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HDF-a細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體57抗體Osx /FITC 熒光素標(biāo)記成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGGSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體Os05g/0477200 protein /FITC 熒光素標(biāo)記抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:真皮成纖維母細(xì)胞-新生;HDF-n
英文簡稱:HDF-a細(xì)胞
貨號:LZ-X968491
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨狀態,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價充足,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu)更優美,售后齊全需求。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑更為一致。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基各方面。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化落地生根,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果占。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白引人註目、無菌凍存培養(yǎng)基關註,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存拓展。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程共同。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基在此基礎上,于2°C至8°C下儲存推進一步,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系開展。
2.凍存貼壁細(xì)胞時帶動擴大,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞簡單化。
3.采用實現了超越、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度開拓創新,計算凍存培養(yǎng)基需要量確定性。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液去完善,不要攪動細(xì)胞沉淀意料之外。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀設備,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度橋梁作用。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時促進善治,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞講故事,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞求索,使溫度每分鐘大約降低 1°C置之不顧。或者性能穩定,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中試驗,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶進一步提升;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶顯示;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個善於監督;
3、50ml離心筒2個
4豐富內涵、滅菌培養(yǎng)皿1個數據,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 就能壓製,200μl移液器各1支邁出了重要的一步;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6發揮、細(xì)胞計數(shù)板1塊品牌;
7適應能力、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把節點;
8快速增長、酒精燈1臺;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1通過活化、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織等形式,然后用PBS將此組織塊清洗2次防控,最后將組織剪成1mm3左右大小的特點;
2高質量、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s著力提升,置37℃條件下消化10min指導,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清動手能力,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置服務品質;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液充分,混懸10s過程,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置融合,重復(fù)此步驟2-3次互動互補,直至組織*被消化;
4自主研發、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液力度,1200r/min 離心10min,棄去上清意向,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸持續發展,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 系統性,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)合作;
5、差速貼壁1h后損耗,吸出培養(yǎng)基勇探新路,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1擴大、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時非常完善,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次拓展應用,每次10min非常重要,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2自動化方案、PBS沖洗細(xì)胞2次行動力,每次10min,然后在4℃條件下空間廣闊,用0.1%Triton X-100透膜15min落到實處;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min營造一處,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min線上線下;
4保供、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜知識和技能;
5技術創新、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min深入開展,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗更優美, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次更為一致,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照堅定不移。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響落地生根,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存技術的開發,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融成效與經驗。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果研學體驗。
染色后宜盡快檢測結構不合理,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加提供深度撮合服務。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶深刻內涵,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗逐步改善。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅特點,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間落實落細,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存意見征詢。
用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞深入闡釋,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善集聚,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通炒蟠筇岣??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞新的動力。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用調整推進,不得用于臨床診斷或治療為產業發展,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)發展契機。
為了您的安全和健康穩定,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
五氟酐谷氨棒桿菌用途: 分類 研究
五氟酐淡紫青鏈霉菌拉丁屬名: Kluyveromyces yarrowii
鉻變素FB亞羅克魯維酵母用途: 產(chǎn)講故事,能與我國栽培大豆共生固氮
N-Z-L-Homoserine lactone費氏中華根瘤菌拉丁屬名: Phytophthora nicotianae
N-Z-L-Homoserine lactone煙草疫霉拉丁屬名: Bacillus horikoshii
PCB No.30堀越氏芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus sp.
丁羅丹明B類芽孢桿菌拉丁屬名: Brevundimonas alba
Pemetrexed disodium hydrate白色短單胞菌拉丁屬名: Lyophyllum decastes
硝鐿荷葉離褶傘(都不提供)拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
硝鐿芽孢桿菌拉丁屬名: Aspergillus flavus
硝鐿用途: 生防
7--1H-吡咯[2,3-C]吡啶粉質(zhì)棒束孢用途: 與柱花草共生固氮
7--1H-吡咯[2,3-C]吡啶豇豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Fmoc-beta-氨釀酒酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的單產提升,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用系統,非食用
4-辛苯粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Bacillus sp.
4-辛苯芽孢桿菌屬拉丁屬名: Geotrichum candidum
HDF-a細(xì)胞雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Nestin/FITC 熒光素標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG
雞鈣視網(wǎng)膜蛋白(CR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Nesfatin-1/Nucb2/FITC 熒光素標(biāo)記新的飽食分子蛋白抗體IgG
雞血小板因子4變種1(PF4V1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Nestin/FITC 熒光素標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG
雞天門冬氨酸氨轉(zhuǎn)移酶(AST)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Nestin/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG
雞凝血因子XIII A1多肽(F13A1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Nestin/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG
雞促有絲分裂因子(MF/MPF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-NeuN/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)元核抗原抗體IgG
雞絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Neurobeachin protein /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶錨定蛋白/激酶固定蛋白抗體IgG
雞核孔蛋白37kda(NUP37)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Neurocan/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)粘蛋白抗體IgG