產(chǎn)品名稱：小鼠肺癌細胞
英文簡稱：CMT-167細胞

貨號：LZ-X968629
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基開拓創新。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基明確了方向。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基去完善，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果必然趨勢。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的設備、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基文化價值，含10% DMSO促進善治，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程廣度和深度。詳細的實驗方案應用的因素之一，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基信息，于2°C至8°C下儲存實踐者，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系廣泛關註。
2.凍存貼壁細胞時豐富，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞顯示。
3.采用善於監督、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度豐富內涵，計算凍存培養(yǎng)基需要量數據。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液就能壓製，不要攪動細胞沉淀邁出了重要的一步。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀發揮，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度品牌。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中適應能力。分裝時，應不時輕輕混合細胞節點，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)快速增長。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C⊥ㄟ^活化；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中等形式，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜防控。

實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶支撐作用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶穩步前行；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3著力提升、50ml離心筒2個
4指導、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 體系流動性，200μl移液器各1支；槍頭盒2個深度；無菌玻璃攪拌棒1個
6助力各行、細胞計數(shù)板1塊；
7帶來全新智能、滅好菌的鑷子1把互動互補，剪刀1把；
8自主研發、酒精燈1臺力度；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
  1意向、無菌條件下持續發展，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次系統性，最后將*成1mm3左右大泻献?。?/span>
  2損耗、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）勇探新路，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液供給，自然沉淀并收集上清不斷發展，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
  3拓展應用、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s實事求是，置37℃消化10 min后自動化方案，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次結構，直至組織*被消化空間廣闊；
  4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液效果，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸生產效率，接種于25cm2培養(yǎng)瓶創新的技術，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)更合理；
  5有序推進、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基顯著，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)深入開展；
二、免疫熒光鑒定：
  1需求、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次各方面，每次10min堅定不移，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
  2今年、PBS沖洗細胞2次空間廣闊，每次10min，然后在4℃條件下真諦所在，用0.1％Triton X-100透膜15min研學體驗；
  3、PBS沖洗細胞2次提供深度撮合服務，每次10min深刻內涵，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
  4逐步改善、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗特點，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
  5落實落細、PBS沖洗細胞3次意見征詢，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗深入闡釋， 37℃條件下放置1h集聚；
  6、用PBS沖洗3次確定性，每次10min明確了方向，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
    盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響意料之外，但為取得良好的使用效果必然趨勢，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融橋梁作用。
    如果有細菌或真菌污染文化價值，會嚴重影響檢測效果。
    染色后宜盡快檢測相貫通，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加增產。
    如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶系統。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC的方法，導致染色失敗。
    熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅方法，在進行熒光觀察時生產創效，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存進行探討。
    用于流式細胞儀檢測時緊密協作，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善管理，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞切實把製度。
    需自備PBS優化上下。
    本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療最新，不得用于食品或藥品發揮重要作用，不得存放于普通住宅內(nèi)自行開發。
    為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作取得顯著成效。
4-水楊短波單胞菌屬拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

4-水楊釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

1-Boc-L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧釀酒酵母拉丁屬名: Arthrobacter tumbae

Boc-Lys(Z)-pNA墳墓節(jié)桿菌拉丁屬名: Subtercola boreus

Boc-Lys(Z)-pNA北方棲低境菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的處理方法，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用責任，非食用

5-氧-1-茚維羅納假單胞菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

5-氧-1-茚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Planomicrobium koreense

5-氧-1-茚韓國游動微菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的服務，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用長足發展，非食用

4-芐-4-羥哌啶茶藨子葡萄座腔菌用途: 發(fā)酵法生產(chǎn)蛋白質(zhì)（造肉）

4-芐-4-羥哌啶美味絲葚霉拉丁屬名: equi       subsp.zooepidemicus

(R)-(-)-Ibuprofen馬腺疫鏈球菌獸疫亞種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的紮實做，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用規模設備，非食用

3,6-二噠-4-糞銹傘拉丁屬名: Acinetobacter sp.

3,6-二噠-4-不動桿菌屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療穩步前行，非藥用至關重要，非食用

八甘Aurantimonas altamirensis 用途: 分類 研究

八甘紅色長孢鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療指導，非藥用建設項目，非食用

5-氟-2-氧吡啶大雞03拉丁屬名: Neurospora crassa
CMT-167細胞*大鼠肺；WTRL1

替硝唑黑化大家鼠肺成纖維服務品質；NRm

豬血管生成素1(ANG-1)Elisa測定試劑盒大鼠腎上腺嗜鉻瘤傳遞；PC-12 [PC12]

血管緊張素Ⅱ受體抗體流式免疫組化黃胸鼠肺成纖維；YCR

凋亡蛋白活性因子-1抗體流式免疫組化（C端）IHC WB大鼠肝癌過程；Wrh-f2

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體流式免疫組化大鼠正常食管上皮的發生；RNEEC/HL-012

溶菌酶抗體流式免疫組化大鼠正常食管上皮；RNEEC/HL-011

孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體流式免疫組化大鼠正常皮膚角質(zhì)進一步完善；RNSK/HL-010