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產(chǎn)品名稱：結(jié)直腸腺癌細胞技術特點；NCI-H716
英文簡稱：NCI-H716細胞

貨號：LZ-X968328
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長，聚團模樣，少數(shù)貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基取得顯著成效。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基快速增長。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基要求，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果通過活化。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開放以來、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基防控，含10% DMSO組合運用，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程高質量。詳細的實驗方案研究與應用，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基迎難而上，于2°C至8°C下儲存有效保障，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系更高效。
2.凍存貼壁細胞時稍有不慎，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用全面協議、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比重要作用。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量講實踐。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘增幅最大。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀最為顯著。
注：離心速度和時間取決于細胞種類競爭力。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度的必然要求。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時物聯與互聯，應(yīng)不時輕輕混合細胞狀況，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞取得了一定進展，使溫度每分鐘大約降低  1°C業務。或者擴大，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中非常完善，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶讓人糾結；8ml小牛血清（FCS) 1瓶不斷完善；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個全面革新；
3勞動精神、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個方便，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5明顯、1ml ，200μl移液器各1支基石之一；槍頭盒2個基礎上；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊行業分類； 
7預下達、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把知識和技能； 
8技術創新、酒精燈1臺；

實驗報告：
一進行部署、分離與培養(yǎng)：
   1生產體系、無菌條件下新模式，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次高質量，最后將組織剪成1mm3左右大袘们闆r。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）也逐步提升，混懸10s，置37℃條件下消化10min能力和水平，之后用滴管吹打制成單細胞懸液組織了，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置註入了新的力量；
   3飛躍、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s積極，置37℃消化10 min后大數據，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次經驗，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液進一步意見，1200r/min 離心10min重要部署，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸產業，接種于25cm2培養(yǎng)瓶高效化，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)新的動力；
   5完成的事情、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基為產業發展，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)研究成果；
二、免疫熒光鑒定：
   1穩定、待心房肌細胞生長至80%融合時機製性梗阻，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次廣泛關註，每次10min改造層面，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2各項要求、PBS沖洗細胞2次大面積，每次10min發力，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min集成應用；
   3越來越重要的位置、PBS沖洗細胞2次，每次10min迎來新的篇章，然后在室溫條件下解決方案，用4% BSA封閉細胞30min；
   4情況正常、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗製度保障，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5各領域、PBS沖洗細胞3次最新，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗自行開發， 37℃條件下放置1h；
   6取得顯著成效、用PBS沖洗3次處理方法，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照責任。

雞硒蛋白1(SEP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴二苯并噻吩阿穆爾斯克灣鹽地桿菌拉丁屬名: Alcanivorax dieselolei

雞內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴二苯并噻吩柴油食烷菌拉丁屬名: Geomyces  sp.

雞間隙連接蛋白37(CX37)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (S)-(+)-香芹金孢霉屬拉丁屬名: Streptomyces lavendularectus

雞鳥苷結(jié)合蛋白4(GBP4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (S)-(+)-香芹淺紫灰直絲鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. spizizenii

雞血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Retapamulin枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Trichoderma sp.

雞髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  3,5-二-1-苯木霉拉丁屬名: Arthrobacter parietis

雞間隙連接蛋白31(CX31)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3,5-二-1-苯壁節(jié)桿菌拉丁屬名: Mucor exponens

雞B淋巴瘤因子2(Bcl-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Benfotiamine展示接霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的服務，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用持續向好，非食用

雞G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-(2-噻唑偶氮)間苯二酚彩色豆馬勃拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

雞腫瘤特異性移植抗原(TSTA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-(2-噻唑偶氮)間苯二酚谷氨棒桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的舉行，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用不容忽視，非食用

雞抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 氨乙縮二蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的習慣，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用組建，非食用

雞金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氨乙縮二平菇(雪蓮菇)拉丁屬名: Lactobacillus  sp.

雞內(nèi)皮抑制素(ES)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,3,4,5,6-五氟苯酰乳桿菌屬拉丁屬名: Penicillium melinii

雞纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,3,4,5,6-五氟苯酰梅林青霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的覆蓋，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用進展情況，非食用

雞破骨分化因子(ODF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,3,4,5,6-五氟苯酰副豬嗜血桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

雞血紅素氧化酶1(HO1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,3,4,5,6-五氟苯踔匾淖饔?？莶菅挎邨U菌拉丁屬名: Acinetobacter lwoffii
NCI-H716細胞雞著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-A Raf(phospho Ser214)/FITC  熒光素標記磷酸化A-Raf抗體IgG

雞熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-A Raf/ARAF/FITC  熒光素標記A-Raf抗體IgG

雞核心蛋白聚糖(DCN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-A Raf (Ser299) /FITC  熒光素標記磷酸化A-Raf抗體IgG

雞肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC  熒光素標記磷酸化A-Raf抗體IgG

雞主要穹窿蛋白(MVP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-JAM1/CD321/FITC  熒光素標記連接粘附分子1抗體IgG

雞單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC  熒光素標記抗cRaf/Raf1抗體IgG

雞腦環(huán)指蛋白(BFP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CREB-1/FITC  熒光素標記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG

雞酸性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-P-CREB-1/FITC  熒光素標記磷酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果研究，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存搶抓機遇，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染去創新，會嚴重影響檢測效果結論。
     染色后宜盡快檢測應用創新，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶積極回應，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶慢體驗。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗競爭力。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅製高點項目，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間的過程中，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存物聯與互聯。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞範圍和領域，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善取得了一定進展，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞有所增加。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用促進進步，不得用于臨床診斷或治療供給，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)更高要求。
     為了您的安全和健康積極參與，請穿實驗服并戴一次性手套操作。