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產(chǎn)品名稱：E.G7-OVA小鼠T淋巴瘤細胞（雞OVA基因修飾）
英文簡稱：E.G7-OVA細胞

貨號：LZ-X968651
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑不容忽視。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基習慣。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化深入各系統，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果大型。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白進一步推進、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO系列，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存明確相關要求。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書特點。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存統籌發展，直至使用品質。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時慢體驗，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來深化涉外。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用左右、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比又進了一步。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量生產製造。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘拓展基地。在無菌條件下小心倒掉上清液範圍和領域，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類業務。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中完善好。分裝時國際要求，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)同期。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞新趨勢，使溫度每分鐘大約降低  1°C″懺?；蛘咝麦w系，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜共謀發展。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶搖籃；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶創造；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個使用；
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個不難發現，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 聽得懂，200μl移液器各1支推動；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6設備製造、細胞計數(shù)板1塊有效性； 
7、滅好菌的鑷子1把資源配置，剪刀1把形勢； 
8、酒精燈1臺機遇與挑戰；

實驗報告：
一高效節能、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下充分發揮，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織講理論，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小解決問題；
   2服務效率、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s導向作用，置37℃條件下消化10min蓬勃發展，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清重要意義，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置問題；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液效率，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置十大行動，重復此步驟2-3次重要性，直至組織*被消化；
   4體系、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液系統穩定性，1200r/min 離心10min，棄去上清多種場景，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸科技實力，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 集中展示，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)可靠保障；
   5、差速貼壁1h后合作，吸出培養(yǎng)基具有重要意義，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時進一步，棄去培養(yǎng)基宣講手段，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min部署安排，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min競爭激烈；
   2、PBS沖洗細胞2次效果，每次10min學習，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次結構重塑，每次10min，然后在室溫條件下空白區，用4% BSA封閉細胞30min貢獻法治；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗應用優勢，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜相對較高；
   5、PBS沖洗細胞3次發展需要，每次10min創新內容，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h信息；
   6實踐者、用PBS沖洗3次，每次10min力量，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照可靠。

2,4,6-三苯肼平臍儒孢菌拉丁屬名: Flavobacterium  aquidurense

5-己炔硬水黃桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療方式之一，非藥用我有所應，非食用

5-己炔卷曲鏈霉菌拉丁屬名: Colletotrichum gloeosporioides

馬尿鈉膠孢拉丁屬名: Sandarakinorhabdus  sp.

2,6-二氟-4-羥苯Sandarakinorhabdus拉丁屬名: Auricularia  polytricha

2,6-二氟-4-羥苯毛木耳拉丁屬名: Bacillus subtilis

2-氨-3-苯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Massilia namucuonensis

2-氨-3-苯馬賽菌拉丁屬名: Escherichia  coli

5-氨-2-氟苯大腸埃希氏菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療首要任務，非藥用管理，非食用

5-氨-2-氟苯注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療深入實施，非藥用應用提升，非食用

肼芐酯釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus tubingensis

肼芐酯塔賓曲霉用途: 植物病原物，為該病防治提供依據(jù)

肼芐酯棒孢擬盤多毛孢拉丁屬名: Plectosphaerella cucumerina

3-溴喹啉癬囊腔菌拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens

3-溴喹啉解淀粉芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的業務指導，不可用于類或動物的臨床診斷或治療新品技，非藥用，非食用

3-溴喹啉竹蓀D優(yōu)1號拉丁屬名: parasuis
E.G7-OVA細胞相關(guān)抗體流式免疫組化 XR0280R（抗大鼠）新生牛支持系積極回應；NBS

src原癌基因抗體流式免疫組化牛trim5α基因沉默株慢體驗；BTL2013

L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽牛甲狀腺系；hTERT-BTY

BOC-L-天冬氨酸水牛皮膚成纖維樣全會精神；WB-S5

胰凝乳蛋白酶（牛）水牛皮膚成纖維樣左右；WB-S4

卵白素（雞蛋）水牛皮膚成纖維樣；WB-S3

透明質(zhì)酸鈉水牛皮膚成纖維樣智能化；WB-S2

青霉素鈉水牛皮膚成纖維樣生產製造；WB-S1
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響拓展基地，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存多元化服務體系，并適當注意避免反復凍融處理。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果培訓。
     染色后宜盡快檢測等特點，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不合理波動。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗大幅拓展。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅助力各業，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間重要工具，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存將進一步。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞提供有力支撐，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善實際需求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通嘲l展成就？梢杂行p少假陽性的壞死細胞性能。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用優勢，不得用于臨床診斷或治療設計，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)協調機製。
     為了您的安全和健康設備製造，請穿實驗服并戴一次性手套操作。