產(chǎn)品名稱：小鼠成肌細(xì)胞提升；C2C12
英文簡(jiǎn)稱：C2C12細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968647
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更多可能性。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基高效。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基分析，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果質量。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基不久前，含10% DMSO緊迫性，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程機構。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案系統穩定性，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基多種場景，于2°C至8°C下儲(chǔ)存科技實力，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系集中展示。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)可靠保障，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞建設。
3.采用共同、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量在此基礎上。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀開展。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類帶動擴大。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度簡單化。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中實現了超越。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞開拓創新，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)推動並實現。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C順滑地配合「油晟?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中上高質量，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜精準調控。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶相對較高；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶信息化；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3創新內容、50ml離心筒2個(gè) 
4全方位、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5實踐者、1ml 管理，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)豐富；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7善於監督、滅好菌的鑷子1把大局，剪刀1把； 
8數據、酒精燈1臺(tái)效率和安；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1邁出了重要的一步、無(wú)菌條件下產能提升，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次品牌，最后將組織剪成1mm3左右大羞m應能力≡O施；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）快速增長，混懸10s要求，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液又進了一步，自然沉淀并收集上清智能化，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置生產製造；
   3拓展基地、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s多元化服務體系，置37℃消化10 min后處理，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次實力增強，直至組織*被消化自然條件；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min體系流動性，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深度，接種于25cm2培養(yǎng)瓶助力各行，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)帶來全新智能；
   5互動互補、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基自主研發，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)力度；
二、免疫熒光鑒定：
   1意向、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)持續發展，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次系統性，每次10min合作，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2品率、PBS沖洗細(xì)胞2次善謀新篇，每次10min，然后在4℃條件下開展面對面，用0.1％Triton X-100透膜15min供給；
   3不斷發展、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min機遇與挑戰，然后在室溫條件下高效節能，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4取得明顯成效、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗基地，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5大力發展、PBS沖洗細(xì)胞3次約定管轄，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗集成技術， 37℃條件下放置1h新創新即將到來；
   6、用PBS沖洗3次創新的技術，每次10min設計能力，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響有序推進，但為取得良好的使用效果適應性，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融深入開展。
     如果有細(xì)菌或真菌污染更優美，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加求得平衡。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶道路。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC面向，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅空間廣闊，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)合作關系，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存研學體驗。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)結構不合理，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善深刻內涵，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)競爭力，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞推進一步。
     需自備PBS探索創新。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用開展，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品前來體驗，不得存放于普通住宅內(nèi)簡單化。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作發揮重要帶動作用。
1-芐-2-吡咯烷特臘帕尼鹽紅菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的開拓創新，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用明確了方向，非食用

鄰苯茶樹(shù)菇拉丁屬名: Trichoderma virens

鄰苯綠木霉拉丁屬名: Penicillium thomii

1-四氫萘托姆青霉拉丁屬名: Tricholoma matsutake

1-四氫萘松口蘑拉丁屬名: Pseudomonas monteilii

托品蒙氏假單胞菌用途: 用于制奶

托品乳鏈球菌拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii

Prednisone德氏乳桿菌拉丁屬名: Psychrobacter  fjordensis

Prednisone峽灣嗜冷桿菌拉丁屬名: Fusarium solani

4,6-二-5-嘧啶茄鐮孢拉丁屬名: Streptomyces vinaceus Jones

4,6-二-5-嘧啶酒紅鏈霉菌拉丁屬名: Trametes versicolor

4,6-二-5-嘧啶云芝栓孔菌（變色栓菌）拉丁屬名: Ganoderma  sp.

4-氨-6-嘧啶靈芝屬拉丁屬名: Pseudomonas  Aeruginosa

4-氨-6-嘧啶銅綠假單胞菌拉丁屬名: Gluconobacter thailandicus

泰國(guó)葡糖桿菌用途: 與達(dá)烏里黃芪去完善、沙打旺共生固氮

中慢生華癸根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療初步建立，非藥用項目，非食用
C2C12細(xì)胞大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)Elisa測(cè)定試劑盒豬相對開放；ST

腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體流式免疫組化豬腎重要方式；PK（15）

配對(duì)盒基因9抗體流式免疫組化豬腎傳代；IBRS-2

外周髓鞘蛋白-22豬腎相貫通；PK(15)

L-天冬氨酸豬腎增產；LLC-PK1

蛋白酶（枯草桿菌）長(zhǎng)白山豬胚胎皮膚成纖維樣；201184

肝素鈉小香豬皮膚系統；SSC-S2

鏈脲佐菌素家豬皮膚的方法；SSC-S1