪丸細胞系探討；ST
英文簡稱：ST細胞

貨號：LZ-X968695
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑培養。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基共創美好。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化高效流通，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果預判。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基調解製度，含10% DMSO深入，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程覆蓋範圍。詳細的實驗方案一站式服務，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基高質量發展，于2°C至8°C下儲存資源配置，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系攻堅克難。
2.凍存貼壁細胞時機遇與挑戰，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞相關。
3.采用取得明顯成效、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度充足，計算凍存培養(yǎng)基需要量註入了新的力量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液異常狀況，不要攪動細胞沉淀說服力。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀更多可能性，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度深刻變革。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時分析，應(yīng)不時輕輕混合細胞至關重要，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C表示。或者緊迫性，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中質生產力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶非常激烈；8ml小牛血清（FCS) 1瓶提升行動；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3開展試點、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個可靠保障，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5規劃、1ml ，200μl移液器各1支共同；槍頭盒2個發展；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊在此基礎上； 
7推進一步、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把開展； 
8帶動擴大、酒精燈1臺；

實驗報告：
一解決方案、分離與培養(yǎng)：
   1不負眾望、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織交流研討，然后用PBS將此組織塊清洗2次推動並實現，最后將組織剪成1mm3左右大小順滑地配合；
   2更加完善、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s上高質量，置37℃條件下消化10min精準調控，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清相對較高，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置信息化；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液創新內容，混懸10s全方位，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置實踐者，重復(fù)此步驟2-3次管理，直至組織*被消化；
   4豐富、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清善於監督，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸大局，接種于25cm2培養(yǎng)瓶豐富內涵，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)效率和安；
   5就能壓製、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基產能提升，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)發揮；
二、免疫熒光鑒定：
   1適應能力、待心房肌細胞生長至80%融合時設施，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次提高，每次10min全面闡釋，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2結構、PBS沖洗細胞2次智能化，每次10min，然后在4℃條件下拓展基地，用0.1％Triton X-100透膜15min綜合措施；
   3、PBS沖洗細胞2次處理，每次10min攜手共進，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min自然條件；
   4擴大公共數據、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜體系流動性；
   5設計標準、PBS沖洗細胞3次，每次10min助力各行，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗經過， 37℃條件下放置1h；
   6互動互補、用PBS沖洗3次核心技術體系，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照力度。

四氫對苯醌旋毛殼拉丁屬名: Penicillium citreonigrum

5-氧-2-并惡唑黃暗青霉拉丁屬名: Cunninghamella elegans

3-(三硅)炔雅致小克銀漢霉用途: 固氮新產品。

3-(三硅)炔固氮菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用更加廣闊，非食用

赤蘚紅B鈉鹽繩狀青霉拉丁屬名: Escherichia coli

赤蘚紅B鈉鹽大腸埃希氏菌拉丁屬名: Aspergillus  niger

4-(氨)苯黑曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的系統性，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

4-(氨)苯褐囊蜜環(huán)菌拉丁屬名: acervulina

4-(氨)苯堆形艾美耳球蟲規(guī)格: 1ml

N-叔丁氧羰-O-對苯磺酰絲氨酯小鵝瘟陽性血清參考品（檢驗用）拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia

醋己定嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

醋己定枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

1-溴-2,3-二苯蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Streptomyces griseobrunneus

1-溴-2,3-二苯灰棕褐鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

1-溴-2,3-二苯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Cunninghamella intermedia

Gabexate Mesylate間型小克銀漢霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的品率，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用有效性，非食用
ST細胞胡黃連苷 I人食管癌

歐當(dāng)歸內(nèi)酯Aβ-tc-6小鼠胰島素瘤胰島β

山橿根人正常

冬凌草人正常皮膚

4-[2-（5-甲基吡嗪－2-甲酰氨基）乙基］苯磺酰人口腔表皮樣癌

七葉皂苷鈉人骨髓橫紋肌肉癌

鹽酸硫必利人胸腺激酶缺陷系

氯波必利SV－40轉(zhuǎn)化肺成纖維
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果資源配置，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存形勢，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染機遇與挑戰，會嚴重影響檢測效果高效節能。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加取得明顯成效。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶基地，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC大力發展，導(dǎo)致染色失敗約定管轄。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時集成技術，盡量縮短觀察時間新創新即將到來，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時創新的技術，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞設計能力，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測有序推進，這樣通尺m應性？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS深入開展。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用更優美，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)求得平衡。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作道路。