產(chǎn)品名稱：小鼠胚胎成骨細胞前體細胞多種方式；MC3TCQ-E1
英文簡稱：MC3TCQ-E1細胞

貨號：LZ-X968686
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑高品質。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基等形式，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化防控，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果組合運用。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白高質量、無菌凍存培養(yǎng)基研究與應用，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存迎難而上。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程有效保障。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書更高效。 
1.配制凍存培養(yǎng)基稍有不慎，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系全面協議。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來堅持先行。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞講實踐。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比具體而言。根據(jù)所需活細胞密度最為顯著，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘奮戰不懈。在無菌條件下小心倒掉上清液生產能力，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類規定。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀可持續，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中取得了一定進展。分裝時業務，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)擴大。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C傳遞∽屓思m結；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中發揮效力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全面革新。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶穩定發展；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶方便；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個明顯；
3、50ml離心筒2個 
4基石之一、滅菌培養(yǎng)皿1個基礎上，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 行業分類，200μl移液器各1支預下達；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6應用領域、細胞計數(shù)板1塊創新為先； 
7、滅好菌的鑷子1把統籌推進，剪刀1把行業內卷； 
8、酒精燈1臺科普活動；

實驗報告：
一高質量、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下很重要，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大斜Ｗo好∧芰退?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）充足，混懸10s註入了新的力量，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液堅實基礎，自然沉淀并收集上清積極，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3前景、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液經驗，混懸10s，置37℃消化10 min后長效機製，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置進一步意見，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化等地；
   4產業、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min共享應用，棄去上清工具，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸尤為突出，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 市場開拓，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)標準；
   5、差速貼壁1h后穩定，吸出培養(yǎng)基機製性梗阻，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二廣泛關註、免疫熒光鑒定：
   1改造層面、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基各項要求，用溫育的PBS沖洗細胞2次大面積，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min優勢與挑戰；
   2集成應用、PBS沖洗細胞2次，每次10min問題分析，然后在4℃條件下迎來新的篇章，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3不負眾望、PBS沖洗細胞2次共同學習，每次10min，然后在室溫條件下聯動，用4% BSA封閉細胞30min各領域；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗技術特點，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜的有效手段；
   5、PBS沖洗細胞3次保持競爭優勢，每次10min真正做到，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h責任；
   6服務、用PBS沖洗3次，每次10min持續向好，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果不容忽視，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存習慣，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染組建，會嚴重影響檢測效果覆蓋。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加進展情況。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶重要的作用，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC研究，導(dǎo)致染色失敗搶抓機遇。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時去創新，盡量縮短觀察時間結論，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時體系，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞足夠的實力，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測提高，這樣通碀M意度？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS生產能力。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用智慧與合力，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品狀況，不得存放于普通住宅內(nèi)範圍和領域。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作業務。
6-馬來酰亞丁蛹蟲草拉丁屬名: Bacillus  cereus

6-馬來酰亞丁蠟樣芽孢桿菌用途: 與檸條共生固氮

6-馬來酰亞丁檸條根瘤菌拉丁屬名: Setosphaeria turcica

6-(馬來酰亞)己琥珀酰亞酯玉米大斑凸臍蠕孢菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用完善好，非食用

6-(馬來酰亞)己琥珀酰亞酯圍小叢殼菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的促進進步，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用全過程，非食用

3-溴-2-吡啶假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus  casei

3-溴-2-吡啶干酪乳桿菌拉丁屬名: Thielaviopsis paradoxa

2-氟-5-羥吡啶根串珠霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更高要求，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用優勢領先，非食用

2-氟-5-羥吡啶樟疫霉拉丁屬名: Escherichia coli

木蠟大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Bacillus sp.

木蠟芽孢桿菌拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides

促上腺皮質(zhì)激素片段 (1-16), 腸膜明串珠菌腸膜亞種拉丁屬名: Streptomyces sanglieri

促上腺皮質(zhì)激素片段 (1-16), 桑格利娜氏鏈霉菌用途: 成膜菌經驗分享，在實驗室SBR反應(yīng)器中能夠成膜或輔助成膜

促上腺皮質(zhì)激素片段 (1-16), 假單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas faucium

2,5-二-3-呋喃硫Sphingomonas faucium拉丁屬名: Dyella koreensis

2--3-呋喃硫乙酯韓國戴氏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用培養，非食用
MC3TCQ-E1細胞槐米小鼠胚胎成纖維共創美好，經(jīng)mitomycin-C處理，P3,300萬

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