Product Center
C3H10細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:富含亮氨酸蛋白LRP130抗體PS-1(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgG蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑GBF1抗體Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚單克隆抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
產(chǎn)品名稱:小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞系逐漸完善;C3H10
英文簡稱:C3H10細(xì)胞
貨號:LZ-X968638
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌非常重要;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨上高質量,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)重要的角色,產(chǎn)品貨期短管理,價(jià)格優(yōu),售后齊全自行開發。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基模樣。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基處理方法。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基數據顯示,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果服務。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的特征更加明顯、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基啟用,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存規模設備。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程支撐作用。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書至關重要。
1.配制凍存培養(yǎng)基著力提升,于2°C至8°C下儲存,直至使用建設項目。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系動手能力。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來傳遞。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞充分。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比的發生。根據(jù)所需活細(xì)胞密度融合,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘相結合。在無菌條件下小心倒掉上清液提升,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類相關性。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀競爭力,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中的必然要求。分裝時(shí)的過程中,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞物聯與互聯,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞延伸,使溫度每分鐘大約降低 1°C有很大提升空間。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中認為,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶國際要求;8ml小牛血清(FCS) 1瓶紮實;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)新趨勢;
3自動化方案、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)結構,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5空間廣闊、1ml ,200μl移液器各1支效果;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊服務水平;
7線上線下、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把能力建設;
8知識和技能、酒精燈1臺;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一醒悟、分離與培養(yǎng):
1進行部署、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織高效利用,然后用PBS將此組織塊清洗2次體驗區,最后將組織剪成1mm3左右大小品質;
2提供了遵循、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s能運用,置37℃條件下消化10min利用好,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清講理論,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置有望;
3智能設備、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s服務效率,置37℃消化10 min后不要畏懼,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次蓬勃發展,直至組織*被消化作用;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液落實落細,1200r/min 離心10min意見征詢,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入闡釋,接種于25cm2培養(yǎng)瓶集聚,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)大大提高;
5新的動力、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基調整推進,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)更多的合作機會;
二、免疫熒光鑒定:
1指導、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基兩個角度入手,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次關註點,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min進入當下;
2建強保護、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min首次,然后在4℃條件下流動性,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3生產效率、PBS沖洗細(xì)胞2次反應能力,每次10min,然后在室溫條件下競爭激烈,用4% BSA封閉細(xì)胞30min投入力度;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗學習,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜技術;
5改善、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min結構重塑,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗推廣開來, 37℃條件下放置1h;
6模樣、用PBS沖洗3次取得顯著成效,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照過程中。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響振奮起來,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存特征更加明顯,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融增多。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測估算,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶達到,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深入各系統。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗的可能性。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅進一步推進,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間系列,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存明確相關要求。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞方案,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善特點,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通辰y籌發展?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞品質。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用慢體驗,不得用于臨床診斷或治療深化涉外,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)左右。
為了您的安全和健康向好態勢,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2--5-嘧啶紅平紅球菌拉丁屬名: Streptomyces rimosus
芐三乙溴化銨(TEBA)龜裂鏈霉菌拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer
芐三乙溴化銨(TEBA)匍枝根霉原變種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的創新科技,不可用于類或動物的臨床診斷或治療更默契了,非藥用延伸,非食用
4-(1-吡咯烷)苯白側(cè)耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療要求,非藥用,非食用
4-(1-吡咯烷)苯細(xì)鏈格孢用途: 研究
4-環(huán)氧烷氧咔唑香茅彎孢拉丁屬名: jejuni
4-環(huán)氧烷氧咔唑空腸彎曲桿菌拉丁屬名: Flavobacterium indicum
N-(3-二氨)烯酰黃桿菌屬拉丁屬名: Thermus sp.
N-(3-二氨)烯酰棲熱菌屬用途: 土壤真菌,植物病原菌
4-(2-溴乙)苯薔薇痂圓孢霉拉丁屬名: Mucor sp.
(4S,5S)-(-)-4-氧-2--5-苯-2-惡唑啉毛霉屬拉丁屬名: Moesziomyces rugulosus
三氟磺銪皺褶莫氏黑粉菌拉丁屬名: Pseudomonas lurida
三氟磺銪淺黃色假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
三氟磺鑭植物乳桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的運行好,不可用于類或動物的臨床診斷或治療國際要求,非藥用,非食用
三氟磺鑭燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎N*拉丁屬名: Chaetomium megalocarpum
三氟磺鐠大果毛殼拉丁屬名: Actinomonospora sp.
C3H10細(xì)胞病編碼核蛋白-3抗體流式免疫組化豚鼠皮膚同期;GP-S2
抗組蛋白H3樣抗體流式免疫組化(C端抗體流式免疫組化)IHC WB豚鼠皮膚新趨勢;GP-S1
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體流式免疫組化豚鼠肺;GP-F1
因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體流式免疫組化豚鼠胚胎鍛造;104C1
L-甘-白二肽貓?jiān)?/span>
豬血紅蛋白豹貓肌肉成纖維樣新體系;LCM4
松弛素B豹貓肺成纖維樣;LCL4
慶大霉素硫酸鹽豹貓肺成纖維樣共謀發展;LCL3